微性狀鑒別法快速鑒別車前子真?zhèn)?/h1>
2018-04-10 09:17:18胡文璐余俊陳星
安徽醫(yī)藥 2018年4期
胡文璐，余俊，陳星
（宣城市食品藥品檢驗中心，安徽宣城 242000）
車前子為中醫(yī)常用藥，歷版《中國藥典》均有收載，藥典規(guī)定其為車前科植物車前Plantago asiatica L.或平車前Plantago depressssa Willd.的干燥成熟種子，具有清熱利尿通淋、滲濕止瀉、明目、祛痰之功效［1］。車前子外形較小，沒有一定的中藥專業(yè)知識，僅對照標(biāo)準(zhǔn)描述，難以分辨其真?zhèn)?。本文采用中藥微性狀鑒定技術(shù)［2］，分析比較了21批次車前子正品和7種車前子偽品的微性狀，建立了正品車前子微性狀模式圖及各種車前子偽品微性狀模式圖，為快速、直觀、準(zhǔn)確地鑒別車前子真?zhèn)翁峁┦聦嵰罁?jù)。
1 材料與方法
1.1 樣本來源 實驗所用藥材樣本均由宣城市食品藥品檢驗中心收集、鑒定。詳見表1。
1.2 儀器 LEICA DM500型顯微鏡，E103型生物顯微鏡（麥克奧迪），MC-D500（U）型電子攝像目鏡（500萬像素），LED臺燈（不可調(diào)），數(shù)碼相機FINEPIX HS11（日本富士）。
1.3 方法 用500萬像素電子目鏡連接普通生物顯微鏡和電腦，把實驗材料置于視野中，調(diào)節(jié)光源和各個色調(diào)選項使圖片顏色與材料一致之后調(diào)節(jié)微調(diào)旋鈕拍攝不同景深條件下的圖片，再使用景深合成技術(shù)［3］得到高清晰度的微性狀圖片。
1.4 實驗參數(shù)
1.4.1 數(shù)碼相機參數(shù) 數(shù)碼相機FINEPIX HS11（日本富士），鏡頭：FUJINON LENS 30X ZOOM f＝4.2～126 1：2.8～5.6Ф58 mm，拍攝模式：微距。
1.4.2 顯微鏡參數(shù) 目鏡：10倍；物鏡：4倍、10倍；光源：LED臺燈（白色光）；焦距間隔：10小格；合成圖片張數(shù)：10～20。
2 結(jié)果
2.1 車前子正品微性狀特征 本品為車前科植物車前Plantago asiatica L.或平車前Plantago depressssa Willd.的干燥成熟種子。呈不規(guī)則長圓形或三角狀長圓形，略扁，長約2 mm，寬約1 mm。表面黃棕色至黑褐色，略有光澤。臍點位于側(cè)面，類圓形，有大量白色干燥黏液。種子表面紋理清晰，臍點面觀略呈放射狀，背面呈波浪狀紋理，略與長軸平行。見圖1～3。
2.2 車前子偽品的微性狀特征
2.2.1 小車前子 本品為車前科植物大車前P.major L.的干燥成熟種子［4］。呈不規(guī)則長圓形或三角狀長圓形，略扁，長約1 mm，寬約0.5 mm。表面微性狀特征與車前子微性狀特征基本相同，大小約為車前子一半。見圖4，5。
2.2.2 葶藶子 本品為十字花科植物播娘蒿Descurainia sophia（L.）Webb.ex Prantl.或獨行菜 Lepidium apetalum Willd.的干燥成熟種子。呈扁卵形，或長圓形略扁，長約0.8～1.2 mm，寬約0.5 mm。表面棕色或紅棕色，被有干燥黏液，有光澤。臍點位于凹入端或平截處。種子表面網(wǎng)紋明顯，長方形網(wǎng)紋長軸與種子短軸平行。見圖6，7。
表1 樣本信息及鑒定結(jié)果
圖1 CQZ-1車前子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖2 CQZ-1車前子微性狀（一）
圖3 CQZ-2車前子微性狀（二）
圖4 CQZ-22小車前子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖5 CQZ-22小車前子微性狀
圖6 CQZ-23葶藶子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
