陳 柯，陳 華，劉大軍

（1.四川省內(nèi)江職業(yè)技術(shù)學(xué)院,四川內(nèi)江 641000；2.四川省內(nèi)江市東興區(qū)新店鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,四川內(nèi)江 641000；3.四川省內(nèi)江市東興區(qū)高梁鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,四川內(nèi)江 641000）

傳統(tǒng)放牧條件下，山羊營養(yǎng)供給主要源自牧草，然而牧草的季節(jié)性很強(qiáng)，同時營養(yǎng)不均衡使山羊的生產(chǎn)潛力得不到充分發(fā)揮（張?zhí)炷艿龋?016）。與此同時，我國草地資源退化，導(dǎo)致粗飼料資源不足。因此，舍飼作為一種集約化養(yǎng)殖模型，是當(dāng)今眾多養(yǎng)殖戶的選擇，舍飼條件下能有計(jì)劃地為山羊提供營養(yǎng)物質(zhì)，而主要的粗飼料來源是農(nóng)作物秸稈。我國農(nóng)作物秸稈資源豐富，由于秸稈中木質(zhì)素、纖維素和半纖維素之間緊密結(jié)合，導(dǎo)致反芻動物對秸稈的消化率很低，很大程度上限制了秸稈資源的規(guī)?；茫ɡ罾蚰鹊?，2013）。微生物發(fā)酵秸稈是利用多種有益菌的活菌制劑對秸稈進(jìn)行發(fā)酵，秸稈發(fā)酵后適口性和營養(yǎng)價值均得到改善（歐陽克蕙等，2005）。微生物發(fā)酵秸稈的優(yōu)點(diǎn)是增加了秸稈飼料中有益菌的數(shù)目，有益菌有利于維持瘤胃微生態(tài)平衡；同時發(fā)酵飼料中含有B族維生素、有機(jī)酸等促生長因子，微生物的代謝產(chǎn)物還能夠降低飼料中毒素含量；發(fā)酵后秸稈結(jié)構(gòu)疏松易于消化，糖和菌體蛋白含量增加（李旋亮等，2010）。研究表明，微生物發(fā)酵飼料能顯著提高山羊的平均日增重，降低發(fā)病率，提高經(jīng)濟(jì)效益，但其作用機(jī)制還不清楚（彭忠利等，2013）。本研究，利用有效微生物群（Effective Microorganism，EM）發(fā)酵秸稈，以不同比例添加到山羊基礎(chǔ)精飼料中，探究微生物發(fā)酵秸稈對山羊生產(chǎn)性能、免疫機(jī)能和抗氧化性能的影響，為秸稈資源的優(yōu)質(zhì)化利用提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)中的青貯用玉米秸稈是在收獲籽穗后當(dāng)日采摘，用電動鍘草機(jī)切割為2～3 cm長。微生物青貯組發(fā)酵用的EM菌為河南君安生物科技有限公司提供，主要由雙歧桿菌、乳酸菌、芽孢桿菌、光合細(xì)菌和酵母菌等80多種菌種高效復(fù)合而成。每克含有益總菌數(shù)≥500億CFU。將200 g EM加入20 L 40℃左右的水中，再加入1.5 kg蔗糖，攪拌均勻，放置1 h進(jìn)行菌種活化，配置成EM發(fā)酵液。將事先切割好的玉米秸稈裝入青貯池，鋪一層料潑灑一層EM發(fā)酵液，秸稈濕度控制在用手抓起秸稈時指縫間有水，但沒有水珠滴落為宜，攪拌后壓實(shí)，密封發(fā)酵10 d，當(dāng)聞到有酒香味時即可啟用。普通青貯組玉米秸稈在青貯時不添加任何青貯添加劑，于青貯池壓實(shí)密封，青貯40 d。試驗(yàn)用風(fēng)干玉米秸稈同樣用鍘草機(jī)切割至2～3 cm長。

1.2試驗(yàn)動物及設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選用72只體重為（17.45±0.46）kg的健康波雜山羊，按照體重相近原則隨機(jī)分為3個處理，每個處理6個重復(fù)，每個重復(fù)4只山羊。3個試驗(yàn)組的山羊粗飼料分別為風(fēng)干秸稈（對照組）、普通青貯秸稈（試驗(yàn)I組）、微生物發(fā)酵秸稈（試驗(yàn)II組），基礎(chǔ)精飼料組成相同（表1），日糧精粗比1∶1。試驗(yàn)預(yù)飼期為15 d，正式試驗(yàn)為60 d。

