黃子俊，馮 青，田 苗，楊 浩，劉子雄

（中海油田服務(wù)股份有限公司油田生產(chǎn)研究院，天津 300459）

微生物提高原油采收率（Microbial Enhanced Oil Recovery，MEOR）是利用微生物的有機(jī)活動及代謝產(chǎn)物來提高原油采收率的一項(xiàng)綜合性技術(shù)。室內(nèi)研究顯示微生物采油能提高采收率15%～23%，但從諸多油田現(xiàn)場應(yīng)用情況來看，常規(guī)微生物采油措施有效期短，一般小于3個(gè)月，增油量少，一般在300 t左右，與室內(nèi)相比差距較大，效果不持久，難以同熱力驅(qū)、化學(xué)驅(qū)、聚合物驅(qū)一樣開展大規(guī)模的生產(chǎn)應(yīng)用。

油藏處于一種特殊環(huán)境，其中的礦物組成及性質(zhì)，孔隙度和滲透率，地層壓力，流體的溫度、pH、礦化度，原油性質(zhì)，殘余油飽和度等，都會對微生物生長產(chǎn)生明顯的影響，同時(shí)油藏內(nèi)本身又含有一些內(nèi)源微生物，注入的微生物與內(nèi)源微生物能否兼容，注入的營養(yǎng)液對內(nèi)源微生物有何影響，如何改善和提高微生物的采油功能，室內(nèi)實(shí)驗(yàn)理論參數(shù)設(shè)計(jì)是否符合現(xiàn)場實(shí)際，這些關(guān)鍵問題仍未得到有效解決，導(dǎo)致微生物采油效果不理想，技術(shù)推廣應(yīng)用難度大。因此，開展微生物采油關(guān)鍵技術(shù)的研究，對提高采收率貢獻(xiàn)及促進(jìn)其在油田開發(fā)的大規(guī)模應(yīng)用具有重要意義[1-7]。

1 改善微生物采油關(guān)鍵技術(shù)研究

1.1 采油功能性微生物篩選

影響微生物功能的主要因素是溫度、pH值、滲透壓和溶解氧含量等，因原油的高疏水性及原油組分的毒性，傳統(tǒng)微生物采油技術(shù)往往過于注重水相微生物，其技術(shù)開發(fā)的致命缺陷是環(huán)境適應(yīng)性差和采油功能性弱。利用PCR技術(shù)和FISH熒光染色技術(shù)，能迅速簡便地判斷細(xì)菌間的系統(tǒng)和分類學(xué)差異。通過對原油微生物群落宏基因組學(xué)研究分析，原油中不僅存在與水相顯著不同、多樣性很高的獨(dú)特的油相微生物群落，而且這些微生物由于受原油、芽孢形態(tài)等保護(hù)，其對高溫高壓等還具有一定耐性，這些功能微生物親油性更強(qiáng)，在合適條件下更易與原油接觸發(fā)揮作用，具有比水相微生物更好的石油組分降解能力，是采油的優(yōu)選微生物。

從國內(nèi)某油藏油井產(chǎn)出液中取樣分離出68種不同的菌株，可以看出81%的微生物分布在水相中（見表1），其中放線菌屬在水相中不存在微生物，在油相中分布5種功能微生物，通過室內(nèi)菌種進(jìn)一步純化評價(jià)確定這5株菌具有較好的嗜烴、降黏功能（見圖1）。

1.2 耦合內(nèi)源菌和外源菌培育核心微生物

采用微生物培養(yǎng)新措施，直接以油田采出液為培養(yǎng)基，變溫培養(yǎng)，對微生物“顆?！背暦稚ⅲ娱L培養(yǎng)周期，建立了中國最大的石油微生物菌株資源庫（20 000多株），構(gòu)建了自1953年以來生效發(fā)表的、分離自石油環(huán)境的54個(gè)可培養(yǎng)性物種。研究表明，任何油藏中都存在很多微生物，這些微生物通過有規(guī)律和秩序地相互作用和影響，形成了穩(wěn)定的微生物群落，通過微生物共現(xiàn)性網(wǎng)絡(luò)分析，發(fā)現(xiàn)大部分油藏存在“核心微生物”，其在微生物群落網(wǎng)絡(luò)中起主導(dǎo)作用，能帶動相關(guān)微生物群落的有效生長。

