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【摘要】目的 改進(jìn)鹽酸小檗堿片含量測定的方法。方法 用流動相溶解和改變過濾方式的方法處理樣品。結(jié)果 經(jīng)過三種方法的對比，改進(jìn)方法獲得滿意結(jié)果。結(jié)論 改進(jìn)的兩種方法可靠，可用于鹽酸小檗堿片樣品溶液的制備。

【關(guān)鍵詞】鹽酸小檗堿片；高效液相色譜法；含量測定

【中圖分類號】R927.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.36..02

鹽酸小檗堿片是一種抗菌藥，臨床上主要用于治療腸道感染、如腸胃炎等。鹽酸小檗堿片的含量測定的方法標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國藥典》2015年版二部[1]中，其含量測定的方法采用HPLC方法。在檢驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)含量測定項(xiàng)下由于對樣品的處理不盡完善，導(dǎo)致測定結(jié)果偏低。同時也有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[2]。因此對樣品處理方法進(jìn)行了相應(yīng)的改進(jìn)。分別采用流動相溶解并超聲的方法和增加微孔濾膜

（0.45 μm）過濾棄去初濾液的方法。

1 儀器與試藥

Agilent 1260高效液相色譜儀；電子天平（SARTOROUS CP225D）；鹽酸小檗堿對照品（來源：中國藥品生物制品檢驗(yàn)所，批號：110713-201613，標(biāo)示含量：86.8%）；鹽酸小檗堿片樣品（規(guī)格：0.1 g；市售品；批號：160613）；色譜純乙腈；水為純化水；其他試劑均為分析純試劑。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：磷酸鹽緩沖液[0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.05 mol/L庚烷磺酸鈉溶液（1：1），含0.2%三乙胺，并用磷酸調(diào)節(jié)

pH值至3.0]-乙腈（40：60）；流速：1.0 ml/min；檢測波長：263 nm；進(jìn)樣量：20 μL；柱溫：35℃；理論塔板數(shù)不低于3000；小檗堿峰與相鄰雜質(zhì)峰分離度大于1.5。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱量鹽酸小檗堿對照品20 mg，置于50 mL容量瓶中，加沸水使溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取

5 mL，置于50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

2.3.1 藥典法

取供試品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于40 mg鹽酸小檗堿），置于100 ml量瓶中，加沸水適量使溶解，放冷后用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液（約8 ml），精密量取續(xù)濾液5 ml，置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3.2 改進(jìn)方法

取供試品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于40 mg鹽酸小檗堿），置于100 ml量瓶中，加流動相使溶解，超聲20分鐘，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液約8 ml，精密量取續(xù)濾液5 ml，置50 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 測定方法

精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

2.5 線性范圍

精密稱量鹽酸小檗堿對照品20 mg，置于100 ml容量瓶中，加沸水溶解，并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1 mL、2 mL、4 mL、8 mL、16 mL、32 mL置于50 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。按照2.1色譜條件，精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度C（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。線性方程為

A=192.9C-154.25（R2=0.9996；n=6），表明濃度在4.07～130.27 μg/mL范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度實(shí)驗(yàn)

用線性關(guān)系考察中鹽酸小檗堿濃度為32.57 μg/mL的對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測得的RSD為0.63%。

2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

精密稱取同一批號的供試品5份，按2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液，含量測定結(jié)果的RSD為0.55%，表明重復(fù)性好。

2.8 回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱取含量已知的鹽酸小檗堿片細(xì)粉（約相當(dāng)于鹽酸小檗堿30 mg），分別置100 mL容量瓶中，精密加入對照品，按照2.3.1方法配制成溶液。進(jìn)樣，記錄色譜圖并計(jì)算加樣回收率，平均回收率為97.75%，RSD為1.3%。測得結(jié)果見表1。

通過對同一批鹽酸小檗堿片采用三種方法同時3次的測定結(jié)果見表2。

結(jié)果表明，改進(jìn)方法1略優(yōu)于藥典法，而改進(jìn)方法2顯著優(yōu)于前兩種方法，更接近于檢驗(yàn)的真實(shí)值。

3 討 論

三種方法相比較，不同的溶解方法和過濾方式對鹽酸小檗堿片的測定結(jié)果影響不盡相同，改進(jìn)后的方法測得的含量準(zhǔn)確性更高。分析在實(shí)驗(yàn)過程中，由于溶解方法和過濾方式的不合理、不完善將導(dǎo)致部分藥品的含量測定的結(jié)果達(dá)不到國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。

因此，建議采用流動相超聲溶解并用微孔濾膜

（0.45 μm）過濾棄去初濾液的方法進(jìn)行含量測定，可達(dá)到良好效果。

參考文獻(xiàn)

[1] 國家藥典委員會.《中國藥典》2015年版二部[M]，北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.6：875.

[2] 蔣 寧.鹽酸小檗堿片含量測定方法的改進(jìn)[J].海峽藥學(xué)，2012，24（9）：64-66.

本文編輯：吳 衛(wèi)