表1　基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平 %

1.3飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)開始前，對圈舍進(jìn)行徹底清掃和消毒，并對山羊進(jìn)行常規(guī)的驅(qū)蟲和免疫。試驗(yàn)組和對照組山羊在相同環(huán)境下進(jìn)行舍飼圈養(yǎng)，每日早晚各飼喂1次，飼喂量以料槽每天無過多余料，自由飲水。每日觀察山羊采食和精神狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)疾病及時處理。

1.4指標(biāo)測定

1.4.1生產(chǎn)性能 試驗(yàn)開始和結(jié)束時，早晨空腹稱量各組山羊體重，每天記錄山羊采食量。計(jì)算試驗(yàn)期間平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F：G）。

1.4.2血清指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時，每個重復(fù)選擇1只山羊在空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈采血，用真空采血管采集5 mL非抗凝血，室溫下傾斜放置30 min，3000r/min離心10 min制備血清，于-20℃保存?zhèn)溆?。測定血清中免疫球蛋白G（IgG）含量、免疫球蛋白A（IgA）含量和免疫球蛋白M（IgM）含量（全自動生化分析儀）。測定血清總抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶活性（Superoxide Dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶活性（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）、過氧化氫酶活性（Catalase，CAT）和丙二醛（Malonaldehyde，MDA）含量，檢測方法為比色法，按照試劑盒（南京建成生物工程研究所，中國）的說明進(jìn)行測定。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0進(jìn)行單因素方差分析和Duncan’s多重比較。結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P＜0.05 為差異顯著。

2　結(jié)果與分析

2.1微生物發(fā)酵秸稈對山羊生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的平均日增重（Averge Daily Gain，ADG）和平均日采食量（Average Daily Feed Intake，ADFI）均顯著大于對照組（P＜0.05）。與對照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組的ADG增加了11.46%，ADFI增加了19.83%，試驗(yàn)Ⅱ組的ADG增加了28.13%，ADFI增加了33.62%。此外，試驗(yàn)Ⅱ組的ADG顯著大于試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）。各處理組山羊的料重比（Feed：Gain，F(xiàn)：G）差異不顯著（P＞ 0.05）。

表2　微生物發(fā)酵秸稈對山羊生產(chǎn)性能的影響

2.2微生物發(fā)酵秸稈對山羊血清免疫指標(biāo)的影響 由表3可知，試驗(yàn)Ⅱ組血清中IgG和IgM的含量顯著大于對照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）。同時，試驗(yàn)Ⅰ組和對照組血清中IgG和IgM的含量差異不顯著（P＞0.05），各處理組血清IgA含量差異不顯著（P＞0.05）。

表3　微生物發(fā)酵秸稈對山羊血清免疫指標(biāo)的影響

2.3微生物發(fā)酵秸稈對山羊血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表4可知，與對照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組血清中SOD酶活顯著增加（P＜0.05），MDA含量顯著降低（P＜0.05）；并且試驗(yàn)Ⅱ組血清中SOD酶活顯著大于試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05），MDA含量顯著低于試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）。此外，試驗(yàn)Ⅱ組血清中T-AOC、GSH-Px和CAT酶活顯著大于對照組（P＜0.05）。

