何翠 曾旭 熊紅兵 羅玉華 周文兵

摘要 以白魔芋球莖為外植體，研究白魔芋組培技術(shù)。結(jié)果表明，75%酒精30 s+0.1%升汞15 min消毒效果較好，污染率較低，為11.11%；6-BA 1 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+NAA 1 mg/L愈傷組織誘導(dǎo)效果較好，誘導(dǎo)率達(dá)到73.33%，且愈傷組織質(zhì)量緊密；6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L誘導(dǎo)芽過程中，出芽時(shí)間較早，分化率最高，達(dá)到91.11%，且在芽生長(zhǎng)過程中同時(shí)生長(zhǎng)出根，比較適合芽誘導(dǎo)。

關(guān)鍵詞 白魔芋；組培技術(shù)；芽誘導(dǎo)

中圖分類號(hào) S632.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2018）04-0071-02

Abstract Taking the corm of A.ablus liu et Chen as test material，tissue culture technology was studied.The results showed that disinfection effect of 75% alcohol 30 s+0.1% HgCl 15 min was better，pollution rate was 11.11%；The induction effect of 6-BA 1 mg/L+TDZ 2 mg/L+NAA 1 mg/L was better，and the induction rate reached 73.33%，and the tissue quality was close.In the medium of 6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，the buds were induced to sprout earlier，with the highest differentiation rate，up to 91.11%，and in the process of bud growth，the roots grew，which was suitable for the bud induction.

Key words A.ablus liu et Chen；tissue culture technology；bud induction

白魔芋（A.ablus liu et Chen）為天南星科（Araceae）魔芋屬多年生草本植物，因其地下球莖富含葡甘露聚糖[1-2]而著名，自然分布在地處四川南部、云南北部的金沙江下游的屏山、金陽、綏江、雷波、永善、鹽津等縣。葡甘露聚糖具有良好的粘著性、膨脹性、懸浮性等理化性質(zhì)，同時(shí)對(duì)人體有醫(yī)療保健功能，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、建筑等領(lǐng)域[2-4]。近年來，白魔芋已發(fā)展成為宜賓市的地方特色經(jīng)濟(jì)作物之一。但白魔芋病害嚴(yán)重，繁殖時(shí)以球莖、根狀莖為主，需種量大（一般為7 500～9 000 kg/hm2），繁殖速度慢、周期長(zhǎng)，繁殖系數(shù)低[2]，不能滿足生產(chǎn)用種的需要，已成為魔芋產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的一大瓶頸，阻礙了魔芋產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展。植物組織培養(yǎng)是一種十分有效的繁殖手段，已有研究者[5-6]進(jìn)行了不同魔芋“種”的組織培養(yǎng)，獲得再生植株。本試驗(yàn)以白魔芋球莖為外植體，通過白魔芋組培技術(shù)初步研究，探索白魔芋組培新技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為屏山縣中都鎮(zhèn)李家壩村某農(nóng)戶農(nóng)田種植的白魔芋；實(shí)驗(yàn)室為宜賓市農(nóng)科院檢測(cè)中心二樓組培實(shí)驗(yàn)室。

1.2 試驗(yàn)方法

以白魔芋球莖為外植體進(jìn)行不同消毒處理，然后將球莖洗凈在自來水下沖洗2 h，削去一層薄外皮，用無菌水洗3～5遍，放在超凈工作臺(tái)中滅菌培養(yǎng)皿（高壓滅菌過程中提前裝入濾紙）上，切成0.5 cm3的塊狀，接入統(tǒng)一的培養(yǎng)基中，每個(gè)處理接種10瓶，每瓶接3塊，3次重復(fù)。不同外植體消毒方式如表1所示，不同培養(yǎng)基設(shè)計(jì)如表2所示。

2 結(jié)果與分析

2.1 外植體不同消毒處理對(duì)組培過程中污染率的影響

由圖1可知，處理A5消毒效果好，15 d統(tǒng)計(jì)污染率為11.11%；處理A2次之，為13.33%；處理A3污染率最高，達(dá)到56.67%，且有褐變現(xiàn)象。

2.2 外植體在不同培養(yǎng)基中的愈傷組織誘導(dǎo)情況

分別對(duì)白魔芋塊莖在不同培養(yǎng)基中進(jìn)行了誘導(dǎo)，暗培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)情況。由表3可知，各處理間差異顯著，處理B4塊莖愈傷組織平均誘導(dǎo)率最高，達(dá)到73.33%，且愈傷組織質(zhì)量緊密，與處理B1、B3差異不顯著，與處理 B2、B5差異極顯著；處理B2愈傷組織平均誘導(dǎo)率最低，為45.55%，愈傷組織少有疏松。

2.3 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)結(jié)果

將愈傷組織切成大小約0.5 cm的3小塊，接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每瓶接3個(gè)愈傷組織塊，每種培養(yǎng)基接15瓶，在26～28 ℃、60%光強(qiáng)度、10 h/d光照條件下培養(yǎng)，21 d統(tǒng)計(jì)帶芽愈傷組織數(shù)。由表4可知，處理C4、C5出芽時(shí)間較早，10 d左右就可見明顯芽點(diǎn)。帶芽愈傷組織個(gè)數(shù)，以處理C4最多，分化率達(dá)到90%以上；處理C6次之，分化率為88.89%?？梢钥闯觯幚鞢4為較佳誘導(dǎo)芽培養(yǎng)基，且各培養(yǎng)基分化出的芽，在生長(zhǎng)過程中直接生根。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)中，消毒處理中以75%酒精30 s+0.1%升汞15 min消毒效果較好，污染率較低，為11.11%，褐變較少。對(duì)于用有NaClO的處理出現(xiàn)褐變較重的現(xiàn)象，可能是由于其氧化的作用，導(dǎo)致外植體褐變。

在愈傷組織誘導(dǎo)中，以6-BA 1 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+NAA 1 mg/L效果較好，誘導(dǎo)率達(dá)到73.33%，且愈傷組織質(zhì)量緊密，比較適合白魔芋愈傷組織誘導(dǎo)。芽誘導(dǎo)培養(yǎng)中，以6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L、6-BA 2 mg/L+NAA 0.01 mg/L出芽時(shí)間較早，尤以前者分化率最高，達(dá)到91.11%，且在芽生長(zhǎng)過程中同時(shí)生長(zhǎng)出根，比較適合芽誘導(dǎo)。本試驗(yàn)研究條件有限，更細(xì)致的結(jié)果還有待進(jìn)一步的研究和提升。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 胡悅，冉興宇，張興國，等.魔芋組培快繁的影響因素[J].中國蔬菜，2012（8）：75-79.

[2] 劉佩瑛，史泉清，陳勁楓.魔芋栽培與加工[M].重慶：科技文獻(xiàn)出版社重慶分社，1986.

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[4] 孔凡真.魔芋的開發(fā)利用與市場(chǎng)前景[J].生態(tài)經(jīng)濟(jì)，2002（11）：92-93.

[5] 張征蘭.魔芋組織培養(yǎng)與植株再生的研究[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1986，5（3）：224-227.

[6] 曾昭初，高翔.白魔芋組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)的研究[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，1997，25（1）：28-31.