多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育齡期女性常見的生殖代謝內(nèi)分泌疾病，患病率高達5%～10%[1]，臨床常表現(xiàn)為月經(jīng)異常、不孕、高雄激素征，卵巢多囊樣改變，可同時伴有肥胖、胰島素抵抗(insulin resistance,IR)、血脂代謝紊亂等代謝異常[2]。雖然目前其發(fā)病機制仍不完全明確，但IR以及隨之而來的代償性高胰島素血癥是其確切的發(fā)病機制之一，且占PCOS患者發(fā)病原因的70%[3]。近期發(fā)現(xiàn)的一種由肝臟和脂肪組織分泌的betatrophin，被認為有調(diào)節(jié)脂代謝、改善糖耐量的雙重作用[4]。資料[5-7]顯示，在IR的代謝性疾病(糖尿病、肥胖、妊娠期糖尿病等)患者中，均發(fā)現(xiàn)血清betatrophin水平較高，目前，國內(nèi)外對PCOS患者血清betatrophin水平的研究甚少，本研究旨在觀察初診PCOS患者血清中betatrophin的水平，分析其影響因素，探討其與PCOS的關(guān)系。

1　資料與方法

1.1一般資料根據(jù)2003年ESHRE/ASRM提出的鹿特丹診斷標準[8]，選擇2016年8月至2017年3月就診于安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院的初診PCOS患者81例，設(shè)為PCOS組，選擇同期本院體檢中心就診的30例健康女性為正常對照組。所有受試者均充分知情并自愿參加本研究。

1.2納入與排除標準PCOS組納入標準(符合以下3項中的2項，同時排除其他導(dǎo)致高雄激素血癥的疾病)：①稀發(fā)排卵或無排卵(閉經(jīng)指停經(jīng)時間≥6個月或3個以上月經(jīng)周期；月經(jīng)稀發(fā)指月經(jīng)周期≥35天及每年≥3個月不排卵)；②高雄激素的臨床或生化表現(xiàn)(面部、前胸及后背等處連續(xù)3個月以上多發(fā)痤瘡，多毛，脂溢性皮炎，總睪酮或雄烯二酮高于實驗室正常參考值)；③超聲檢查發(fā)現(xiàn)卵巢多囊樣改變(一側(cè)或雙側(cè)卵巢內(nèi)直徑在2～9 mm的卵泡數(shù)量≥12個和/或卵巢體積≥10 mL)。NC組納入標準：月經(jīng)周期規(guī)律(28～35 d)，無高雄激素的臨床及生化表現(xiàn)，超聲下未發(fā)現(xiàn)卵巢多囊樣改變。排除標準：①35歲<年齡<18歲；②存在其他引起雄激素升高的疾病，如先天性腎上腺皮質(zhì)增生、庫興綜合征、分泌雄激素的腫瘤等，以及其他引起排卵障礙的疾病，如高泌乳素血癥、甲狀腺功能異常、卵巢早衰和垂體或下丘腦性閉經(jīng)等；③存在中、重度肝腎功能不全，或自身免疫性疾病；④存在急慢性感染性疾??；⑤近3個月內(nèi)服用激素等影響糖脂代謝藥物者。

1.3方法

1.3.1一般資料采集由同一人采集所有受試者出生年月、初潮年齡、月經(jīng)周期、月經(jīng)開始紊亂的年齡、毛發(fā)變化情況等基本信息；同時測量兩組受試者身高(m)、體質(zhì)量(kg)、腰圍(cm)、臀圍(cm)。計算體質(zhì)指數(shù)(body mass index,BMI)；腰臀比(waist to hip,WHR)，WHR=腰圍/臀圍。

