（廣西東興出入境檢驗(yàn)檢疫局，廣西東興538100）

海蜇（Rhopilema esculentum Kishinouye）是一種大型的食用水母，為暖水沿岸種，北部灣海域是海蜇廣泛分布的四大海域之一。海蜇不僅含有豐富的蛋白質(zhì)、糖類、多種維生素和微量元素，而且還含有多種生物活性成分[1-6]，也兼具多種醫(yī)藥功能[7-8]，近代研究表明海蜇有治療高血壓、慢性氣管炎、哮喘、胃潰瘍和單純性甲狀腺腫大等作用[9]，越來越受到消費(fèi)者的青睞。

硼是人體和動(dòng)植物生長(zhǎng)必需微量元素，主要以硼酸、硼砂及其鈉、鎂、鈣形成的絡(luò)合物3種形式存在。微量的硼對(duì)人體有益，如具有防止骨質(zhì)疏松、促進(jìn)鈣的代謝、抗菌、降血脂等生理作用。但硼的攝入量過高，則會(huì)產(chǎn)生毒副作用，輕者會(huì)食欲減退、消化不良，嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、紅斑、循環(huán)系統(tǒng)障礙、休克、昏迷等癥狀[10]。硼砂的成人中毒劑量為1 g～3 g，成人致死量為 15 g～20 g，嬰兒致死量為 2 g～5 g[11]。因此，控制硼的合理攝入量是極為必要的。

水產(chǎn)品特別是海產(chǎn)品，它們對(duì)于生長(zhǎng)環(huán)境中的硼具有一定的富集作用，由于海水中就天然含有一定量的硼酸，導(dǎo)致海捕水產(chǎn)品本身都不同程度的能夠檢測(cè)出硼酸，特別是海蜇含水量高，對(duì)海水中硼酸的富集作用更加明顯，其體內(nèi)硼酸的本底值明顯高于其它魚、蝦、蟹和貝類等。

由于海蜇的捕撈季節(jié)溫度較高，許多海蜇加工企業(yè)經(jīng)常會(huì)非法添加硼砂和硼酸作為防腐劑。目前食品中硼酸測(cè)定是采用食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.275-2016《食品中硼酸的測(cè)定》于2017年6月23日實(shí)施，但是該標(biāo)準(zhǔn)也都是通過測(cè)定硼元素間接確定食品中硼砂或硼酸的含量，還是不能直接判斷食品中是否是人為添加的還是本底存在的硼砂或硼酸。目前農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)NY 5171-2002《無公害食品海蜇》中關(guān)于硼酸的限量標(biāo)準(zhǔn)為100 mg/kg已于2014年4月4號(hào)廢止，也沒有新的替代標(biāo)準(zhǔn)。而農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)NY 1515-2007《綠色食品海蜇及制品》中硼酸為不得檢出（＜0.01 mg/kg）。為了科學(xué)準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)北部灣產(chǎn)海蜇的中硼酸含量，有必要對(duì)當(dāng)?shù)睾ｒ刂信鹚岜镜缀窟M(jìn)行測(cè)定。為日常監(jiān)管提供科學(xué)依據(jù)，并制定出相對(duì)合理的限量標(biāo)準(zhǔn)就具有重大的現(xiàn)實(shí)意義，特別是對(duì)于海蜇加工企業(yè)來說更加公平合理。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

T9CS紫外可見分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；2-乙基-1，3-己二醇、三氯甲烷、硫酸、無水乙醇、甲醇、姜黃色素、冰乙酸：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；硼酸標(biāo)準(zhǔn)溶液500 μg/mL：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。

1.2 檢測(cè)方法及原理

采用食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.275-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中硼酸的測(cè)定》對(duì)采集的樣品進(jìn)行測(cè)定。原理是用2-乙基-1，3-己二醇對(duì)樣品中硼酸進(jìn)行富集和萃取，再利用硫酸與姜黃混合生成的質(zhì)子化姜黃與硼酸反應(yīng)生成紅色產(chǎn)物。溶液顏色深淺與樣品中硼酸含量成正比，通過比色可以測(cè)定樣品中硼酸的含量。