2.2.3 黨參子 本品為桔梗科植物黨參Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.、素花黨參 Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta（Nannf.）L.T.Shen或川黨參Codonopsis tangshen Oliv.的干燥成熟種子。呈卵狀橢圓形，長約1.5～1.8 mm，寬0.6～1.2 mm。表面棕褐色，無光澤。臍點位于種子基部，呈圓形凹窩狀。表面具顆粒狀凸起，密被縱向淺紋。見圖8，9。
圖7 CQZ-23葶藶子微性狀
圖8 CQZ-24黨參子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖9 CQZ-24黨參子微性狀
2.2.4 荊芥子 本品為唇形科植物荊芥Schizonepeta tenuifolia Briq.的干燥成熟種子。呈橢圓形，或長梭形，長約1.5mm，寬約0.6mm。表面黃棕色至棕黑色，略有光澤。臍點位于種子基部。表面具雕刻狀、長條形紋理，與種子的長軸走向一致。見圖10，11。
圖10 CQZ-25荊芥子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖11 CQZ-25荊芥子微性狀
2.2.5 茺蔚子 本品為唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的干燥成熟果實。呈三棱形，一端稍寬，平截狀，另一端漸窄而鈍尖。三條棱線非常明顯。長2～3 mm，寬約1.5 mm。表面棕色至灰棕色。無光澤。側(cè)面密被深色斑點。見圖 12，13。
2.2.6 青葙子 本品為莧科植物青葙Celosia argentea L.的干燥成熟種子。呈扁圓形，少數(shù)呈圓腎形，中間微隆起。直徑1～1.5 mm。表面黑色或紅黑色，光澤度較強。臍點位于側(cè)邊凹窩處。種子表面顆粒狀突起，呈同心環(huán)狀排列。見圖14，15。
2.2.7 擬柴胡屬植物種子（車前子的一種偽品）本品可能為傘形科柴胡屬植物的種子。樣品呈長卵形。長3～5 mm，寬1～2 mm。表面棕黑色，無光澤。種子一端有柄，棱狹翅狀，十分清晰。水浸泡后，水液呈淡紅色，說明此物是染色后冒充車前子。見圖 16，17。
圖12 CQZ-26茺蔚子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖13 充蔚子微性狀
圖14 CQZ-27青葙子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖15 CQZ-27青葙子微性狀
圖16 CQZ-28擬柴胡屬植物種子（數(shù)碼相機拍攝）
圖17 CQZ-28擬柴胡屬植物種子微性狀
表2 車前子真?zhèn)纹肺⑿誀钪饕b別點
2.3 車前子真?zhèn)纹肺⑿誀钪饕b別點 詳見表2。
3 討論
文獻［5-10］報道的車前子真?zhèn)舞b別方法均需要中藥鑒定相關(guān)專業(yè)知識或者專業(yè)的儀器設(shè)備，而微性狀鑒別方法規(guī)避了該限制條件。采用本文建立的微性狀鑒定方法對7種車前子偽品和轄區(qū)內(nèi)市場上收集的10批車前子樣品進行鑒定，結(jié)果可以快速、直觀、準(zhǔn)確地判定車前子真?zhèn)?，其方法簡單，設(shè)備廉價。而且與藥品快速檢測的理念相吻合，非常適用于中藥材真?zhèn)蔚目焖勹b別。
車前子表面顏色呈黃棕色至黑褐色，原因是種子的成熟度不一樣，所以顏色不一致，出現(xiàn)了CQZ-1與CQZ-2兩種微性狀照片。除顏色外樣品表面的種臍、紋理等其他微性狀特征基本相同。從種子的大小可以與小車前子、茺蔚子、擬柴胡屬種子區(qū)分開，從種子的形狀和表面紋理可以與葶藶子、黨參子、荊芥子、茺蔚子、青葙子和擬柴胡屬種子等偽品區(qū)分開。
該方法還處于研究階段，還沒有成熟的檢驗設(shè)備可供使用，所以拍攝的照片不盡完美。如青葙子的反光、荊芥子的顏色與實際有差別等問題，還有待進一步完善，方能拍攝出更清晰、更準(zhǔn)確的模式圖片。從最終實驗結(jié)果來看，這些問題均不影響我們對檢驗結(jié)果的判定，可以在實際工作中推廣應(yīng)用。
［1］ 國家藥典委員會.中國藥典（一部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：63.
