馬黎，談益妹，程英，魯楠，華偉光

（1.上海市皮膚病醫(yī)院皮膚與化妝品研究室，上海200443；2.上海家化聯(lián)合股份有限公司，上海200438）

敏感性皮膚在世界范圍內(nèi)都具有較高的發(fā)病率[1]。在中國，約有23%的中國女性認(rèn)為自己是敏感性皮膚，約有15.93%的女性認(rèn)為自己是非常敏感或敏感性皮膚[2-3]。敏感性皮膚的成因十分復(fù)雜，目前研究認(rèn)為其可能與皮膚屏障功能受損[4]、神經(jīng)敏感性增強(qiáng)[5]、血管擴(kuò)張和炎癥因子表達(dá)增多[6]等相關(guān)，易在各種外界因素刺激下產(chǎn)生刺痛、瘙癢、灼燒等感覺，以及紅斑、干燥、丘疹等癥狀[7]。近年來針對敏感性皮膚開發(fā)的化妝品主要目的在于恢復(fù)皮膚的屏障功能，降低皮膚敏感性和炎癥反應(yīng)，從而提高皮膚耐受性。因此，建立全面評價敏感性皮膚化妝品的安全性和功效性的方法，對于改善敏感性皮膚消費者的皮膚狀況至關(guān)重要。

本研究擬通過對2種敏感性皮膚用面霜進(jìn)行單次感覺試驗和長期試用試驗，結(jié)合儀器測試的方法，對敏感性皮膚化妝品的安全性和功效性進(jìn)行對比評價，來初步建立較為全面的敏感性皮膚化妝品適用性評價方法。

1 材料與方法

1.1 研究對象66例健康女性，年齡22～60歲，平均（42.97±8.89）歲。所有受試者在參加測試前均充分知曉整個測試過程，自愿簽署知情同意書。入選標(biāo)準(zhǔn)：受試者在首次訪問篩選時均為乳酸刺痛陽性者；無其他皮膚疾患或系統(tǒng)性疾?。皇茉囌咴谠囼炂陂g不使用其他面部護(hù)膚產(chǎn)品，并避免過度的日光曝露。

1.2 研究材料

1.2.1 測試產(chǎn)品2種敏感性皮膚用面霜（均由上海家化聯(lián)合股份有限公司提供，1種為家化產(chǎn)品，另1種為競爭產(chǎn)品）。根據(jù)乳酸刺痛篩選結(jié)果將受試者平均分為2組，隨機(jī)使用2種面霜。單次感覺測試時，使用半臉隨機(jī)對照，對照品為蒸餾水。累積試用試驗進(jìn)行期間，測試產(chǎn)品每天早晚各使用1次。

1.2.2 10%乳酸100%乳酸（Sigma公司）應(yīng)用蒸餾水稀釋為10%的溶液，常溫保存。

1.3 方法

1.3.1 乳酸刺痛試驗將10%乳酸或蒸餾水50 μL滴在直徑8 mm的濾紙上，置于受試者雙側(cè)鼻唇溝，分別于30 s、2.5 min和5 min由受試者評估測試部位瘙癢、刺痛、灼痛感的不適程度。按4分法進(jìn)行評分（0分為沒有感覺，1分為輕度，2分為中度，3分為重度）。2.5 min和5 min刺痛評分之和≥3分為乳酸刺痛陽性者[8]。

1.3.2 單次使用感覺試驗符合入選條件的受試者在篩選合格后7 d來訪，受試者一側(cè)鼻唇溝使用測試產(chǎn)品，對側(cè)使用蒸餾水，評價即刻使用產(chǎn)品后的面部感覺，分別于30 s、2.5 min、5 min、10 min以及洗去產(chǎn)品后5 min按4分法由受試者評估測試部位瘙癢、刺痛、灼痛感的不適程度。

1.3.3 長期使用安全性和功效性測試在單次感覺測試3 d后，進(jìn)行長期使用試驗。分別于使用前（基礎(chǔ)值）、使用后2周和4周進(jìn)行回訪評價。

