蔣麗云 楊蘭生 周珊珊 陳耀章 何津春

(蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000)

柳茶是藏族民間用于治療消化不良等疾病的藥材，是薔薇科植物窄葉鮮卑花Sibiraea angustata(Rehd.) Hand-Mazz和鮮卑花Sibiraea Laevigata(L.) Maxim的枝葉，屬高山植物，生長(zhǎng)于3 000～4 000 m海拔的地方，多分布于青海、甘肅、云南、四川等地；本文將近幾年對(duì)柳茶的化學(xué)成分及在降脂、降糖藥理作用方面的新進(jìn)展做一綜述。

1 化學(xué)成分

柳茶的化學(xué)成分主要由異阿魏酸、槲皮素、金絲桃苷、蘆丁、兒茶素、香草酸等組成(見(jiàn)表1〔1～5〕)。其結(jié)構(gòu)式和分子式見(jiàn)圖1。

2 藥理作用

2.1降脂作用 通過(guò)建立高脂飲食的肥胖大鼠模型，用柳茶水提物治療8 w后發(fā)現(xiàn)，其血清中的總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)均降低〔6〕。姚莉等〔7〕通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)柳茶可以明顯降低實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血清TC、TG、LDL-C含量，提高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量。孫雯雯等〔8〕通過(guò)觀察高膽固醇血癥在阿爾茨海默病(AD)發(fā)生中的作用及柳茶提取物的療效發(fā)現(xiàn)，柳茶提取物可明顯降低AD動(dòng)物血和腦中膽固醇含量，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Apoe和CYP46a1 mRNA 的表達(dá)有關(guān)。

柳茶降脂作用在信號(hào)通路水平上的研究發(fā)現(xiàn)，柳茶不僅能增加動(dòng)物體內(nèi)脂聯(lián)素(Adiponectin)含量，從而加強(qiáng)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPARγ)活性，其中PPARγ具有調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄，參與脂類代謝和增加脂肪細(xì)胞膜上胰島素受體抑制脂肪細(xì)胞肥大的作用；而且適當(dāng)劑量的柳茶可以使腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)基因表達(dá)上調(diào)，從而干擾脂肪合成，其中AMPK可以增加脂肪酸氧化、胰島素敏感性，抑制脂肪合成，脂聯(lián)素通過(guò)與脂聯(lián)素受體結(jié)合，進(jìn)而活化AMPK，使AMPK發(fā)揮生物學(xué)作用〔9〕。

