胡振波 裴學(xué)軍 肖 飛 趙 剛

(健民藥業(yè)集團(tuán)兒童藥物研究院，武漢，430052)

貧血是影響各種社會(huì)和社會(huì)經(jīng)濟(jì)階層的最重要的營(yíng)養(yǎng)缺乏性疾病之一[1-2]。眾所周知，貧血有許多種病因，其中缺鐵性貧血是最重要的貧血類(lèi)型之一。在許多發(fā)展中國(guó)家，缺鐵性貧血已經(jīng)成為了兒童和育齡婦女人群中中度/嚴(yán)重的公共健康問(wèn)題[3]。其中，學(xué)齡前兒童和育齡婦女人群成為貧血的最大受害者[4-5]。然而，如今已有許多產(chǎn)品被用于治療這些疾病，尤其在我國(guó)，除了化學(xué)藥以外，中藥在治療缺鐵性貧血方面也表現(xiàn)出了很好的療效[6-7]。另一方面，中西復(fù)方制劑也被證實(shí)具有確切的治療缺鐵性貧血效果，健脾生血顆粒和健脾生血片則是這類(lèi)缺鐵性貧血治療產(chǎn)品的典型代表[8-9]。

健脾生血顆粒是健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司開(kāi)發(fā)的治療缺鐵性貧血的3類(lèi)新藥，具有穩(wěn)定而快速的生血作用，主要成分有黨參、茯苓、白術(shù)、甘草、黃芪、山藥、雞內(nèi)金、龜甲、麥冬、南五味子、牡蠣、大棗、硫酸亞鐵等。臨床常用于妊娠期婦女、小兒以及成人缺鐵性貧血的治療，尤其是脾胃虛弱及心脾兩虛、氣血兩虛型貧血。

健脾生血顆粒多年的臨床應(yīng)用情況調(diào)研顯示，該產(chǎn)品在婦產(chǎn)科應(yīng)用非常廣泛。眾所周知，妊娠期婦女需要補(bǔ)充足夠的鐵來(lái)維持胎兒的健康生長(zhǎng)與發(fā)育，當(dāng)鐵攝入不足時(shí)，孕婦會(huì)出現(xiàn)系列鐵缺乏/貧血癥狀[10]。為了在補(bǔ)充鐵元素的基礎(chǔ)上，改善伴隨的脾虛癥狀，增進(jìn)食欲，臨床醫(yī)生往往會(huì)選擇健脾生血顆粒/片來(lái)進(jìn)行治療。經(jīng)過(guò)治療后，多數(shù)患者癥狀將得到改善，血紅蛋白含量迅速恢復(fù)正常，效果明顯。然而近年來(lái)，妊娠期婦女在應(yīng)用中成藥時(shí)產(chǎn)生不良反應(yīng)的情況使臨床醫(yī)生在處方過(guò)程中變得警覺(jué)，尤其是患者在無(wú)醫(yī)生監(jiān)督的自我藥療過(guò)程中更為突出[10-11]?；加腥辫F性貧血的妊娠期婦女人群應(yīng)用健脾生血顆粒治療時(shí)的安全性更受重視，為此，本文將重點(diǎn)針對(duì)該產(chǎn)品的生殖毒性及臨床應(yīng)用安全性研究進(jìn)行解析。

1 對(duì)大鼠生育力與早期胚胎發(fā)育的影響

迄今，關(guān)于中藥對(duì)動(dòng)物生育力與早期胚胎發(fā)育毒性的研究非常有限。例如Singla N等[12]發(fā)現(xiàn)，連續(xù)5 d給予大鼠0.2%雷公藤甲素灌胃可明顯降低雄性黑鼠附睪液中精子活力和存活率。關(guān)于中西復(fù)方的這類(lèi)研究則更少，并且，關(guān)于硫酸亞鐵對(duì)動(dòng)物生育力與早期胚胎發(fā)育的影響尚無(wú)報(bào)道。因此，我們首次對(duì)中西復(fù)方健脾生血顆粒的生育力與早期胚胎發(fā)育毒性進(jìn)行了研究[13]。在這項(xiàng)研究中，4組大鼠(灌胃0、1.16、3.48、5.80 g/(kg·d)分別作為陰性對(duì)照組、低、中、高劑量實(shí)驗(yàn)組)被用來(lái)考察經(jīng)健脾生血顆粒給藥后的安全性情況。結(jié)果表明，健脾生血顆粒對(duì)睪丸、附睪及精子數(shù)量等均無(wú)明顯毒性作用。各觀(guān)察組各項(xiàng)生育指標(biāo)與陰性對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這一結(jié)果表明，健脾生血顆粒中的中藥成分、硫酸亞鐵及維生素C等對(duì)于大鼠生育力均無(wú)影響。Bansal AK等[14]研究了硫酸亞鐵和維生素C對(duì)雜交公牛精子的運(yùn)動(dòng)能力、生育力及脂質(zhì)過(guò)氧化作用的影響。他們發(fā)現(xiàn)不同劑量的亞鐵鹽會(huì)導(dǎo)致不同的效果。硫酸亞鐵：抗壞血酸比例為150 μmol/L:750 μmol/L時(shí)被認(rèn)為是最優(yōu)劑量，因?yàn)樵摫壤乃幬锟珊艽蟪潭鹊卣T導(dǎo)氧化應(yīng)激/脂質(zhì)過(guò)氧化，并較好地維持精子的活力和生殖力。而我們的研究結(jié)果表明，健脾生血顆粒中2∶1的硫酸亞鐵/維生素C對(duì)大鼠睪丸、附睪及精子數(shù)也無(wú)影響。

