劉紫娟，袁 蕊，王 娜，李炳言，賈斯淳，宗毓錚，李 萍，郝興宇

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，山西太谷 030801）

工業(yè)革命以來，全球氣溫持續(xù)上升，氣候變暖同時(shí)也影響全球水資源的分布、降水量的變化，導(dǎo)致部分地區(qū)干旱[1]。水分是植物生長的必需底物，植物的基因表達(dá)和新陳代謝都會受到干旱的影響。我國是缺水國家，在干旱和半干旱地區(qū)，由于降水量少、土壤水分缺乏，不僅造成作物減產(chǎn)，也嚴(yán)重影響了林業(yè)發(fā)展和生態(tài)環(huán)境[2]。因此，探究植物適應(yīng)干旱脅迫的生理機(jī)制對干旱區(qū)植物生長和生態(tài)發(fā)展具有一定意義。

八寶景天（Hylotelephium erythrostictum）又名八寶、活血三七、對葉景天，為景天科八寶屬多年生草本植物[3]。八寶景天是景天酸代謝（CAM）植物，葉肉質(zhì)，喜強(qiáng)光和干燥，管理方式粗放，病蟲害較少，是一種常見的植物，由于其具有較高的觀賞價(jià)值和較低的養(yǎng)護(hù)成本，在城市建設(shè)中被廣泛應(yīng)用于園林綠化，特別是近些年快速發(fā)展的屋頂綠化中[4]。CAM植物由于其代謝方式特殊，均有一定的抗旱性，國內(nèi)外學(xué)者針對CAM植物已有許多研究，多探討CAM植物的光合代謝方式[5-7]，針對其抗旱性的研究主要集中在鐵皮石斛、垂盆草、東南景天、細(xì)葉景天、紅景天等[8-10]，對八寶景天的相關(guān)研究較少，特別是一天中白天和夜晚生理變化的研究還未見報(bào)道。

本試驗(yàn)擬探究干旱脅迫條件下八寶景天的葉片生理變化特征，旨在為CAM植物的抗旱機(jī)理研究奠定基礎(chǔ)，為八寶景天今后的應(yīng)用和發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試景天品種為八寶，由山西農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)基地（37.42°N，112.58°E）旱棚中進(jìn)行，旱棚高3.5 m，面積為4 m×4 m。八寶景天于2016年4月24日移植于長×寬×高為60 cm×40 cm×35 cm塑料箱中，箱子底部打5個孔用于排水，箱內(nèi)裝土約28cm高，2016年10月20日割除八寶景天的地上部，留根于土中，2017年3月25日發(fā)芽。共栽植10盆八寶景天，前期正常灌水。5盆作對照處理（CK），植株發(fā)芽后控制土壤含水量為土壤飽和含水量的70%～80%；另外5盆作干旱處理（T），植株發(fā)芽30 d后（之前無水分脅迫）控制土壤含水量為土壤飽和含水量的30%～40%，其他管理措施一致。

1.3 生育期的確定

八寶景天開始發(fā)芽至發(fā)芽后107 d為營養(yǎng)生長期，期間植株莖伸長增粗，葉片增多，發(fā)芽后107～118 d陸續(xù)有植株長出花蕾，發(fā)芽后第119天有80%以上植株長出花蕾，進(jìn)入現(xiàn)蕾期。

1.4 測定項(xiàng)目及方法

1.4.1 葉片表面氣孔的測定 在營養(yǎng)生長期（發(fā)芽后102 d）10：00和22：00，每個處理分別選取有代表性的八寶景天5株（每箱1株），每株選取倒數(shù)第7片完全展開葉，用指甲油粘片法測量并計(jì)算氣孔密度[11]；在40倍物鏡下選取視野內(nèi)8個氣孔，測量其長度、寬度，并測量氣孔開度的長度和的寬度，計(jì)算氣孔開度。氣孔開度（c）＝π·ab，其中，a＝1/2 氣孔開度的長度，b＝1/2氣孔開度的寬度[12]。

1.4.2 葉片抗逆指標(biāo)的測定 在營養(yǎng)生長期（發(fā)芽后 102 d）和現(xiàn)蕾期（發(fā)芽后 119 d）的 10：00和22：00，每個處理分別選取有代表性的植株5株（每箱1株），每株選取其倒數(shù)第5片完全展開葉，用于測定抗逆生理指標(biāo)。采用愈創(chuàng)木酚比色法測定過氧化物酶（POD）活性，采用硫代巴比妥酸顯色法測定丙二醛（MDA）含量，采用酸性茚三酮比色法測定脯氨酸（Pro）含量[13]。