1.3 樣品采集

本次采樣時(shí)間為2016年3月至2017年3月。本次采樣樣品為捕撈時(shí)采集未人為添加任何物質(zhì)的海蜇，共180份。涉及北部灣防城港、北海、欽州三大海域。其中防城港采樣點(diǎn)4個(gè)，80個(gè)樣品；欽州采樣點(diǎn)3個(gè)，60個(gè)樣品；北海采樣點(diǎn)2個(gè)，40個(gè)樣品。樣品采集后，保存在加冰的保溫箱中當(dāng)天運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，制樣，保存于塑料試管中置于-18℃冰箱中備用。

1.4 市購(gòu)海蜇樣品測(cè)定

從北部灣海鮮市場(chǎng)上購(gòu)買成品海蜇50份，測(cè)定其硼酸含量。

1.5 成品海蜇中硼酸含量與浸泡時(shí)間的關(guān)系

選取3種硼酸含量低、中、高的成品海蜇樣品進(jìn)行浸泡試驗(yàn)，采取每3小時(shí)換一次蒸餾水，分別檢測(cè)3、6、12、18、24 h后的海蜇樣品中硼酸含量，研究硼酸含量變化與浸泡時(shí)間的關(guān)系。

2 結(jié)果與討論

2.1 方法的線性范圍及檢出限

配制 0、2.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 μg 7 個(gè)含量的硼酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行分析，以標(biāo)準(zhǔn)系列的硼酸含量（μg）為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性回歸方程為：Y=0.016X+0.002，R2=0.999，在此范圍內(nèi)，方法線性范圍良好。檢出限為0.5 mg/kg。

2.2 準(zhǔn)確度及精密度試驗(yàn)

以實(shí)驗(yàn)室一級(jí)水、海水及海蜇3種樣品進(jìn)行硼酸的加標(biāo)回收試驗(yàn)，添加3種不同濃度水平，每個(gè)添加水平做3次平行，回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的試驗(yàn)結(jié)果見表1。

上述3種樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)回收率范圍95.3%～102.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～4.7%，方法準(zhǔn)確可靠。

2.3 北部灣海蜇本底調(diào)查數(shù)據(jù)

北部灣海蜇本底調(diào)查數(shù)據(jù)見表2、表3。

從表2和表3中數(shù)據(jù)來看，180份的北部灣海蜇中均能檢出硼酸，說明海蜇本身就含有硼酸，北部灣海蜇中硼酸含量的范圍為3.22 mg/kg～17.73 mg/kg之間，其中70%左右的樣品硼酸含量集中在5.0 mg/kg～10.0 mg/kg之間。平均值在6.83 mg/kg～8.81 mg/kg之間，中位值在5.83 mg/kg～8.29 mg/kg之間，中位值低于平均值，表明海蜇樣品中的硼酸含量大部分集中于低端。同時(shí)對(duì)北部灣海域海水進(jìn)行硼酸測(cè)定，硼酸范圍為4.03 mg/kg～6.89 mg/kg，說明海蜇對(duì)海水中硼酸具有一定的富集作用。

表1 方法的回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=3）Table 1 The recoveries and RSD of the method（n=3）

表2 北部灣海蜇中硼酸含量范圍及比例Table 2 The range and proportion of boric acid in jellyfish in Beibu Gulf

表3 北部灣海蜇中硼酸含量分布特點(diǎn)Table 3 Distribution characteristics of boric acid in jellyfish in Beibu Gulf

2.4 市購(gòu)海蜇中硼酸檢測(cè)結(jié)果

由于成品海蜇是海捕海蜇用明礬和食鹽經(jīng)三礬兩鹽工藝腌制而成，最終水分含量不超過68%，而海捕海蜇水分含量高達(dá)95%以上，折算水分含量后，大部分海蜇制品中硼酸含量在5.0 mg/kg～30.0 mg/kg之間。市購(gòu)海蜇中硼酸檢測(cè)結(jié)果見表4。

表4 市購(gòu)海蜇中硼酸含量測(cè)定Table 4 Determination of boric acid of jellyfish purchased from the market

從表4數(shù)據(jù)可以看出，市購(gòu)海蜇中硼酸含量大部分都不大于30 mg/kg。

2.5 成品海蜇中硼酸含量與浸泡時(shí)間的關(guān)系

鑒于成品海蜇高鹽分和明礬的存在，通常在食用海蜇產(chǎn)品時(shí)都需要進(jìn)行浸泡再進(jìn)行食用。選取3種硼酸含量低、中、高的成品海蜇樣品進(jìn)行浸泡試驗(yàn)，采取每 3 小時(shí)換一次蒸餾水，分別檢測(cè) 3、6、12、18、24 h 后的海蜇樣品中硼酸含量，研究硼酸含量變化與浸泡時(shí)間的關(guān)系，結(jié)果見圖1。