［2］ 周建理，楊青山.中藥微性狀鑒定法［J］.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，30（1）：66-68.
［3］ 周建理，楊青山，曹海燕，等.景深合成技術(shù)在植物光學(xué)微形態(tài)研究上的應(yīng)用［J］.生物學(xué)通報，2011，46（9）：57-58，后插 1.
［4］ 國家中醫(yī)藥管理局，《中華本草》編委會.中華本草精選本（下冊）［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1998：1781.
［5］ 高賓，于文敏，祝芙苡.車前子的真?zhèn)舞b別［J］.首都醫(yī)藥，2010，17（5）：49.
［6］ 馬逾英，蔣桂華，盧曉琳，等.中藥材真?zhèn)舞b別——車前子［J］.中國現(xiàn)代中藥，2010，12（8）：封 3.
［7］ 周喜丹，唐力英，周國洪，等.HPLC指紋圖譜鑒別葶藶子與車前子［J］.中國中藥雜志，2015，40（2）：275-279.
［8］ 鄔蘭，劉義梅，熊永興，等.基于ITS2序列的車前子原植物及其混偽品的分子鑒定［J］.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2013，15（9）：1896-1900.
［9］ 康帥，周超，魏愛華，等.車前子與其偽品-柴胡果實的生藥學(xué)鑒別［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2013，19（18）：161-163.
［10］龔卉卉，汪娟，孫莉，等.車前子及其易混偽品的掃描電鏡鑒別［J］.中國野生植物資源，2012，31（6）：49-52.
胡文璐，余俊，陳星
（宣城市食品藥品檢驗中心，安徽宣城 242000）
車前子為中醫(yī)常用藥，歷版《中國藥典》均有收載，藥典規(guī)定其為車前科植物車前Plantago asiatica L.或平車前Plantago depressssa Willd.的干燥成熟種子，具有清熱利尿通淋、滲濕止瀉、明目、祛痰之功效［1］。車前子外形較小，沒有一定的中藥專業(yè)知識，僅對照標(biāo)準(zhǔn)描述，難以分辨其真?zhèn)?。本文采用中藥微性狀鑒定技術(shù)［2］，分析比較了21批次車前子正品和7種車前子偽品的微性狀，建立了正品車前子微性狀模式圖及各種車前子偽品微性狀模式圖，為快速、直觀、準(zhǔn)確地鑒別車前子真?zhèn)翁峁┦聦嵰罁?jù)。
1 材料與方法
1.1 樣本來源 實驗所用藥材樣本均由宣城市食品藥品檢驗中心收集、鑒定。詳見表1。
1.2 儀器 LEICA DM500型顯微鏡，E103型生物顯微鏡（麥克奧迪），MC-D500（U）型電子攝像目鏡（500萬像素），LED臺燈（不可調(diào)），數(shù)碼相機FINEPIX HS11（日本富士）。
1.3 方法 用500萬像素電子目鏡連接普通生物顯微鏡和電腦，把實驗材料置于視野中，調(diào)節(jié)光源和各個色調(diào)選項使圖片顏色與材料一致之后調(diào)節(jié)微調(diào)旋鈕拍攝不同景深條件下的圖片，再使用景深合成技術(shù)［3］得到高清晰度的微性狀圖片。
1.4 實驗參數(shù)
1.4.1 數(shù)碼相機參數(shù) 數(shù)碼相機FINEPIX HS11（日本富士），鏡頭：FUJINON LENS 30X ZOOM f＝4.2～126 1：2.8～5.6Ф58 mm，拍攝模式：微距。
1.4.2 顯微鏡參數(shù) 目鏡：10倍；物鏡：4倍、10倍；光源：LED臺燈（白色光）；焦距間隔：10小格；合成圖片張數(shù)：10～20。
2 結(jié)果
