肖艷紅 張曉敏 郭夢南 徐 倩 劉 楠 周曉慧

(承德醫(yī)學院，河北 承德 067000)

牛肝菌俗稱“大腳菇”，是一種稀有、名貴的野生食用真菌，因其外形似牛肝而得名，美味可口，營養(yǎng)豐富,宴席上的極品；現(xiàn)在日本又被稱為“植物性食品的頂峰”〔1，2〕?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)該菌所含生物堿可以治療腰腿疼痛、手足麻木、四肢抽搐與婦女白帶異常等癥狀〔3，4〕。近年研究表明牛肝菌具有諸多生理活性，如抗氧化、抗腫瘤、抗疲勞、抗衰老、提高免疫力等〔5～9〕，但關(guān)于牛肝菌多糖對血糖的影響少有報道。本實驗采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)聯(lián)合鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射法構(gòu)建2型糖尿病(T2DM)大鼠模型〔10〕，實施牛肝菌多糖干預(yù)后，對其降糖降脂作用進行研究。

1 材料與方法

1.1動物、飼料、試劑 健康清潔級Wistar大鼠40只，雄性，體重180～200 g，12周齡，由北京華阜康科技股份有限公司提供。動物合格證號為SCXK(京)2009-0008。飼養(yǎng)于承德醫(yī)學院實驗動物中心，自由攝食水，室溫20℃～22℃，自然采光，通風良好。大鼠標準飼料及高脂高糖飼料由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供，其中高脂高糖飼料的配方為：豬油10%、蛋黃粉8%、膽固醇1.5%、蔗糖20%、膽酸鈉0.1%、標準飼料60.4%。牛肝菌多糖由承德醫(yī)學院生物化學教研室制備；STZ(美國Sigma公司，100 mg/瓶，批號031M1287V)用時溶解于0.1 mol/L(pH=4.3)檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中，現(xiàn)用現(xiàn)配；鹽酸二甲雙胍(中美上海施貴寶制藥有限公司，0.5 g/片，批號1311123)；血糖儀及配套試紙(三諾生物傳感股份有限公司)。

1.2方法

1.2.1動物造模 大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w，然后給予高脂高糖飼料，為期4 w。后禁食12 h，一次性腹腔注射35 mg/kg STZ，72 h后檢測空腹血糖含量。以空腹血糖(FPG)≥16.7 mmol/L范圍內(nèi)的動物為成功T2DM模型。

1.2.2動物分組及給藥 取40只大鼠，隨機分為正常組、模型組、牛肝菌多糖低劑量組、牛肝菌多糖高劑量組和二甲雙胍組，每組8只。標準飼料正常飼養(yǎng)1 w后，模型組及各給藥組造模；正常組繼續(xù)給予標準飼料后注射同等劑量的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。72 h后經(jīng)內(nèi)眥于眶后靜脈叢采血，測FPG≥16.7 mmol/L為造模成功。各組分籠飼養(yǎng)，正常組與模型組給予生理鹽水灌胃，牛肝菌多糖低、高劑量組給予牛肝菌多糖(0.2 g/kg、0.4 g/kg)，二甲雙胍組給予二甲雙胍(0.2 g/kg)，1次/d，連續(xù)給藥4 w。

1.2.3指標檢測 在給藥期間第7、14、21、28天稱量各組大鼠體重；給藥前及末次給藥后各組大鼠內(nèi)眥于眶后靜脈叢采血，檢測血清葡萄糖(GLU)的含量；末次給藥后各組大鼠內(nèi)眥于眶后靜脈叢采血，檢測血清三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量。

1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0軟件進行方差分析及q檢驗。

2 結(jié) 果

2.1牛肝菌多糖對T2DM大鼠GLU的影響 給藥前各造模組GLU含量均≥16.7 mmol/L，且高于正常組(P<0.01)，說明造模成功。與給藥前比較，給藥28 d后牛肝菌多糖低、高劑量組與二甲雙胍組GLU水平均大幅下降P<0.01)。給藥28 d后，給藥組GLU含量顯著低于模型組(P<0.05)；牛肝菌多糖高劑量組與二甲雙胍組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2牛肝菌多糖對T2DM大鼠體重的影響 模型組的大鼠在7～28 d內(nèi)的體重呈下降趨勢，且顯著低于正常組(P<0.01)；并觀察到出現(xiàn)明顯的“三多一少”病癥，飲水、飲食次數(shù)增加，伴有多尿現(xiàn)象，表明造模成功。在7～28 d內(nèi)牛肝菌多糖低劑量組、高劑量組及二甲雙胍組大鼠體重呈緩慢增長趨勢，且顯著高于模型組(P<0.01)；其中，牛肝菌多糖高劑量組與二甲雙胍組體重增長趨勢差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表2。

2.3牛肝菌多糖對T2DM大鼠血脂含量的影響 與正常組比較，模型組TG、TC、LDL-C的含量明顯升高； HDL-C的含量明顯降低(P<0.01)。牛肝菌多糖低劑量組、高劑量組及二甲雙胍組TG、TC、LDL-C的含量顯著低于模型組；HDL-C含量顯著高于模型組(P<0.01)。與二甲雙胍組比較，牛肝菌多糖高劑量組TG、TC的含量更低，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表1 牛肝菌多糖對大鼠GLU的影響

與正常組比較：1)P<0.01；與本組給藥前比較：2)P<0.01；與同時點模型組比較：3)P<0.05

表2 牛肝菌多糖對T2DM大鼠體重及血脂的影響

3 討 論

T2DM基本病理特點為胰島素絕對和相對不足或外周組織對胰島素的敏感性下降，引起糖代謝紊亂為主，包括脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂的一種全身性疾病。隨著病程的發(fā)展，可以導(dǎo)致多組織、多器官的慢性進行性并發(fā)癥。據(jù)報道，STZ與其他藥物相比，殺傷胰島β細胞的能力更強且具有特異性，對肝、腎等臟器的損害更小〔11，12〕。因此本研究應(yīng)用高脂高糖飼料喂養(yǎng)大鼠4 w，再給予STZ注射，破壞大鼠胰島β細胞的功能，從而導(dǎo)致T2DM〔13〕。除了血糖升高、體重下降等明顯的病癥以外，糖尿病的臨床表現(xiàn)還有許多其他指標。本實驗表明，牛肝菌多糖干預(yù)T2DM大鼠后，能夠極大地降低其血糖水平；并使其體重緩慢增長；同時通過降低TG、TC、LDL-C的含量，提升HDL-C的含量對血糖血脂代謝的紊亂起抑制作用。尤其高劑量牛肝菌多糖更能降低T2DM大鼠的TG、TC水平。

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10肖艷紅，谷佳琦，楊曄娟，等.高脂高糖飼料聯(lián)合STZ誘導(dǎo)2型糖尿病大鼠模型STZ最佳劑量探討〔J〕.承德醫(yī)學院學報，2015；32(5)：376-8.

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12Szkudelski T.The mechanism of alloxan and streptozotocin action in B cells of the rat pancreas〔J〕.Physiol Res,2001；50(6):537-46.

13Rakieten N,Rakieten ML,Nadkarni MR.Studies on the diabetogenic action of streptozotocin(NSC-37917)〔J〕.Cancer Chemother Rep,1963；29(1):91-8.