柳茶的降脂作用還可能與槲皮素及其糖苷衍生物的作用有密切關(guān)系。為研究槲皮素對(duì)脂質(zhì)代謝的影響，Elise等〔10〕建立實(shí)驗(yàn)組小鼠接受輕度高脂肪飲食，并對(duì)其使用槲皮素12 w喂養(yǎng)，使用氣相色譜和1H核磁共振用于定量測(cè)量血清脂質(zhì)譜，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在槲皮素喂養(yǎng)小鼠的血清中，TG降低14%(P<0.001)，總多不飽和脂肪酸增加13%(P<0.01)。在基因水平上，細(xì)胞色素P450(Cyp)4a10，Cyp4a14，Cyp4a31和Acyl-CoA硫酯酶3的上調(diào)，提示槲皮素?cái)z入可以降低相應(yīng)的循環(huán)脂質(zhì)水平。Jung等〔11〕為了解槲皮素對(duì)高脂血癥生理作用的影響，通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與僅喂食高脂飲食的小鼠相比,槲皮素顯著降低了高脂飲食誘導(dǎo)的血清脂質(zhì)增加，包括TC、TG。Ying等〔12〕用高脂肪飲食喂養(yǎng)小鼠，以高劑量(30～60 mg/kg)的槲皮素口服給予高脂血癥大鼠14 d，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)槲皮素可以降低血清TC、TG和LDL-C水平，并且可以通過(guò)調(diào)節(jié)Sirt1，核因子(NF)-κB p65和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的表達(dá)來(lái)減少肝細(xì)胞中的脂質(zhì)積累，降低血清促細(xì)胞因子腫瘤壞死因子(TNF)-α和白細(xì)胞介素(IL)-6水平。Vidyashankar等〔13〕通過(guò)在培養(yǎng)基中誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞脂肪肝狀態(tài)發(fā)現(xiàn)，槲皮素的量增加3.05倍，TG含量可降低45%，并且可有效增加胰島素介導(dǎo)的葡萄糖攝取2.65倍，細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽含量增加2.0倍。另外槲皮素(10 μmol/L)可分別將TNF-α和IL-8分別降低了59.74%和41.11%，抑制了50.5%的脂質(zhì)過(guò)氧化物的產(chǎn)生。RT-PCR結(jié)果證實(shí)槲皮素(10 μmol/L)可以抑制TNF-α基因表達(dá)。在槲皮素作用下，超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性分別提高1.68,2.19和1.71倍，白蛋白和尿素含量增加，而丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性顯著下降。因此，槲皮素可以通過(guò)在HepG2細(xì)胞中降低TG積累，胰島素抵抗，炎性細(xì)胞因子分泌等有效的逆轉(zhuǎn)非酒精性脂肪性肝病癥狀。Jeong等〔14〕建立2型糖尿病小鼠模型研究槲皮素對(duì)2型糖尿病的影響，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)0.08%槲皮素可以提高小鼠血漿脂聯(lián)素和HDL-C含量，增加肝臟解毒過(guò)程中重要的酶活力，降低血漿TC和血漿TG的含量。Gui〔15〕等發(fā)現(xiàn)槲皮素可以提高體內(nèi)反向膽固醇運(yùn)輸作用，反向膽固醇運(yùn)輸作用在細(xì)胞膽固醇的輸出發(fā)揮重要的作用，故槲皮素可以進(jìn)一步發(fā)揮降脂作用。另外，蘆丁作為槲皮素的二糖苷衍生物也可以上調(diào)與脂肪酸氧化相關(guān)基因以及胞質(zhì)中TG水解酶基因的表達(dá)，從而促進(jìn)脂肪的分解代謝〔16〕。

表1 柳茶的化學(xué)成分

“※”表示暫未查到其英文名稱，“△”表示暫未查到其中文名稱

圖1 柳茶主要化合物的結(jié)構(gòu)式和分子式

2.2降糖作用 四氧嘧啶作為一種胰島β細(xì)胞特異性毒素，常被用于誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性糖尿病模型〔17〕。有研究〔18〕通過(guò)對(duì)柳茶作用于四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖、糖耐量的觀察，得出中低劑量柳茶水提物可以明顯降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖，并且發(fā)現(xiàn)柳茶對(duì)血糖正常小鼠沒(méi)有影響。柳茶的降糖作用還需要細(xì)胞和分子水平的證實(shí),探討其作用機(jī)制。

從柳茶的化學(xué)成分分析其降糖作用發(fā)現(xiàn)，槲皮素(1%) 飼喂糖尿病大鼠后，大鼠空腹血糖顯著降低，并且大鼠小腸及腎臟中麥芽糖酶和蔗糖酶活性顯著降低〔19〕。Haddad等〔20〕用槲皮素(50 μmol/L)處理L6骨骼肌細(xì)胞、鼠H4IIE和人類HepG2肝細(xì)胞18 h發(fā)現(xiàn)槲皮素可以誘導(dǎo)肝AMPK激活，AMPK是全身能量穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)器，在骨骼肌中通過(guò)刺激激活A(yù)MPK來(lái)增加葡萄糖攝取的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體GLUT4易位到質(zhì)膜，在肝臟中AMPK主要通過(guò)下調(diào)糖異生過(guò)程中的關(guān)鍵酶(例如磷酸烯醇丙酮酸羧化酶和葡萄糖-6-磷酸)來(lái)減少糖的產(chǎn)生；另一方面，槲皮素可以通過(guò)增加糖原合成的限速酶在HepG2肝細(xì)胞中的活性來(lái)增加糖原的合成。所以，槲皮素似乎是治療2型糖尿病的候選。Youl等〔21〕使用INS-1β細(xì)胞系，測(cè)定槲皮素對(duì)葡萄糖或格列本脲誘導(dǎo)的胰島素分泌和由過(guò)氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的β細(xì)胞功能障礙的影響。這些作用與細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)1/2途徑的激活一起分析。用已知表現(xiàn)出抗糖尿病性質(zhì)的抗氧化劑(N-乙酰基-L-半胱氨酸和白藜蘆醇)作比較。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，槲皮素(20 μmol/L)增強(qiáng)葡萄糖(8.3 mmol/L)和格列本脲(0.01 μmol/L)誘導(dǎo)的胰島素分泌和ERK1/2磷酸化。ERK1/2(但不是蛋白激酶A)信號(hào)通路在葡萄糖誘導(dǎo)的槲皮素胰島素分泌增強(qiáng)中起關(guān)鍵作用。另外，槲皮素(20 μmol/L)保護(hù)β-細(xì)胞功能和50 μmol/L H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷活性，誘導(dǎo)ERK1/2的主要磷酸化，在相同的條件下，白藜蘆醇或N-乙?；?L-半胱氨酸是無(wú)效的。因此，槲皮素可以增強(qiáng)葡萄糖和格列本脲誘導(dǎo)的胰島素分泌，保護(hù)β細(xì)胞免受氧化損傷。另外，通過(guò)蘆丁、槲皮素對(duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制研究發(fā)現(xiàn)，蘆丁和槲皮素可以對(duì)α-葡萄糖苷酶活性有抑制作用，提示蘆丁和槲皮素都有降血糖的作用〔22〕。槲皮素作為柳茶的化學(xué)成分之一，說(shuō)明柳茶的降糖作用與槲皮素、蘆丁都有很大的關(guān)系。