（1）臨床評估：由皮膚科醫(yī)師對受試者面部安全性進(jìn)行評價，包括紅斑、水腫、脫屑等的不同程度：0分為無，1分為輕度，2分為中度，3分為重度。

（2）儀器測試：皮膚經(jīng)表皮失水率測試儀AquaFlux Model AF200（英國Biox公司）測試皮膚屏障功能；皮膚水份測試儀Corneometer?CM825（德國Courage+Khazaka公司）測試皮膚角質(zhì)層含水量；散斑血流實時成像系統(tǒng)Moor FLPITM（英國Moor Instrument公司）測試面部血流速度；感覺神經(jīng)定量檢測儀Neurometer?CPT（美國Neurotron公司）測試皮膚神經(jīng)敏感性。

（3）乳酸刺痛試驗：僅在基礎(chǔ)值和產(chǎn)品使用4周進(jìn)行測試。刺痛評分和總感覺評分計算公式分別如下：刺痛評分=2.5 min+5 min乳酸側(cè)刺痛評分-（2.5min+5min蒸餾水側(cè)刺痛評分）；總感覺評分=30 s+2.5 min+5 min乳酸側(cè)所有感覺評分-（30 s+2.5 min+5 min蒸餾水側(cè)所有感覺評分）。

表1 面霜①組各時點感覺評分[總和，中位數(shù)（最小值，最大值）]

表2 面霜②組各時點感覺評分[總和，中位數(shù)（最小值，最大值）]

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 19.0 for Windows進(jìn)行統(tǒng)計分析。計算各時點檢測數(shù)值的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，計算各時點檢測數(shù)值與基礎(chǔ)值的差值，對計量數(shù)據(jù)自身前后及樣品間比較用配對t檢驗和單因素方差分析；對非參數(shù)資料采用Wilcoxon Signed Ranks Test檢驗配對資料。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 敏感性皮膚安全性評價

2.1.1 單次使用感覺試驗面霜①測試結(jié)果見表1。面霜①在使用30 s時出現(xiàn)的刺痛感和感覺總分顯著高于蒸餾水（P＜0.05），其余時點和感覺與蒸餾水相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。面霜②測試結(jié)果見表2。面霜②在使用5 min和10 min出現(xiàn)的瘙癢感、刺痛感和感覺總分均顯著高于蒸餾水（P＜0.05），其余時點和感覺與蒸餾水相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），提示面霜②對皮膚有一定刺激。

2.1.2 長期使用安全性評價試驗使用面霜①2周和4周后紅斑與基礎(chǔ)值相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），脫屑在使用4周后顯著低于基礎(chǔ)值（P＜0.05）。使用面霜②2周和4周后與基礎(chǔ)值相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 臨床評估[總和，中位數(shù)（最小值，最大值）]

2.2 敏感性皮膚功效性評價

2.2.1 皮膚屏障功能受試者在使用面霜①2周和4周后的皮膚經(jīng)表皮失水率顯著低于基礎(chǔ)值（P＜0.05）；使用面霜②4周后經(jīng)表皮失水率顯著低于基礎(chǔ)值（P＜0.05）。受試者在使用兩種面霜2周和4周后皮膚角質(zhì)層含水量均顯著高于基礎(chǔ)值（P＜0.05）。提示2種面霜均可以改善皮膚屏障功能，見圖1。

2.2.2 皮膚血流速度受試者在使用面霜①2周和4周后皮膚面頰部血流速度顯著低于基礎(chǔ)值（P＜0.05）；使用面霜②4周后面頰部血流速度顯著低于基礎(chǔ)值（P＜0.05）。提示2種面霜均可改善面部血流狀況，見圖2。

圖1 皮膚經(jīng)表皮失水率和角質(zhì)層含水量的變化

圖2 皮膚各時點的血流實時成像圖示與統(tǒng)計

圖3 皮膚各時點的3種頻率下感覺神經(jīng)閾值

2.2.3 皮膚神經(jīng)敏感性受試者在使用2種面霜2周和4周后皮膚鼻唇溝旁3種頻率下的感覺神經(jīng)閾值與基礎(chǔ)值相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見圖3。由于神經(jīng)敏感性是敏感性皮膚的一種亞型，通過計算使用產(chǎn)品后受試者神經(jīng)敏感性的改善率，發(fā)現(xiàn)2種面霜均可改善30%以上受試者的神經(jīng)敏感性，見表4。