2.1 車前子正品微性狀特征 本品為車前科植物車前Plantago asiatica L.或平車前Plantago depressssa Willd.的干燥成熟種子。呈不規(guī)則長圓形或三角狀長圓形，略扁，長約2 mm，寬約1 mm。表面黃棕色至黑褐色，略有光澤。臍點位于側(cè)面，類圓形，有大量白色干燥黏液。種子表面紋理清晰，臍點面觀略呈放射狀，背面呈波浪狀紋理，略與長軸平行。見圖1～3。
2.2 車前子偽品的微性狀特征
2.2.1 小車前子 本品為車前科植物大車前P.major L.的干燥成熟種子［4］。呈不規(guī)則長圓形或三角狀長圓形，略扁，長約1 mm，寬約0.5 mm。表面微性狀特征與車前子微性狀特征基本相同，大小約為車前子一半。見圖4，5。
2.2.2 葶藶子 本品為十字花科植物播娘蒿Descurainia sophia（L.）Webb.ex Prantl.或獨行菜 Lepidium apetalum Willd.的干燥成熟種子。呈扁卵形，或長圓形略扁，長約0.8～1.2 mm，寬約0.5 mm。表面棕色或紅棕色，被有干燥黏液，有光澤。臍點位于凹入端或平截處。種子表面網(wǎng)紋明顯，長方形網(wǎng)紋長軸與種子短軸平行。見圖6，7。
表1 樣本信息及鑒定結(jié)果
圖1 CQZ-1車前子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖2 CQZ-1車前子微性狀（一）
圖3 CQZ-2車前子微性狀（二）
圖4 CQZ-22小車前子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖5 CQZ-22小車前子微性狀
圖6 CQZ-23葶藶子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
2.2.3 黨參子 本品為桔梗科植物黨參Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.、素花黨參 Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta（Nannf.）L.T.Shen或川黨參Codonopsis tangshen Oliv.的干燥成熟種子。呈卵狀橢圓形，長約1.5～1.8 mm，寬0.6～1.2 mm。表面棕褐色，無光澤。臍點位于種子基部，呈圓形凹窩狀。表面具顆粒狀凸起，密被縱向淺紋。見圖8，9。
圖7 CQZ-23葶藶子微性狀
圖8 CQZ-24黨參子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖9 CQZ-24黨參子微性狀
2.2.4 荊芥子 本品為唇形科植物荊芥Schizonepeta tenuifolia Briq.的干燥成熟種子。呈橢圓形，或長梭形，長約1.5mm，寬約0.6mm。表面黃棕色至棕黑色，略有光澤。臍點位于種子基部。表面具雕刻狀、長條形紋理，與種子的長軸走向一致。見圖10，11。
圖10 CQZ-25荊芥子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖11 CQZ-25荊芥子微性狀
2.2.5 茺蔚子 本品為唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的干燥成熟果實。呈三棱形，一端稍寬，平截狀，另一端漸窄而鈍尖。三條棱線非常明顯。長2～3 mm，寬約1.5 mm。表面棕色至灰棕色。無光澤。側(cè)面密被深色斑點。見圖 12，13。
2.2.6 青葙子 本品為莧科植物青葙Celosia argentea L.的干燥成熟種子。呈扁圓形，少數(shù)呈圓腎形，中間微隆起。直徑1～1.5 mm。表面黑色或紅黑色，光澤度較強。臍點位于側(cè)邊凹窩處。種子表面顆粒狀突起，呈同心環(huán)狀排列。見圖14，15。
2.2.7 擬柴胡屬植物種子（車前子的一種偽品）本品可能為傘形科柴胡屬植物的種子。樣品呈長卵形。長3～5 mm，寬1～2 mm。表面棕黑色，無光澤。種子一端有柄，棱狹翅狀，十分清晰。水浸泡后，水液呈淡紅色，說明此物是染色后冒充車前子。見圖 16，17。