實(shí)際油藏中可能存在“短板”核心內(nèi)源微生物，例如勝利油田春風(fēng)油藏某斷塊內(nèi)源微生物種類比較單一，含有具有采油潛力的假單胞菌屬，缺乏其他如桿菌、不動桿菌等采油功能菌屬，需要激活或補(bǔ)充這些缺乏的短板采油微生物[8，13]。室內(nèi)通過DNA基因重組和增殖環(huán)境控制，精心挑選的外源微生物復(fù)配后可定向激活釋放具有良好采油功能的“核心”內(nèi)源微生物，通過現(xiàn)場分析微生物吞吐采油見效特征和生化指標(biāo)，產(chǎn)出液中微生物激活數(shù)量較高的井增油較為明顯，其中檢測到內(nèi)源菌菌濃維持在106個(gè)/毫升，但基本未檢測到外源菌。同過去微生物采油技術(shù)相比，這里關(guān)鍵技術(shù)有兩點(diǎn)：（1）外源菌目的不是采油，而是起到了激發(fā)短板內(nèi)源菌的作用；（2）微生物采油不是依靠幾株內(nèi)源單菌，而是用核心內(nèi)源菌有效調(diào)控相關(guān)微生物群落發(fā)揮集團(tuán)采油優(yōu)勢。

表1 某油藏中油水不同區(qū)域微生物分布Tab.1 Microorganism distribution in oil and water regions in a reservoir

圖1 放線菌-Tessaracoccus sp SL014B-76A1Fig.1 Actinomycetes-Tessaracoccus sp SL014B-76A1

1.3 相似相容性定向調(diào)控微生物菌群代謝產(chǎn)物

不同微生物需要不同的營養(yǎng)和環(huán)境條件，微生物只有在適宜的油藏環(huán)境條件下，并給予適宜的營養(yǎng)物質(zhì)才能高效、長效地發(fā)揮采油作用。例如菌株假單胞菌能夠在缺/厭氧條件下快速生長并釋放大量的生物氣，有利于提高局部地層能量并提高波及范圍。菌株芽孢桿菌能夠產(chǎn)生高效生物表面活性劑，降低油水界面性質(zhì)。該菌同時(shí)能夠選擇性激活油藏中的內(nèi)源微生物。上述篩選的假單胞菌、芽孢桿菌及迪茨氏菌等核心微生物均分離至油相，能夠進(jìn)行兼性生長，有助于其適應(yīng)油藏的微氧/缺氧/厭氧環(huán)境并進(jìn)行大量的增殖。

圖2 華北油田二連某斷塊微生物群落菌屬分布Fig.2 Distribution of microbial community in north China oilfield

華北油田二連某斷塊試驗(yàn)區(qū)油藏具有低滲（5.32×10-3μm2）、油稠（402 mPa·s）、強(qiáng)酸敏（酸敏指數(shù)為 0.74～0.89）、膠質(zhì)瀝青質(zhì)含量高（46.0%～51.2%）的特性，油藏特性要求微生物群落（微生物群落菌屬分布見圖2）采油過程中定向調(diào)控不能產(chǎn)生有機(jī)酸，不能產(chǎn)生生物聚合物。提出并驗(yàn)證了指導(dǎo)微生物配伍與調(diào)控的“相似相容”原則，并定向調(diào)控功能微生菌群，避免了盲目激活。通過激活劑和營養(yǎng)劑的配伍篩選，針對性開發(fā)了抑制硫酸鹽還原危害的硝酸鹽還原菌劑，重點(diǎn)培養(yǎng)了代謝產(chǎn)物以表面活性劑為主的單胞菌、桿菌、不動桿菌等菌屬，為微生物現(xiàn)場長效地發(fā)揮采油功能提供了新的技術(shù)路線[9-12]。

