劉光耀，劉莉

（江蘇省泰州市中醫(yī)院病理科，江蘇　泰州　225300）

胃癌是世界上發(fā)病率僅次于肺癌的惡性腫瘤，在中國(guó)，隨著人們生活水平的不斷提高，胃癌更是發(fā)展成為發(fā)病率最高的惡性腫瘤[1]。臨床治療中，腫瘤的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)是胃癌患者治療效果不理想的主要因素，而腫瘤細(xì)胞的侵襲、浸潤(rùn)又為腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的基礎(chǔ)。胃癌細(xì)胞能利用自身或通過激發(fā)宿主細(xì)胞使其分泌基質(zhì)降解酶從而改變基底膜的構(gòu)造，破壞基底膜的屏蔽作用使得胃癌細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移到其他部位[2]。缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）是在腫瘤細(xì)胞缺氧反應(yīng)的調(diào)節(jié)過程中起主要作用的轉(zhuǎn)1錄因子，使得腫瘤細(xì)胞自身可以調(diào)整缺氧微型環(huán)境，并且可以催化腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移。基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞外部基質(zhì)的降解過程的蛋白酶類。相關(guān)研究證明，HIF-1α、MMP-2和多類惡性腫瘤的侵潤(rùn)、轉(zhuǎn)移密切有關(guān)[3]。本文通過采用免疫組化SP二步法測(cè)定胃癌組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α、基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)情況，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并分析缺氧誘導(dǎo)因子-1α、基質(zhì)金屬蛋白酶-2和胃癌患者相關(guān)臨床的病理性因素的關(guān)系，進(jìn)一步分析HIF-lα和MMP-2之間表達(dá)的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料選取2012年1月～2016年12月在本院進(jìn)行治療的60例胃癌患者作為研究對(duì)象，所有患者均經(jīng)病理檢測(cè)確診為胃癌，在術(shù)前均未進(jìn)行放療、化療。其中男39例，女21例，年齡36～82歲，平均（59.6±9.7）歲。按照胃癌病例分期為Ⅰ期8例、Ⅱ期11例、Ⅲ期25例、Ⅳ期16例；高分化腺癌患者為8例，中分化腺癌患者為14例，低分化腺癌患者38例；胃部周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者為41例，未發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者為19例；其中浸潤(rùn)到達(dá)漿膜層的患者為38例，未達(dá)漿膜層的患者為22例。

1.2檢測(cè)方法采用免疫1組化SP二步法檢測(cè)胃癌組織中的缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）。采取已知的陽(yáng)性組織的切片作為陽(yáng)性對(duì)照，采取PB1S替代一類抗當(dāng)做陰性對(duì)照。嚴(yán)格按照SP試劑的說明書進(jìn)行規(guī)范性的操作。陽(yáng)性的判斷標(biāo)準(zhǔn)為在腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)、腫瘤細(xì)胞胞核檢測(cè)出棕黃色及棕褐色的顆粒。于高倍顯微鏡下觀察，每個(gè)切片里隨機(jī)性的選取4個(gè)視野，在每個(gè)視野內(nèi)計(jì)數(shù)250個(gè)細(xì)胞，即每個(gè)切片共計(jì)1 000個(gè)細(xì)胞，統(tǒng)計(jì)分析每個(gè)切片的陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分比例。組織切片內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥1%則判斷為陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)小于1%則判斷為陰性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用表示，予以t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，予以χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）在胃癌組織切片中表達(dá)為陽(yáng)性的例數(shù)為34例，陽(yáng)性表達(dá)率為56.7%，其陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤的大小呈現(xiàn)為正相關(guān)性；基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）在胃癌組織切片中表達(dá)為陽(yáng)性的例數(shù)為31例，陽(yáng)性表達(dá)率為51.7%，其陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)為正相關(guān)性。在胃癌組織中同一臨床病理分類里HIF-1α和MMP-2的陽(yáng)性表達(dá)率為正相關(guān)性（r=0.236，P＜0.05），見表1。

表1　HIF-1α、MMP-2的表達(dá)和胃癌相關(guān)臨床病理因素的關(guān)系[n（%）]Table1 Therelationshipbetweentheexpressionof HIF-1α andMMP-2 and clinicopathological factors related to gastric cancer[n(%)]

3　討論

低氧是腫瘤組織細(xì)胞微觀環(huán)境的基本特征，近年來不斷有研究證明低氧環(huán)境的調(diào)節(jié)和控制為惡性腫瘤預(yù)后程度的決定性因素[3]。腫瘤細(xì)胞的迅速繁殖使得組織細(xì)胞處于缺氧的狀態(tài)，誘使了缺氧誘導(dǎo)因子-1的表達(dá)[4]。缺氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）是缺氧狀態(tài)下生成的一類轉(zhuǎn)錄因子，而缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）是其氧環(huán)境調(diào)整的亞單位，直接影響缺氧誘導(dǎo)因子-1的表達(dá)。相關(guān)研究證明，HIF-1α與腫瘤細(xì)胞的繁殖、死亡、代謝及生成血管有緊密的聯(lián)系，在肝癌、腦瘤等多類腫瘤組織中進(jìn)行表達(dá)，在腫瘤組織細(xì)胞的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移過程中起到了關(guān)鍵的作用[5-6]。基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是由腫瘤細(xì)胞分泌的蛋白酶，能夠分解細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞基底膜，參與腫瘤細(xì)胞的繁殖、侵襲及轉(zhuǎn)移等行為，并可以推進(jìn)腫瘤組織微環(huán)境中形成血管，與臨床上腫瘤的發(fā)生及發(fā)展緊密相關(guān)。相關(guān)研究證明，MMPs及抑制因子TIMPs，尤其是MMP-2在胃癌的侵襲、轉(zhuǎn)移進(jìn)程中起到了關(guān)鍵性的作用[7-8]。

本研究結(jié)果證明，HIF-1α和MMP-2的陽(yáng)性表達(dá)率和腫瘤組織的病理學(xué)分級(jí)、TNM分期表現(xiàn)為正相關(guān)性，表明HIF-1α和MMP-2可當(dāng)做胃癌腫瘤程度的相關(guān)評(píng)估指標(biāo)；HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤的大小呈現(xiàn)為正相關(guān)性，MMP-2的陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)為正相關(guān)性，證明HIF-1α、MMP-2與腫瘤組織生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移有一定的相關(guān)性；HIF-1α和MMP-2在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率呈現(xiàn)正相關(guān)性，證明兩者可能以先后抑或同步的形式調(diào)節(jié)和胃癌組織有關(guān)的蛋白酶，或者兩者由于缺氧刺激而同時(shí)產(chǎn)生。

綜上所述，HIF-1α、MMP-2和胃癌組織的侵襲、轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)密切相關(guān)，并且HIF-1α、MMP-2的表達(dá)有一定程度的協(xié)同作用。

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