1.4.3 葉片含水量的測定 利用1.4.2選取的葉片，剪成0.5 cm小段后測鮮質(zhì)量，然后于60℃烘箱中12 h烘干，測干質(zhì)量。含水量＝（鮮質(zhì)量－干質(zhì)量）/鮮質(zhì)量×100%。

1.4.4 葉片蘋果酸含量的測定 利用1.4.2選取的葉片，采用Goodban法進(jìn)行蘋果酸含量的測定[7]。

1.4.5 葉片色素含量的測定 利用1.4.2選取的葉片，用丙酮∶乙醇∶蒸餾水為4.5∶4.5∶1的混合液作為葉綠素提取液，再用分光光度計(jì)測定吸光值，并計(jì)算光合色素含量。

1.4.6 葉片糖類物質(zhì)含量的測定 利用1.4.2選取的葉片，采用3，5-二硝基水楊酸法測定還原糖含量，采用蒽酮-硫酸法測定可溶性糖、淀粉和纖維素含量[14]。

1.4.7 各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)的測定 于植株現(xiàn)蕾期將地上部分收獲，對未取樣植株分別測量其株高、莖粗、葉片數(shù)，于60℃烘箱48h烘干，測定單株總生物量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

利用Excel 2007軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和作圖。用SPSS19軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析（α＝0.05）。圖表中數(shù)據(jù)均為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果與分析

2.1 干旱脅迫對八寶景天葉片氣孔的影響

干旱脅迫使八寶景天葉片上下表皮細(xì)胞變小，上下表皮的氣孔長度和開度減小，但氣孔密度增加（圖1）。與對照相比，干旱脅迫使八寶景天葉片上表皮的氣孔長度在10：00和22：00分別顯著降低19.9%和17.3%，10：00和22：00的氣孔開度分別顯著降低30.7%和16.6%，但是氣孔密度分別顯著增加36.8%和28.8%；下表皮的氣孔長度在10：00和22：00分別顯著降低23.7%和20.4%，氣孔開度在10：00和22：00分別顯著降低49.2%和11.5%，但 氣孔密度增加（表1）。

表1 干旱脅迫對八寶景天氣孔的影響

2.2 干旱脅迫對八寶景天葉片含水量的影響

干旱脅迫下，八寶景天葉片含水量在營養(yǎng)生長期和現(xiàn)蕾期的10：00和22：00均無顯著變化（圖 2）。

2.3 干旱脅迫對八寶景天葉片MDA含量的影響

干旱脅迫使八寶景天葉片MDA含量在營養(yǎng)生長期 10：00，現(xiàn)蕾期 10：00 和 22：00 均有降低，在營養(yǎng)生長期22：00有所升高。其中，現(xiàn)蕾期10：00和22：00分別比對照顯著降低22.6%和27.5%（圖3）。

2.4 干旱脅迫對八寶景天葉片POD活性的影響

與對照相比，干旱脅迫使八寶景天葉片POD活性在營養(yǎng)生長期和現(xiàn)蕾期的22：00分別顯著降低41.0%和33.7%，在現(xiàn)蕾期10：00顯著升高128.3%，但在營養(yǎng)生長期10：00無明顯變化（圖4）。

2.5 干旱脅迫對八寶景天葉片脯氨酸含量的影響

與對照相比，干旱脅迫使八寶景天脯氨酸含量在營養(yǎng)生長期10：00和22：00分別顯著升高3.5%和1.8%，但在現(xiàn)蕾期脯氨酸含量變化不顯著（圖5）。

2.6 干旱脅迫對八寶景天葉片蘋果酸含量的影響

干旱脅迫條件下，八寶景天葉片蘋果酸含量在營養(yǎng)生長期和現(xiàn)蕾期10：00分別比對照顯著降低24.7%和50.1%，但在2個時(shí)期22：00均無明顯變化（圖 6）。

2.7 干旱脅迫對八寶景天葉片光合色素的影響

在干旱脅迫條件下，八寶景天葉片的葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量在營養(yǎng)生長期和現(xiàn)蕾期的10：00均為升高趨勢，其中，葉綠素a含量在營養(yǎng)生長期和現(xiàn)蕾期10：00分別比對照顯著升高36.4%和32.5%；而在2個時(shí)期的22：00均呈下降趨勢，其中，營養(yǎng)生長期22：00葉綠素b含量顯著降低24.4%，現(xiàn)蕾期22：00葉綠素a含量顯著降低23.8%（表 2）。