1.4 聚合生物酶協(xié)調(diào)作用

微生物采油技術(shù)的兩大分支是本（異）源生物采油技術(shù)（即細(xì)菌法）和生物酶采油技術(shù)，長期以來因?yàn)榧?xì)菌會消化吸收酶，人們一直認(rèn)為細(xì)菌法和生物酶兩種微生物采油技術(shù)無法共生共存。通過對微生物迪茨氏菌研究發(fā)現(xiàn)，該菌株含有獨(dú)特基因編碼方式，能夠?qū)⒀跫t還原蛋白（Rd）與烷烴羥化酶（AlkB）融合形成一種特殊的蛋白酶，可顯著擴(kuò)大對石油烴的利用范圍，獲得先前所不具有的利用長鏈復(fù)雜烷烴的能力（國家發(fā)明專利ZL201110029754.6）。同時(shí)該菌存在多酶系，并在石油烴降解中發(fā)揮協(xié)同作用，即各自負(fù)責(zé)降解不同長度的石油烴，修正了微生物一定會優(yōu)先降解短鏈烷烴的傳統(tǒng)觀念[14-18]。

室內(nèi)開展了內(nèi)源菌、耦合內(nèi)外源菌、內(nèi)外源菌聚合生物酶的三種不同方式原油乳化實(shí)驗(yàn)。在3個(gè)原油樣品中分別加入CF5N5H21培養(yǎng)液和不同的混合菌群，模擬油藏溫度、礦化度等現(xiàn)場條件，150 r/min振蕩培養(yǎng)。一周后乳化生長OD（optical density，表示被檢測物吸收掉的光密度）分別為0.972、25、79，同單一菌液加培養(yǎng)液相比，通過在激活劑基礎(chǔ)上添加擁有多個(gè)降解雜環(huán)類及擴(kuò)大并促進(jìn)長鏈烴降解的不同的酶組合，聚合生物酶后，顯著增加了微生物采油的乳化能力和乳化速度（見圖3）。

圖3 內(nèi)源菌、耦合內(nèi)外源菌、聚合生物酶三種不同培養(yǎng)方式原油乳化效果對比Fig.3 Comparison of crude oil emulsification effects with endogenous bacteria，coupling internal and external bacteria and polymerized biological enzymes

2 微生物施工注入設(shè)計(jì)研究

常規(guī)微生物采油菌液和營養(yǎng)液的比例在1∶10左右，這樣雖然降低了菌液注入成本，但在油藏多孔介質(zhì)內(nèi)微生物主要消耗的是營養(yǎng)液，而非原油組分中的碳源、氮源、磷源等營養(yǎng)物質(zhì)，采油功能有限。研究發(fā)現(xiàn)通過增大菌液的用量，降低營養(yǎng)液的比例，能充分發(fā)揮微生物的采油功能，當(dāng)菌液和營養(yǎng)液的比例在1∶1左右時(shí)，微生物裂解乳化周圍原油的活性最高，因此設(shè)計(jì)菌液和不同類型營養(yǎng)液的比例為1∶1。

常規(guī)微生物采油燜井時(shí)間為7 d～9 d，通過模擬油藏礦化度、溫度、壓力條件觀察不同實(shí)驗(yàn)方式下菌種穩(wěn)定傳代3代，生長達(dá)到108個(gè)/毫升以上所需要的時(shí)間，其中旋轉(zhuǎn)式搖床培養(yǎng)所需的時(shí)間為48 h～72 h，一維短巖心持續(xù)恒速注入方式所需的時(shí)間為5 d～15 d，三維大型巖心滴灌方式所需的時(shí)間為50 d～150 d，因此現(xiàn)場微生物采油燜井時(shí)間應(yīng)該在50 d～150 d，一般取平均值3個(gè)月左右。