綜上所述，柳茶可以降低血脂、降低血糖，這些研究都是在動(dòng)物模型上進(jìn)行，柳茶在人體的應(yīng)用尚沒(méi)有報(bào)道。高血糖、高脂血癥是引起心血管疾病的重要因素，防治高血糖、高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化防治的重要環(huán)節(jié)，所以研究柳茶對(duì)人體的降脂、降糖作用是具有重要意義的。

3 柳茶的研究情況及前景展望

3.1關(guān)注度 從圖2可以看出，柳茶的文獻(xiàn)被引量從2008年開(kāi)始顯著增多，但是柳茶的環(huán)比增長(zhǎng)率呈平穩(wěn)的趨勢(shì)，說(shuō)明對(duì)柳茶的關(guān)注度越來(lái)越高，對(duì)柳茶的研究也有很大的前景和價(jià)值。

3.2柳茶研究機(jī)構(gòu)排名 從圖3可以看出，蘭州大學(xué)、蘭州醫(yī)學(xué)院、四川大學(xué)、蘭州大學(xué)第二醫(yī)院和蘭州大學(xué)第一醫(yī)院對(duì)柳茶的研究最多。從2004年開(kāi)始，蘭州醫(yī)學(xué)院合并到蘭州大學(xué)，所以，柳茶研究在國(guó)內(nèi)最多的是蘭州大學(xué)和四川大學(xué)。

圖2 柳茶近10年的關(guān)注度

圖3 柳茶研究機(jī)構(gòu)排名

總之，柳茶作為西部地區(qū)的特有藏藥，最近幾年的研究越來(lái)越多，另外，柳茶口感適宜，價(jià)格適中，可以作為一種保健品日常飲用，因此，可以將柳茶的降脂、降糖作用作為突破點(diǎn)，在這方面進(jìn)行持續(xù)研發(fā)，將研究機(jī)構(gòu)、相關(guān)上下游企業(yè)、資金等各方密切聯(lián)系，將應(yīng)用研究快速轉(zhuǎn)換為產(chǎn)品開(kāi)放，這樣可以讓科研成果快速轉(zhuǎn)化為現(xiàn)實(shí)的生產(chǎn)力。

1閆志慧，陳立書(shū)，朱仝飛，等.藏藥柳茶葉乙醇水提取物中化學(xué)成分的鑒定〔J〕.應(yīng)用化學(xué)學(xué)報(bào),2014;31(2):237-41.

2于民豐，邵 赟，陶燕鐸.藏藥鮮卑花化學(xué)成分研究〔J〕.中草藥,2014;45(24):3528-31.

3王章偉，徐向紅，陳笑天，等.窄葉鮮卑花地上部分化學(xué)成分研究〔J〕.中藥材,2014;37(1):57-60.