表4　微生物發(fā)酵秸稈對山羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

3　討論

3.1微生物發(fā)酵秸稈對山羊生產(chǎn)性能的影響

生產(chǎn)性能結(jié)果表明，微生物發(fā)酵秸稈比普通青貯秸稈在提高山羊生產(chǎn)性能方面效果更顯著。這可能是因?yàn)槠胀ㄇ噘A秸稈是利用秸稈自身帶有的微生物進(jìn)行自然發(fā)酵，其微生物種類不受控制，青貯品質(zhì)差異很大。而微生物發(fā)酵秸稈是外源添加高效和濃縮的有益菌群定向發(fā)酵秸稈，發(fā)酵過程中有益微生物大量繁殖，有害微生物得到抑制，因此，微生物發(fā)酵秸稈的品質(zhì)更加穩(wěn)定。孟令凱等（2015）研究表明，微生物發(fā)酵的牧草較普通青貯牧草中粗蛋白含量增加，中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量降低。因微生物發(fā)酵組中含有的酵母菌大量繁殖能提供優(yōu)質(zhì)的單細(xì)胞菌體蛋白，同時發(fā)酵初期的黑曲霉、酵母菌等增殖產(chǎn)生纖維素酶、糖化酶、半纖維素酶和果膠酶等，這些酶能降解纖維素和木質(zhì)素，該試驗(yàn)生產(chǎn)性能結(jié)果顯示，飼喂微貯牧草比飼喂普通牧草的山羊ADG增加16.33%。因此，推測本試驗(yàn)中微生物發(fā)酵秸稈的營養(yǎng)價值優(yōu)于普通青貯秸稈，進(jìn)而微生物發(fā)酵秸稈組的山羊增重效果更顯著。彭忠利等（2013）研究顯示，在山羊精料中添加50%的微生物發(fā)酵飼料能夠提高山羊ADG和養(yǎng)分消化率。同樣，在生長育肥豬和斷奶仔豬飼料中添加發(fā)酵飼料同樣可以顯著提高增重速度（Canibe等，2003；何謙等，2008）。高飛（2011）用EM菌發(fā)酵干玉米秸稈飼喂延邊黃牛，其增重顯著高于普通青貯玉米秸稈組和未發(fā)酵干玉米秸稈組。本試驗(yàn)結(jié)果與上述研究一致，飼喂微生物發(fā)酵秸稈組山羊的增重速度大于飼喂普通青貯秸稈和風(fēng)干秸稈組的山羊。

3.2微生物發(fā)酵秸稈對山羊血清免疫指標(biāo)的影響 本試驗(yàn)結(jié)果表明，微生物發(fā)酵秸稈對山羊的免疫功能具有改善作用，而普通青貯秸稈對免疫功能無顯著影響。其原因可能是秸稈經(jīng)過微生物發(fā)酵后，所含有益微生物增多，山羊采食后能調(diào)節(jié)消化系統(tǒng)的微生態(tài)平衡，改善腸道健康，抑制有害菌生長，促進(jìn)有益菌增殖，進(jìn)而提高山羊免疫力。益生菌與病原菌競爭結(jié)合腸上皮細(xì)胞，刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生免疫球蛋白IgM和IgA（Malin等，1996）。此外，微生物發(fā)酵秸稈中的乳酸桿菌可以提高巨噬細(xì)胞活性，增加免疫球蛋白含量；而酵母菌產(chǎn)生的甘露寡糖具有吸附毒素和病原微生物的作用；芽孢桿菌可以激活腸道淋巴組織，其分泌的多肽也能拮抗病原微生物，從而提高機(jī)體抗病力（田真等，2008）。宋琳琳（2009）研究顯示，微生物飼料作為活菌制劑飼喂豬能降豬腸道大腸桿菌，增加乳酸菌，從而提高機(jī)體免疫能力。微生物發(fā)酵飼料提高畜禽免疫力的研究報(bào)道很多，余淼等（2013）用微生物發(fā)酵秸稈飼喂肉牛，血清中免疫球蛋白IgA、IgM和IgG含量顯著增加。楊玉榮（2005）發(fā)現(xiàn)雛雞服用益生素后其免疫器官的黏膜組織中免疫球蛋白生成細(xì)胞數(shù)量明顯增加。本試驗(yàn)結(jié)果與上述研究一致。

3.3微生物發(fā)酵秸稈對山羊血清抗氧化指標(biāo)的影響 T-AOC是反映機(jī)體總抗氧化能力的綜合指標(biāo)，可以反映機(jī)體的酶系和非酶系的抗氧化狀態(tài)。SOD和GSH-Px能抑制氧自由基產(chǎn)生，平衡人體代謝。CAT能清除體內(nèi)代謝廢物——過氧化氫，防止氧化損傷。而MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，其含量反映細(xì)胞受氧自由基損傷程度。大量研究表明，微生物發(fā)酵飼料具有抗氧化活性，用微生物發(fā)酵秸稈飼喂肉牛能提高血清中SOD酶活和降低MDA含量（余淼等，2013），微生物發(fā)酵飼料能夠提高仔豬血液中SOD酶活（王娟娟等，2011），胡順珍等（2012）報(bào)道，肉雞日糧添加富含乳酸菌、芽孢桿菌和酵母硒等物質(zhì)的復(fù)合生態(tài)制劑提高了血漿T-AOC。本試驗(yàn)結(jié)果與以上報(bào)道一致，山羊飼喂普通青貯秸稈和微生物發(fā)酵秸稈均能提高抗氧化性能，且微生物發(fā)酵秸稈效果優(yōu)于普通青貯秸稈，這可能是因?yàn)樘砑覧M菌發(fā)酵的秸稈在乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌等多種有益微生物發(fā)酵過程中會產(chǎn)生氨基酸、乳酸和抗氧化性維生素（維生素E、維生素C）等物質(zhì)（Doblado等，2005），而普通青貯秸稈在發(fā)酵過程雖然也會產(chǎn)生乳酸和維生素，但其數(shù)量有限，這一點(diǎn)還有待通過后續(xù)試驗(yàn)驗(yàn)證。