表2 干旱脅迫對八寶景天光合色素的影響

2.8 干旱脅迫對八寶景天葉片糖類物質(zhì)含量的影響

與對照相比，干旱脅迫使八寶景天葉片中還原糖、可溶性糖、淀粉和纖維素在整個生育期全天總體上呈上升趨勢，其中，還原糖含量在2個時(shí)期的22：00分別升高24.6%和45.8%，可溶性總糖含量在現(xiàn)蕾期10：00和22：00分別顯著升高25.3%和24.7%，淀粉含量在營養(yǎng)生長期10：00，22：00和現(xiàn)蕾期10：00分別顯著升高40.3%，35.9%和147.1%，纖維素含量在營養(yǎng)生長期10：00和22：00分別顯著升高31.7%和25.2%，但在現(xiàn)蕾期卻呈下降趨勢，其中，10：00 時(shí)顯著下降 36.6%（表 3）。

表3 干旱脅迫對八寶景天葉片糖類含量的影響 %

2.9 干旱脅迫對八寶景天各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)的影響

與對照相比，干旱脅迫使八寶景天株高、莖粗、單株葉數(shù)和單株總生物量分別顯著降低了36.2%，32.3%，24.6%和35.2%（表4）。

表4 干旱脅迫對八寶景天各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)的影響

3 討論

以往的研究通常認(rèn)為，干旱脅迫會促使植物葉片氣孔關(guān)閉或密度減小，從而減少植物蒸騰作用中水分的散失，提高植物的抗旱性[15]；但也有研究顯示，在干旱脅迫下，植物氣孔密度增大，但其長度、寬度和開度均減小[16]。本試驗(yàn)中，八寶景天在干旱脅迫下葉片上下表皮氣孔的長度、寬度和開度均減小，但氣孔密度增加。氣孔密度增加的原因可能是由于干旱景天葉面積減小，使單位葉面積氣孔密度增加。而氣孔長度、寬度和開度減小的原因是由于干旱影響了氣孔的發(fā)生、分化和發(fā)育，使氣孔變小。氣孔變小使蒸騰減弱，提高水分利用效率[17]。

干旱脅迫會破壞植物的細(xì)胞膜系統(tǒng)，使植物體內(nèi)自由基增加，從而引起膜脂過氧化作用，膜脂過氧化的產(chǎn)物是MDA，其含量的多少可表示膜脂的過氧化程度和植物的抗逆性[18]。本試驗(yàn)中，干旱脅迫使八寶景天MDA含量在營養(yǎng)生長期10：00和現(xiàn)蕾期均降低，可能是由于八寶景天具有較強(qiáng)的抗旱性，干旱對葉片的膜脂過氧化作用影響不大。植物中的膜脂過氧化防御系統(tǒng)會保護(hù)細(xì)胞免遭傷害，POD是植物體內(nèi)清除H2O2的主要酶類之一，能催化H2O2氧化后產(chǎn)生H2O[19]。本試驗(yàn)中，干旱脅迫使八寶景天POD活性在22：00時(shí)均下降，現(xiàn)蕾期10：00升高，白天溫度較高，可能需要更多的POD防御膜脂的過氧化，夜間溫度降低，干旱脅迫有所緩解，所以，POD活性下降。Pro是一種滲透調(diào)節(jié)物，可以增強(qiáng)植物的抗旱能力，本試驗(yàn)中，干旱脅迫下八寶景天葉片的Pro含量除現(xiàn)蕾期10：00外均增加，這也反映出八寶景天是一種抗旱植物。干旱脅迫下植物葉片的含水量可以反映植物保水能力的大小。本試驗(yàn)中，干旱脅迫對八寶景天葉片的含水量并無顯著影響，說明八寶景天在通過氣孔調(diào)節(jié)和Pro、糖類物質(zhì)等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的調(diào)節(jié)后，在干旱脅迫下有較好的保水能力。

八寶景天是CAM植物，光合方式有其特殊性，表現(xiàn)為：夜間氣孔開放，吸收CO2，以蘋果酸的形式貯存，白天蘋果酸分解，釋放CO2，進(jìn)行光合作用[7]。本試驗(yàn)中，干旱脅迫使八寶景天葉片蘋果酸含量在上午10：00顯著下降，說明干旱脅迫抑制了夜間蘋果酸的積累，這是因?yàn)楦珊得{迫使氣孔開度減小，影響了CO2的吸收。

葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素是植物進(jìn)行光合作用所需的最主要的色素，其含量的多少會直接影響植物的生長發(fā)育[20]。本試驗(yàn)中，干旱脅迫使八寶景天的葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量在營養(yǎng)生長期和現(xiàn)蕾期10：00升高，但22：00下降，這與之前的研究結(jié)果有所不同，可能是由于八寶景天在干旱條件下會產(chǎn)生更多光合色素促使光合作用的進(jìn)行，但在夜間不進(jìn)行光反應(yīng)時(shí)，為維持自身正常生理活動，光合色素含量下降。但其調(diào)節(jié)機(jī)制有待進(jìn)一步研究探索。

可溶性糖也是植物體內(nèi)參與滲透調(diào)節(jié)的重要物質(zhì)，植物在遭受脅迫時(shí)，可以通過調(diào)節(jié)可溶性糖的多少來維持正常的滲透壓，淀粉在植物遭受逆境時(shí)可以與可溶性糖相互轉(zhuǎn)化，纖維素是細(xì)胞壁的主要組成部分，可以使植物保持挺拔[21-23]。本試驗(yàn)中，還原糖、可溶性糖和淀粉含量在不同時(shí)期均有增加的趨勢，這也是八寶景天抵抗干旱的一種形式。纖維素含量在營養(yǎng)生長期均增加，但在現(xiàn)蕾期降低，可能是由干旱后期植株缺水時(shí)間過長、碳素積累受限所致。

干旱脅迫會使植株的生長形態(tài)發(fā)生變化，表現(xiàn)在細(xì)胞、組織、器官個體等不同水平[24-25]。一般認(rèn)為，干旱脅迫會使植物的株高、莖粗、生物量均降低，導(dǎo)致作物減產(chǎn)[26]。本試驗(yàn)中，干旱脅迫使八寶景天株高、莖粗、單株葉片數(shù)和單株生物量都降低，葉片的減少和植株矮小可以減少植株水分的散失和植物對水分的需求，有利于植株抵抗干旱環(huán)境。

在投融資方案上充分發(fā)揮政府投資對社會資本的引導(dǎo)放大作用，吸引社會資本參與。要堅(jiān)持以市場為導(dǎo)向，以制度建設(shè)為重點(diǎn)，形成市場融資為主導(dǎo)、政府投資為補(bǔ)充、民間投資健康發(fā)展的投融資格局。在旅游、醫(yī)療、教育、停車等社會化產(chǎn)業(yè)服務(wù)領(lǐng)域，堅(jiān)持以政策導(dǎo)向引領(lǐng)，社會資本主導(dǎo)參與建設(shè)為原則，通過出讓特許經(jīng)營權(quán)、第三方付費(fèi)、使用者付費(fèi)結(jié)合少量政府補(bǔ)助的方式，鼓勵社會資本加大此類應(yīng)用的建設(shè)力度和速度。利用社會資本的靈活性和企業(yè)服務(wù)的創(chuàng)新性實(shí)現(xiàn)智慧城市的長期可持續(xù)發(fā)展。

4 結(jié)論

本研究表明，干旱脅迫下，八寶景天葉片氣孔變小，氣孔開度降低，能夠有效地減少水分散失，同時(shí)影響夜間CO2的吸收，降低了蘋果酸的積累；干旱脅迫使八寶景天MDA含量降低，使POD活性白天升高，夜間降低。現(xiàn)蕾期Pro含量、可溶性總糖和淀粉含量均升高，以提高其抗旱性；干旱脅迫下，八寶景天葉片光合色素含量在白天增多，夜晚降低，有利于其光合效率的提高。干旱使八寶景天株高、莖粗、單株葉片數(shù)和單株總生物量均降低，可以有效地減少水分消耗?？傊?，八寶景天在干旱脅迫下通過氣孔開度變小，POD活性增加進(jìn)行膜脂過氧化防御，Pro和可溶性糖含量增加進(jìn)行滲透調(diào)節(jié)，提高日間光合色素含量保證光合作用的有效進(jìn)行等方式提高其干旱適應(yīng)能力，表現(xiàn)了較強(qiáng)的抗旱性。

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