1.3.2生化指標測定所有受試者均于清晨空腹(至少禁食8 h)經(jīng)肘靜脈采血(月經(jīng)規(guī)律者于月經(jīng)周期第2～5天采血，月經(jīng)不規(guī)律或閉經(jīng)者任意時間)。所有血標本均于室溫下靜置30 min后以3 600 r/min離心6 min，取血清保存于-80℃冰箱，待統(tǒng)一檢測betatrophin。檢測指標包括：空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰島素(fasting insulin,FINS)、促黃體生成素(luteinizing,LH)、促卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、總睪酮(total testostrone,TT)、雄烯二酮(androstendion,AND)、性激素結(jié)合球蛋白(sex hormone-binding globulin,SHBG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high-ddensity lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low-ddensity lipoprotein,LDL)。計算穩(wěn)態(tài)模式IR指數(shù)(homeostatic model assessment insulin resistance,HOMA-IR)：HOMA-IR=(FBG×FINS)/22.5。游離睪酮指數(shù)(free testosterone index,FAI)=總睪酮(total testosterone,TT)/SHBG×100。

1.3.3血清betatrophin水平測定采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)(試劑盒購自湖北武漢EIAab公司)測定血清betatrophin水平。

2　結(jié)果

2.1兩組對象基本臨床指標及實驗室結(jié)果比較兩組對象年齡方面差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，PCOS組BMI、WHR、LH、LH/FSH、T、FAI、AND、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、HDL、LDL水平高于對照組，SHBG、FSH水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；PCOS組betatrophin水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表1。根據(jù)BMI將PCOS組分為非超重組(PCOS-NW,BMI<24 kg/m2)，超重或肥胖組(PCOS-OW/OB，BMI≥24 kg/m2)。比較兩組betatrophin水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCOS-OW/OB組血清betatrophin水平(166.55±123.75) pg/mL高于PCOS-NW組(112.60±67.92) pg/mL，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表1PCOS組與對照組臨床指標比較

臨床指標PCOS組(n=81)對照組(n=30)t值P值年齡(歲)25.68±4.1826.64±3.20-1.1110.269BMI(kg/m2)25.87±5.0621.40±2.174.2870.000WHR0.90±0.070.82±0.057.4820.000LH(mIU/L)9.02±4.766.36±3.033.4160.001FSH(IU/L)5.98±1.639.46±3.87-4.6080.000LH/FSHa1.61(0.80,2.08)0.71±0.38-8.1060.000TT(nmol/L)2.29±1.091.85±0.681.9900.043SHBG(nmol/L)32.52±18.6348.89±18.95-3.9920.000FAI9.70±7.654.58±2.705.1600.000AND(ng/mL)3.90±1.632.64±0.865.1760.000FBG(mmol/L)a5.32(4.78,5.66)4.78±0.75-28.6130.000FINS(uIU/L)23.77±14.709.00±4.188.1360.000HOMA-IR5.57±3.731.90±0.848.2600.000TC(mmol/L)4.57±0.873.74±0.694.5080.000TG(mmol/L)a1.43(1.02,1.95)0.89±0.40-9.0370.000HDL(mmol/L)1.20±0.321.04±0.282.5070.014LDL(mmol/L)2.84±0.802.37±0.612.7890.006btatrophin(pg/mL)148.57±110.9195.52±58.593.2020.002

注：a為非正態(tài)分布資料，以中位數(shù)(四分位間距)表示，經(jīng)log轉(zhuǎn)化后進行比較

2.2betatrophin水平與各指標相關(guān)性分析以betatrophin水平為因變量，將PCOS組和對照組的基本臨床指標及實驗室結(jié)果比較中差異有統(tǒng)計學意義的指標為自變量，進行Pearson相關(guān)分析，結(jié)果顯示PCOS患者血清betatrophin水平與BMI(r=0.314，P=0.004)、WHR(r=0.339，P=0.002)、FBG(r=0.246,P=0.027)、TG(r=0.336，P=0.002)呈正相關(guān)，與其他臨床指標均無相關(guān)性(P>0.05)。

2.3多元逐步回歸分析以血清betatrophin為因變量，以FBG、TG、BMI、WHR為自變量行多元逐步回歸分析，結(jié)果顯示，TG是影響血清betatrophin水平的主要因素。詳見表2。

表2PCOS組多元逐步回歸分析

項目偏回歸系數(shù)標準偏回歸系數(shù)95%CIt值P值常量-242.908--540.266～54.45-1.6270.108BMI1.7150.078-4.263～7.6930.5710.570WHR266.1980.177-121.628～654.0241.3670.176FBG14.5540.128-11.252～40.3611.1230.265TG16.5000.2340.980～32.0202.1170.037