圖1 成品海蜇中硼酸含量與浸泡時(shí)間的關(guān)系圖Fig.1 The relation chart of boric acid and soaking time in finished jellyfish

從圖1可以看出，隨著浸泡時(shí)間的增加，3種不同含量的成品海蜇中硼酸含量均降低，其中在0～6 h范圍內(nèi)，硼酸含量下降的速率比較明顯，6 h后下降速率減慢，經(jīng)過24 h后，低含量海蜇中硼酸未檢出，中、高含量海蜇中硼酸值都明顯降低。為了最大限度的降低海蜇中硼酸的攝入量，在日常生活中，應(yīng)至少浸泡6 h以上，并且勤換水。

2.6 海蜇食用風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

對(duì)非遺傳性毒性物質(zhì)和非致癌物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，通常方法是將通過試驗(yàn)獲得的可觀察的無作用劑量水平（Maximal no-effect lever，NOEL）或可觀察的無副作用劑量水平（No Observed Adverse Effect Level，NOAEL）值乘以合適的安全系數(shù)等于安全水平或者每日允許攝入量（Acceptable daily intake，ADI）。人的 ADI由無副作用劑量水平（NOAEL）和不確定因子（Uncertainty factor，UF）組成（ADI（mg/（kgBW·d）=NOAEL/UF）[12]。不確定因子（UF）由種屬間和種屬內(nèi)不確定因子組成，傳統(tǒng)上采用兩個(gè)10倍因子，即保險(xiǎn)系數(shù)為100倍（UF=100）?？紤]到各種屬間硼的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)的類似性以及硼對(duì)動(dòng)物和人都具有營(yíng)養(yǎng)作用，歐洲和美國(guó)的硼危險(xiǎn)性科學(xué)評(píng)估已采用降低的總不確定因子即UF=10n=32（n=1.5）?？捎^察的無副作用劑量水平（NOAEL）為9.6 mg/kg/d。人對(duì)硼的日允許攝取量應(yīng)為：ADI=9.6/32=0.3 mg/（kgBw·d）。采用60 kg的婦女體重估算，ADI為18 mg/（kg·d）[12]。假設(shè)普通健康人群每日攝取250 g海蜇產(chǎn)品，算出：

海蜇中硼酸的最大限量水平=每日允許攝入量/每日攝入的水產(chǎn)品量=（18 mg/人/日）/（250g/人/日）=0.072 mg/g=72 mg/kg。

不考慮人為添加硼酸的情況下，成品海蜇中硼酸含量大部分集中在30 mg/kg以下，遠(yuǎn)低于72 mg/kg的限量，同時(shí)在生活中人們食用海蜇前，都需要進(jìn)行浸泡數(shù)小時(shí)再進(jìn)行加工，浸泡后能大大降低海蜇中硼酸含量，所以海蜇產(chǎn)品中硼酸的食用風(fēng)險(xiǎn)低，可以放心食用。

3 結(jié)論與展望

北部灣海捕海蜇中確實(shí)存在一定含量的硼酸本底值，硼酸含量的范圍為3.22 mg/kg～17.73 mg/kg，折算水分含量，海蜇制品硼酸含量在5.0 mg/kg～30.0 mg/kg之間，在不考慮人為添加的情況下，成品海蜇中硼酸含量大部分集中在30 mg/kg以下，遠(yuǎn)低于72 mg/kg的限量，同時(shí)在生活中人們食用海蜇前，都需要進(jìn)行浸泡數(shù)小時(shí)再進(jìn)行加工，浸泡后能大大降低海蜇中硼酸含量，所以對(duì)于海蜇產(chǎn)品中硼酸的食用風(fēng)險(xiǎn)低?，F(xiàn)行的農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)NY 1515-2007《綠色食品海蜇及制品》中硼酸為不得檢出（<0.01 mg/kg），有些過于嚴(yán)格，否則會(huì)使有些未添加硼酸的海蟄誤判為不合格產(chǎn)品，有失公平性，損害了海蜇加工企業(yè)的利益。同時(shí)下一步應(yīng)加緊研究未人為添加硼酸的海蜇產(chǎn)品中硼酸含量范圍，制定出科學(xué)合理的限量標(biāo)準(zhǔn)，有效的區(qū)別開本底存在和人為添加的可能性。

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