◎ 穆寶珣
(河北仁合益康藥業(yè)有限公司,河北 石家莊 050000)
超高效液相色譜法具有分離度高的優(yōu)點(diǎn),可以大大提高質(zhì)譜儀的分析性能,提高質(zhì)譜儀的檢測(cè)靈敏度,從而提高檢測(cè)準(zhǔn)確性,所以加強(qiáng)超高效液相色譜法在藥品和食品檢測(cè)中的應(yīng)用十分重要。
超高效液相色譜法對(duì)傳統(tǒng)的液相色譜技術(shù)進(jìn)行了完善,實(shí)現(xiàn)了分離系統(tǒng)創(chuàng)新,改善了色譜的分離度、樣品通量以及靈敏度,使數(shù)據(jù)信息更加完整。超高效液相色譜法的理論基礎(chǔ)是Van Deemter 方程,該方程描述了線速度和塔板理論高度的關(guān)系,塔板高度和渦流擴(kuò)散系統(tǒng)、縱向擴(kuò)散系數(shù)、傳質(zhì)阻抗系統(tǒng)以及流動(dòng)相速度相關(guān)。一般情況下,色譜中的塔板高度會(huì)隨著色譜填料顆粒的減少而降低,但色譜柱的柱效會(huì)增加,色譜柱的柱效受填裝不規(guī)則因素的影響。液相色譜塔板高度和填料顆粒徑以及流速之間的關(guān)系如圖1所示。
圖1 液相色譜塔板高度和填料顆粒徑以及流速的關(guān)系圖
從圖1 可以看出,不同粒徑的色譜柱有不同的最佳流速,隨著填料顆粒粒徑的減小,最高柱效點(diǎn)也隨著線速度移動(dòng),而且線速度的范圍越來(lái)越大。所以在使用超高效液相色譜技術(shù)時(shí),應(yīng)當(dāng)使用填料粒徑較小的色譜柱,以更好地發(fā)揮高流速的作用,擴(kuò)高效液相色譜技術(shù)的使用范圍,同時(shí)隨著填料顆粒粒徑的減小,分離度也會(huì)提高。
在進(jìn)行化學(xué)藥物成分分析時(shí),常常會(huì)出現(xiàn)樣品含量低的現(xiàn)象,導(dǎo)致分離難度大、分離時(shí)間長(zhǎng),使用超高效液相色譜法進(jìn)行藥物含量分析,可以大大提高分離效率以及分析速度,從而提高檢測(cè)靈敏度。比如,使用超高效液相色譜法分析氨氯地平貝那普利膠囊中的苯磺酸氨氯地平與鹽酸貝那普利含量,通過條件摸索,可實(shí)現(xiàn)苯磺酸氨氯地平與鹽酸貝那普利之間的分析,并且將其質(zhì)量濃度控制在5.14 ~51.4 μg·mL-1,因?yàn)辂}酸貝那普利的峰面積和苯磺酸氨氯地平的峰面積之間有著良好的線性關(guān)系,而且檢測(cè)后,兩種成分的回收率可達(dá)99%。此外使用超高效液相色譜法對(duì)水楊酸軟膏中的水楊酸成分進(jìn)行測(cè)定,選用231 nm 的檢測(cè)波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè),保證檢測(cè)出來(lái)的塔板系數(shù)最高,分離效果最好[1]。
超高效液相色譜法在中藥制劑藥物分析中也有著重要應(yīng)用。大部分中藥制劑的成分都比較復(fù)雜,而且目標(biāo)檢測(cè)物的濃度比較低,相似物比較多,很難進(jìn)行定量分析。應(yīng)用超高效液相色譜可以提高分離效果,提高檢測(cè)靈敏度,從而獲得較好的檢測(cè)結(jié)果。研究人員使用超高效液相色譜法對(duì)藿香正氣水中的7 種有效成分進(jìn)行測(cè)定,選用Acquity BEHC 18 色譜柱,使用乙腈-0.1%磷酸溶液對(duì)藿香正氣水進(jìn)行線性梯度洗脫,再分別在249、284、336 nm 處監(jiān)測(cè),檢測(cè)結(jié)果顯示藿香正氣水中的7 種有效成分(如甘草酸、歐前胡素、異歐前胡素)都在各自的線性范圍內(nèi)有著良好的線性關(guān)系。使用超高效液相色譜法對(duì)復(fù)方廣金錢草顆粒中的夏佛塔苷含量進(jìn)行檢測(cè),得出夏佛塔苷在1.562 5 ~400 μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系[2]。