4Wang ZW,Li B,Yu SS,etal.Eight New Monoterpene Acylglucosides from Sibiraea angustata〔J〕.Phytochem Lett,2013;6(3):461-6.

5Deng Y,Zhao JQ,Mei LJ,etal.Two new monoterpenes from Sibiraea laevigata〔J〕.J Asian Nat Prod Res,2016;21:1-7.

6王佳冰，柴成奎，陳 平，等.藏藥柳茶提取物對(duì)單純性肥胖大鼠脂質(zhì)代謝的影響〔J〕.中藥新藥與臨床藥理,2010;21(2):148-9.

7姚 莉，焦海勝，李曉強(qiáng).柳茶對(duì)高脂血癥大鼠血脂、超氧化物歧化酶及丙二醛的影響〔J〕.蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2010;36(2):68-70.

8孫雯雯，頡賓芳，劉 卉，等.高膽固醇血癥在阿爾茲海默病發(fā)生中的作用及藏藥柳茶提取物的治療效應(yīng)〔J〕.中藥材,2012;35(4):596-602.

9夏 苗，王晶宇，馬曉燕，等.藏藥柳茶提取物調(diào)節(jié)肥胖大鼠脂代謝的作用機(jī)制研究〔J〕.中藥材，2011;34(6):922-6.

10Elise F,van den Hil H,Keijer J,etal.Quercetin Induces Hepatic Lipid Omega-Oxidation and Lowers Serum Lipid Levels in Mice〔J〕.PLoS One,2013;8(1):e51588.

11Jung CH,Cho I,Ahn J,etal.Quercetin reduces high-fat diet-induced fat accumulation in the liver by regulating lipid metabolism genes〔J〕.Phytother Res,2013;27(1):139-43.

12Ying HZ,Liu YH,Yu B,etal.Dietary quercetin ameliorates nonalcoholic steatohepatitis induced by a high-fat diet in gerbils〔J〕.Food Chem Toxicol,2013;52:53-60.

13Vidyashankar S,Sandeep Varma R,Patki PS,etal.Quercetin ameliorate insulin resistance and p-regulates cellular antioxidants during oleic acid induced hepatic steatosis in HepG2 cells〔J〕.Toxicol Vitro,2013;27(2):945-53.

14Jeong SM,Kang MJ,Choi HN,etal.Quercetin ameliorates hyperglycemia and dyslipidemia and improves antioxidant status in type 2 diabetic db/db mice〔J〕.Nutr Res Practice,2012;6(3):201-7.

15Cui Y,Hou P,Li F,etal.Quercetin improves macrophage reverse cholesterol transport in apolipoprotein E-deficient mice fed a high-fat diet〔J〕.Lipids Health Dis,2017;14;16(1):9.

16Liu HW，Tsai YT，Chang SJ.Toona sinensis leaf extract inhib-its lipid accumulation through up-regulation of genes involved in lipolysis and fatty acid oxidation in adipocytes〔J〕.J Agric Food Chem,2014;62(25):5887.

17Rosillo MA,Sanchez-Hidalgo M,Cardeno A,etal.Protective effect of ellagic acid,a natural polyphenolic compound,in a murine model of Crohn′s disease〔J〕.Biochem Pharmacol,2011;82:737-45.

18衛(wèi)陽(yáng)飛，楊永建，李建銀，等.藏藥柳茶提取物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠降糖作用的研究〔J〕.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011;22(10):2460-1.

19Ramachandra R，Shetty AK，Salimath PV.Quercetin alleviates activities of intestinal and renal disaccharidases in streptozotocin-induced diabetic rats〔J〕.Mol Nutr Food Res，2005;49(4):355.

20Haddad P,Eid H,Nachar A,etal.The molecular basis of the antidiabetic action of quercetin in cultured skeletal muscle cells and hepatocytes〔J〕.Pharmacognosy Magazine,2015;11(41):74.

21Youl E,Bardy G,Magous R,etal.Quercetin potentiates insulin secretion and protects INS-1 pancreatic β-cells against oxidative damage via the ERK1/2 pathway〔J〕.Br J Pharmacol,2010;161(4):799-814.

22王斯慧，黃琬凌，陳慶松，等.蘆丁、槲皮素對(duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制研究〔J〕.中國(guó)釀造,2012;31(1):133-5.