微生物的形態(tài)有球菌，桿菌，螺旋菌等，這些細(xì)菌在目的油層中移動需要一定程度的增殖空間，在合適滲透率條件下微生物可自我運(yùn)動到油井周圍直徑10 m左右的儲油巖層，數(shù)模預(yù)測隨微生物注入用量的增加，累計(jì)增油量也相應(yīng)增加，當(dāng)設(shè)計(jì)處理半徑5 m～6 m時(shí)菌液換油量可達(dá)到3 t/t～6 t/t，當(dāng)設(shè)計(jì)處理半徑8 m～10 m時(shí)菌液換油量可達(dá)到7 t/t～11 t/t，因此微生物吞吐用量可根據(jù)實(shí)際投入產(chǎn)出比情況設(shè)計(jì)采油處理半徑為10 m左右或者取0.02 PV。

3 現(xiàn)場應(yīng)用研究

微生物采油主要應(yīng)用在稠油冷采、高含水油藏低效井、嘗試其他方法無效的關(guān)停井，現(xiàn)場在新疆克拉瑪依、大慶、吉林、華北等油田進(jìn)行了注入試驗(yàn)取得了較好的效果。

以準(zhǔn)噶爾盆地西緣的春風(fēng)油田為例，春風(fēng)油田位于準(zhǔn)噶爾盆地西緣車排子緩坡帶，主要含油層系是新近系沙灣組，油藏埋藏深度190 m～700 m，油層厚度 3 m～6 m，滲透率2 μm2～5 μm2，孔隙度 31%～35%，油藏溫度19℃～31℃，地下原油黏度15 000 mPa·s～90 000 mPa·s，50 ℃下脫氣原油黏度 2 000 mPa·s～10 000 mPa·s，屬于薄淺層超稠油高滲透砂巖油藏。原油組分中，飽和烴占55%，芳香烴占25%，膠質(zhì)占15%，瀝青質(zhì)占4%；原油中C+H含量達(dá)98%，加熱時(shí)烴類裂解需要的能量較低，容易降黏。排6南塊南部油水過渡帶薄淺層特稠油蒸汽吞吐開采初期，由于邊水侵入，造成高含水關(guān)井。2014年9月在油水過渡帶薄淺層特稠油P6-P48、P6-P47和P6-P49（高含水關(guān)停井）等采油井開展微生物吞吐冷采試驗(yàn)，燜井至2015年3月開井冷采生產(chǎn)，取得了明顯的增油效果，截止到2017年5月有效期已達(dá)2年3個(gè)月，單井增油3 630 t～6 314 t。微生物采油前后原油黏度發(fā)生了較大變化。P6-P48井采用微生物采油后，50℃脫氣原油黏度下降了58%；P6-P49井微生物采油后，50℃脫氣原油黏度由2 070 mPa·s下降至1 075 mPa·s，下降了48%。從P6-P48井微生物冷采前后的菌種鑒定結(jié)果看，采出液中檢測出了注入的活菌，表明注入菌菌種適應(yīng)地層條件并生長繁殖，開井第4天，水樣中微生物數(shù)量達(dá)700×104個(gè)/毫升，油樣中微生物數(shù)量達(dá) 264×104個(gè)/毫升，并且保持了60 d左右。

在其他多個(gè)油田應(yīng)用后也顯著提高了微生物采油效果，微生物吞吐有效期在1～3年，單井增油量平均大于4 000 t，同以往微生物技術(shù)相比，噸微生物換油量提高了10～30倍，具有較好的推廣應(yīng)用前景。

4 結(jié)論

（1）原油微生物具有比水相微生物更好的石油組分降解能力及高溫高壓等耐性，是采油的優(yōu)選微生物。

（2）同外源微生物復(fù)配后可定向激活釋放具有良好采油功能的“核心”內(nèi)源微生物，從而帶動整個(gè)微生物群落發(fā)揮集團(tuán)采油優(yōu)勢。

（3）根據(jù)微生物配伍與調(diào)控的“相似相容”原則，可以定向調(diào)控功能微生菌群，增加微生物對環(huán)境的適應(yīng)性和功能活性。

（4）通過聚合生物酶，可以顯著增加微生物采油的乳化能力和乳化速度。

（5）通過各項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)研究，建立了一套微生物采油注入控制設(shè)計(jì)方法，在多個(gè)油田應(yīng)用后顯著提高了微生物采油效果，具有較好的推廣應(yīng)用前景。

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