4　結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，普通青貯秸稈和微生物發(fā)酵秸稈均能增加山羊ADG和ADFI，提高血清中SOD酶活，降低血清MDA含量。同時，微生物發(fā)酵秸稈還能增加山羊血清中IgG和IgM的含量，增加血清T-AOC、GSH-Px和CAT酶活。因此，微生物發(fā)酵秸稈能提高山羊的生產(chǎn)性能、免疫功能和抗氧化性能。

[1]高飛.微生態(tài)制劑飼料飼喂肉羊效果研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，40（10）：131～ 133.

[2]何謙，吳同山，李巖，等.發(fā)酵飼料對規(guī)?；i場斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].畜牧與獸醫(yī)，2008，40（6）：62～64.

[3]胡順珍，張建梅，謝全喜，等.復(fù)合微生態(tài)制劑對肉雞生產(chǎn)性能、腸道菌群、抗氧化指標(biāo)和免疫功能的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2012，24（2）：334～341.

[4]李莉娜，吳仙，朱麗莉，等.山羊稻草秸稈微生物飼料發(fā)酵效果的研究[J].貴州畜牧獸醫(yī)，2013，37（6）：7～10.

[5]李旋亮，吳長德，李建濤，等.微生物發(fā)酵飼料的研究與應(yīng)用[J].飼料博覽，2010，6（2）：27～ 29.

[6]孟令凱，郭春華，彭忠利，等.微貯牧草對山羊生產(chǎn)性能、飼糧養(yǎng)分消化率和消化道微生物數(shù)量的影響[J].飼料工業(yè)，2015，36（3）：48～52.

[7]歐陽克蕙，王文君，戴文吉，等.捆裹微貯對稻草營養(yǎng)成分及貯藏品質(zhì)的影響[J].飼料工業(yè)，2005，26（9）：24～26.

[8]彭忠利，郭春華，柏雪，等.微生物發(fā)酵飼料對樂至黑山羊生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化率與血液生化指標(biāo)的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2013，15（5）：106～ 113.

[9]宋琳琳.新型微生物飼料添加劑的研究及在育肥豬上的應(yīng)用[D].西北大學(xué)，2009.

[10]田真，高繼偉，王宏勇.微生態(tài)制劑的作用機(jī)理及在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中國畜牧業(yè)，2008，17：6～8.

[11]王娟娟，王順喜，陸文清，等.無抗生素微生物發(fā)酵飼料對仔豬免疫及抗氧化功能的影響[J].中國飼料，2011，16：25～27.

[12]楊玉榮，鄭世民，劉晶，等.雛雞服用益生素后免疫器官指數(shù)及局部體液免疫球蛋白相對含量的動態(tài)變化[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2005，36（4）：352～ 356.

[13]余淼，嚴(yán)錦繡，彭忠利，等.微生物發(fā)酵飼料對肉牛免疫機(jī)能的影響[J].中國畜牧獸醫(yī)，2013，40（4）：114～117.

[14]張?zhí)炷?，王繼卿，謝文章，等.飼喂全價顆粒飼料對子午嶺黑山羊生產(chǎn)性能的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2016，18（4）：52～57.

[15]Doblado R，Zielinski H，Piskula M，et al.Effect of processing on the antioxidant vitamins and antioxidant capacity of Vigna sinensis Var. Carilla[J]. Agric Food Chem，2005，53（4）：1215～1222.

[16]Kim Y G，Lohakare J D，Yun J H，et al.Effect of Feeding Levels of Microbial Fermented Soy Protein on the Growth Performance，Nutrient Digestibility and Intestinal Morphology in Weaned Piglets[J]. Asian Australasian Journal of Animal Sciences，2007，20（3）：399～404.

[17]Malin M，Suomalainen H，Saxelin M，et al.Promotion of IgA Immune Response in Patients with Crohn’s Disease by Oral Bacteriotherapy with Lactobacillus GG[J]. Annals of Nutrition &Metabolism，1996，40（3）：137.