圖12 CQZ-26茺蔚子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖13 充蔚子微性狀
圖14 CQZ-27青葙子藥材（數(shù)碼相機拍攝）
圖15 CQZ-27青葙子微性狀
圖16 CQZ-28擬柴胡屬植物種子（數(shù)碼相機拍攝）
圖17 CQZ-28擬柴胡屬植物種子微性狀
表2 車前子真?zhèn)纹肺⑿誀钪饕b別點
2.3 車前子真?zhèn)纹肺⑿誀钪饕b別點 詳見表2。
3 討論
文獻［5-10］報道的車前子真?zhèn)舞b別方法均需要中藥鑒定相關(guān)專業(yè)知識或者專業(yè)的儀器設(shè)備，而微性狀鑒別方法規(guī)避了該限制條件。采用本文建立的微性狀鑒定方法對7種車前子偽品和轄區(qū)內(nèi)市場上收集的10批車前子樣品進行鑒定，結(jié)果可以快速、直觀、準(zhǔn)確地判定車前子真?zhèn)?，其方法簡單，設(shè)備廉價。而且與藥品快速檢測的理念相吻合，非常適用于中藥材真?zhèn)蔚目焖勹b別。
車前子表面顏色呈黃棕色至黑褐色，原因是種子的成熟度不一樣，所以顏色不一致，出現(xiàn)了CQZ-1與CQZ-2兩種微性狀照片。除顏色外樣品表面的種臍、紋理等其他微性狀特征基本相同。從種子的大小可以與小車前子、茺蔚子、擬柴胡屬種子區(qū)分開，從種子的形狀和表面紋理可以與葶藶子、黨參子、荊芥子、茺蔚子、青葙子和擬柴胡屬種子等偽品區(qū)分開。
該方法還處于研究階段，還沒有成熟的檢驗設(shè)備可供使用，所以拍攝的照片不盡完美。如青葙子的反光、荊芥子的顏色與實際有差別等問題，還有待進一步完善，方能拍攝出更清晰、更準(zhǔn)確的模式圖片。從最終實驗結(jié)果來看，這些問題均不影響我們對檢驗結(jié)果的判定，可以在實際工作中推廣應(yīng)用。
［1］ 國家藥典委員會.中國藥典（一部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：63.
［2］ 周建理，楊青山.中藥微性狀鑒定法［J］.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，30（1）：66-68.
［3］ 周建理，楊青山，曹海燕，等.景深合成技術(shù)在植物光學(xué)微形態(tài)研究上的應(yīng)用［J］.生物學(xué)通報，2011，46（9）：57-58，后插 1.
［4］ 國家中醫(yī)藥管理局，《中華本草》編委會.中華本草精選本（下冊）［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1998：1781.
［5］ 高賓，于文敏，祝芙苡.車前子的真?zhèn)舞b別［J］.首都醫(yī)藥，2010，17（5）：49.
［6］ 馬逾英，蔣桂華，盧曉琳，等.中藥材真?zhèn)舞b別——車前子［J］.中國現(xiàn)代中藥，2010，12（8）：封 3.
［7］ 周喜丹，唐力英，周國洪，等.HPLC指紋圖譜鑒別葶藶子與車前子［J］.中國中藥雜志，2015，40（2）：275-279.
［8］ 鄔蘭，劉義梅，熊永興，等.基于ITS2序列的車前子原植物及其混偽品的分子鑒定［J］.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2013，15（9）：1896-1900.
［9］ 康帥，周超，魏愛華，等.車前子與其偽品-柴胡果實的生藥學(xué)鑒別［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2013，19（18）：161-163.
［10］龔卉卉，汪娟，孫莉，等.車前子及其易混偽品的掃描電鏡鑒別［J］.中國野生植物資源，2012，31（6）：49-52.