表4 皮膚各時點的3種頻率下神經(jīng)敏感性的改善率（%）

2.2.4 乳酸試驗評分受試者在使用面霜①4周后在乳酸刺痛評分和總感覺評分均顯著低于基礎(chǔ)值（P＜0.05）；使用面霜②4周后刺痛評分與基礎(chǔ)值相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），總感覺評分顯著低于基礎(chǔ)值（P＜0.05），提示2種面霜均可改善皮膚耐受性，見表5。

3 討論

敏感性皮膚是指皮膚對于外界環(huán)境因素易產(chǎn)生高反應(yīng)性的狀態(tài)，通常表現(xiàn)為主觀和客觀癥狀，如瘙癢、刺痛、紅斑、丘疹、干燥等[3]?；诿舾行云つw這一特殊皮膚狀態(tài)，研究開發(fā)的相關(guān)敏感性皮膚化妝品，一方面需要減少可能引起皮膚刺激的成分，另一方面則添加促進(jìn)皮膚屏障修復(fù)、抑制炎癥反應(yīng)和神經(jīng)敏感性等有效成分，如保濕劑[8]、植物提取物[9]、透明質(zhì)酸[10]、TRPV1拮抗劑和抗炎因子[11]等，從而能夠安全且有效的應(yīng)用于敏感性皮膚消費者。然而目前關(guān)于敏感性皮膚化妝品適用性的評價方法尚待完善。

表5 皮膚各時點的刺痛評分和總感覺評分（x±s）

本次研究基于敏感性皮膚的發(fā)病機(jī)制和臨床表現(xiàn)，結(jié)合以往敏感性化妝品的檢測方法，綜合運用主客觀評價結(jié)合的方式，對2種敏感性皮膚用面霜的安全性和功效行進(jìn)行研究。在單次使用感覺測試中，面霜①在使用30 s出現(xiàn)刺痛感，可能是由于皮膚溫度高于產(chǎn)品膏體溫度的適應(yīng)過程中產(chǎn)生的一過性感覺。而面霜②在使用5 min和10 min出現(xiàn)的瘙癢感、刺痛感和感覺總分均顯著高于對照品，提示面霜②對皮膚具有一定刺激性。因此單次感覺試驗可初步評價化妝品對面部敏感性皮膚的反應(yīng)性。在4周長期使用試驗中，通過臨床評估觀察到2組受試者在基礎(chǔ)值時面部均有紅斑和脫屑，使用面霜①的受試者面部脫屑情況在使用4周后顯著改善，提示2種面霜長時間使用均具有較高的安全性，且面霜①可以改善皮膚干燥。因此4周試用試驗可評價敏感性皮膚長期使用化妝品的安全性。

本次研究通過無創(chuàng)儀器測試發(fā)現(xiàn)，2種面霜均可以降低經(jīng)表皮失水率，增加角質(zhì)層含水量，降低面部血流速度，提示其能有效提高皮膚屏障功能。在感覺神經(jīng)閾值檢測中，2種面霜使用前后皮膚鼻唇溝旁3種頻率下的感覺神經(jīng)閾值差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這可能由于神經(jīng)敏感性是敏感性皮膚的一種亞型[12]，計算整體人群的均值不能夠反應(yīng)改善情況。因此筆者計算使用產(chǎn)品后受試者神經(jīng)敏感性的改善率，發(fā)現(xiàn)2種面霜均可改善30%以上受試者的神經(jīng)敏感性。此外，乳酸刺痛試驗結(jié)果顯示2組面霜使用后刺痛評分均顯著降低，提示其可以提高皮膚對刺激的耐受性。因此，通過上述測試可以觀察產(chǎn)品使用前后敏感性皮膚生理狀況和耐受性的改善情況。

綜上所述，本研究從敏感性皮膚的病因?qū)W出發(fā)，通過結(jié)合主客觀評價的方法，可以較為全面、科學(xué)地評價敏感性皮膚化妝品的適用性。

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