食品在生活中極為重要,保證食品的安全是人類生存安全的重要保障,隨著經(jīng)濟(jì)水平的提高,人們對(duì)于食品的追求逐漸提升為對(duì)味覺的追求,而不再是為了救解決溫飽問題。隨著食品種類的增加,許多食品的安全得不到保證,特別是食品添加劑的運(yùn)用,加強(qiáng)食品添加劑的檢測(cè)是當(dāng)前急需解決的問題。比如許多食品的生產(chǎn)中會(huì)使用到人工合成的甜味劑,人體內(nèi)人工合成的甜味劑的量積累到一定程度時(shí),會(huì)對(duì)人體造成嚴(yán)重?fù)p傷,相關(guān)研究人員使用超高效液相色譜法對(duì)白酒中的甜味劑進(jìn)行了檢測(cè),發(fā)現(xiàn)白酒中含有阿斯巴甜、甜蜜素等多種人工合成甜味劑。隨著生活水平的提高,人們?cè)絹?lái)越注重營(yíng)養(yǎng)成分的吸收,所以營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑也逐漸被加入到各種食品當(dāng)中,但是泛濫地使用營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑會(huì)對(duì)人體的健康造成不良影響,使用超高效液相色譜法可對(duì)食品中多種維生素進(jìn)行檢測(cè),且線性良好,準(zhǔn)確度、分析效率都比較高,且可在9 min內(nèi)完成檢測(cè),得出檢測(cè)結(jié)果[3]。
超高效液相色譜法在非法添加物中也有著重要應(yīng)用,特別是三聚氰胺的檢測(cè)中,三聚氰胺是化工行業(yè)使用的原料,特別是有機(jī)化工,因?yàn)槿矍璋泛械?,可以增加蛋白的檢出量,導(dǎo)致部分不法生產(chǎn)商在奶粉等食品中非法添加,從而提高奶粉等食品的檢測(cè)蛋白含量,但是三聚氰胺會(huì)嚴(yán)重影響使用者的健康,所以加強(qiáng)對(duì)三聚氰胺的檢測(cè)非常重要。相關(guān)研究人員使用超高效液相色譜法以及質(zhì)譜儀對(duì)鴨肝以及奶粉中的三聚氰胺含量進(jìn)行檢,僅4 min 即可完成檢測(cè),而且線性關(guān)系良好,操作簡(jiǎn)單、迅速[4]。此外,也有研究人員使用超高效液相色譜法對(duì)食品中的蘇丹Ⅰ、蘇丹Ⅱ進(jìn)行檢測(cè),從而保證食品安全,避免非法添加劑的使用,保證人體的健康安全[5]。
農(nóng)民在種養(yǎng)殖過程中會(huì)使用農(nóng)藥,提高雜草的清除效率,提高種養(yǎng)殖產(chǎn)量,但是過度使用農(nóng)藥,會(huì)使農(nóng)作物中的農(nóng)藥殘留過量,影響人們的身體健康,污染土壤環(huán)境。所以加強(qiáng)對(duì)食品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)非常重要,但農(nóng)藥殘留量十分微小,對(duì)檢測(cè)儀器的靈敏度要求比較高,可使用超高效液相色譜法,并輔以質(zhì)譜儀,以0.2%的甲酸水以及乙腈作為流動(dòng)相,進(jìn)行梯度洗脫,檢測(cè)食品中農(nóng)藥殘留量,如大豆中除草劑含量的檢測(cè)。
日常的家禽養(yǎng)殖對(duì)獸藥的需求量比較大,這給獸藥的檢測(cè)帶來(lái)了較大挑戰(zhàn)。使用超高效液相色譜法進(jìn)行獸藥檢測(cè),可以大大提高檢測(cè)靈敏度,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。使用超高效液相色譜法對(duì)雞肉中殘留的激素含量進(jìn)行檢測(cè),僅需7.5 min,大大提高了檢測(cè)效率。
超高效液相色譜法具有較多優(yōu)點(diǎn),能夠快速且靈敏地檢測(cè)出各種含量的成分,被廣泛地應(yīng)用在食品檢測(cè)以及藥物檢測(cè)中,相關(guān)研究人員應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)對(duì)超高效液相色譜法的研究,不斷提高超高效液相色譜法的檢測(cè)效率及檢測(cè)準(zhǔn)確性。