2　討論

Espes等[9]研究發(fā)現(xiàn)，健康人群中betatrophin濃度與年齡呈正相關(guān)，本文選擇的PCOS組患者與對照組患者年齡差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，排除了年齡因素對試驗結(jié)果的影響。2013年Yi等[4]在IR小鼠模型中首次發(fā)現(xiàn)并命名betatrophin，認為IR可以誘使肝臟分泌betatrophin增加，且有研究[9]表明，高血糖本身不會導(dǎo)致betatrophin水平升高；同時有資料[5-7]顯示，在IR的代謝性疾病中，均可發(fā)現(xiàn)血清betatrophin水平是升高的，因此推測IR患者體內(nèi)betatrophin水平較高。本研究中，PCOS組HOMA-IR及betatrophin水平均高于對照組(P<0.05)，支持IR導(dǎo)致betatrophin升高的觀點；但線性相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，PCOS組血清betatrophin濃度雖與FBG呈正相關(guān)(P<0.05)，但與FINS、HOMA-IR并不相關(guān)，多元逐步相關(guān)分析未發(fā)現(xiàn)與二者相關(guān)，表明PCOS患者IR與血清betatrophin水平不存在獨立相關(guān)性。因此，推測betatrophin可能只是代謝性疾病本身引起的一種生化改變，并不是對IR的代償性反應(yīng)指標。既往研究[10-15]對血清betatrophin水平與IR間關(guān)系存在較大爭議，各研究結(jié)果間的差異可能與種族差異及樣本量等相關(guān)，betatrophin與IR之間的關(guān)系有待進一步證實。

研究[4]表明，betatrophin在小鼠體內(nèi)主要由肝臟和脂肪組織表達，在人體內(nèi)主要由肝臟分泌，動物實驗[16-19]證實，betatrophin過度表達的小鼠中，血TG水平大幅度升高，在betatrophin基因敲除的小鼠體內(nèi)，血TG濃度下降，脂肪酶活性升高，認為betatrophin可能通過抑制脂肪酶活性，調(diào)節(jié)脂代謝。推測其可能參與了PCOS患者體內(nèi)的脂代謝紊亂。本研究結(jié)果顯示，PCOS患者血清betatrophin濃度與TG呈正相關(guān)(r=0.336,P<0.01)，進一步多元線性相關(guān)分析表明TG是betatrophin的獨立影響因素，故認為此結(jié)果符合推測。

Ren等[20]通過動物實驗，推測小鼠betatrophin血清濃度可能與脂肪組織含量相關(guān)。資料[5,11]顯示，目前對血清betatrophin濃度與超重/肥胖之間的關(guān)系研究有較大爭議，本研究結(jié)果顯示，PCOS-OW/OB組血清betatrophin水平高于PCOS-NW組(P<0.05)；血清betatrophin水平與BMI、WHR呈正相關(guān)(P<0.01)，均提示血清betatrophin水平與PCOS患者體內(nèi)脂肪量呈正相關(guān)，故認為betatrophin可能通過增加PCOS患者體質(zhì)量及腹部脂肪沉積參與PCOS的發(fā)生。

本研究結(jié)果顯示TT、FAI與betatrophin均不相關(guān)，Calan等[14]研究表明血清游離睪酮是betatrophin的獨立影響因素，與本研究結(jié)果不符，可能與本次試驗對象處于疾病早期，睪酮水平升高不明顯有關(guān)。

本研究的優(yōu)勢在于病例組均為初診患者，無嚴重的糖脂代謝紊亂，且避免了藥物對betatrophin水平的影響，因此，可能更真實地反映PCOS患者血清betatrophin水平。本研究的缺陷在于只單一檢測了初診患者空腹血清betatrophin水平，不能反應(yīng)其動態(tài)變化，今后可檢測不同疾病階段患者的血清水平，進一步探討其與PCOS的關(guān)系。

綜上，PCOS患者體內(nèi)betatrophin水平高于健康人群，TG是其獨立的影響因素，betartophin可能與PCOS患者體內(nèi)的糖、脂代謝紊亂有關(guān)，但其與激素間的關(guān)系有待進一步研究。

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