此外，該項(xiàng)研究結(jié)果還顯示，所有實(shí)驗(yàn)組藥物對(duì)大鼠早期胚胎的形成均無(wú)影響。然而，我們還發(fā)現(xiàn)關(guān)于胚胎著床數(shù)、胚胎種植率和存活胎數(shù)，中劑量組(P<0.05)和高劑量組(P<0.01)均顯著高于陰性對(duì)照組。這一結(jié)果提示，健脾生血顆粒可能具有促進(jìn)胚胎著床和胎兒存活率的作用，值得進(jìn)一步設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)予以驗(yàn)證。該項(xiàng)研究得出結(jié)論，給予大鼠灌胃健脾生血顆粒5.80 g/(kg·d)以下劑量時(shí)，未出現(xiàn)生育力與早期胚胎發(fā)育的毒性情況。

2 對(duì)胚胎-胎仔發(fā)育的影響

胚胎-胎仔發(fā)育毒性試驗(yàn)作為生殖毒性評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容，考察了妊娠動(dòng)物自胚胎著床至硬腭閉合期間接觸受試物，評(píng)價(jià)外源物質(zhì)對(duì)妊娠動(dòng)物、胚胎及胎仔發(fā)育的影響，目的是預(yù)測(cè)受試物可能產(chǎn)生的對(duì)生殖細(xì)胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等親代生殖功能的不良影響，以及對(duì)子代胚胎、胎兒發(fā)育、出生后發(fā)育的不良影響。該試驗(yàn)是3段生殖毒性試驗(yàn)中的致畸敏感期毒性試驗(yàn)，其所導(dǎo)致的毒性后果相對(duì)其他階段更為嚴(yán)重，對(duì)結(jié)果的判定更為重要[15]。為此，湖北省食品藥品安全評(píng)價(jià)中心開(kāi)展了健脾生血顆粒對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性的研究[16]。受試大鼠分別于孕期第6～15天連續(xù)灌胃給藥(灌胃0、1.16、3.48、10.44 g/(kg·d)分別作為陰性對(duì)照組、低、中、高劑量實(shí)驗(yàn)組，陽(yáng)性對(duì)照組灌胃維生素A醋酸酯0.08 g/(kg·d))。結(jié)果表明，各觀(guān)察組均未見(jiàn)明顯異常臨床癥狀，受試藥物對(duì)胚胎的形成均無(wú)明顯影響，且黃體數(shù)、植入數(shù)、死胎、活胎以及吸收胎與陰性對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。雖然該項(xiàng)研究未見(jiàn)健脾生血顆粒的胚胎-胎仔發(fā)育毒性情況，但高劑量的受試藥物對(duì)親代大鼠胃腸道有一定刺激作用，導(dǎo)致大鼠食量減少，原因可能是大劑量的硫酸亞鐵直接刺激胃腸道所致，該試驗(yàn)中高劑量組給藥量相當(dāng)于臨床最大用量的126倍。并且有研究提示，給予小劑量的硫酸亞鐵對(duì)于治療缺鐵性貧血效果很好，胃腸道反應(yīng)輕，值得臨床推廣應(yīng)用[17]。

3 圍產(chǎn)期毒性情況

在大鼠生殖毒性試驗(yàn)研究過(guò)程中，圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)給藥周期最長(zhǎng)，觀(guān)察時(shí)間和研究指標(biāo)最多，目的是考察受試藥物對(duì)親代、F1代及F2代動(dòng)物生殖能力的影響。我們從大鼠妊娠第15天開(kāi)始，通過(guò)給予不同濃度受試物(低、中、高劑量實(shí)驗(yàn)組分別灌胃0.77、2.31、6.93 g/(kg·d))，直至分娩后第21天止。結(jié)果顯示，中、低劑量組動(dòng)物妊娠天數(shù)、體質(zhì)量等與陰性對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并對(duì)F1代仔鼠生育能力、F2代仔鼠早期發(fā)育能力及各指標(biāo)均未見(jiàn)毒理學(xué)意義的明顯改變。此外，高劑量的健脾生血顆粒還可能對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力有一定促進(jìn)作用，但其他方面指標(biāo)，例如生殖力、學(xué)習(xí)記憶、神經(jīng)發(fā)育等與陰性對(duì)照組之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此可見(jiàn)，妊娠期婦女按照說(shuō)明書(shū)劑量使用健脾生血顆粒將是安全的，尤其對(duì)于圍產(chǎn)期的婦女以及其胎兒而言，無(wú)生殖毒性作用[18]。

4 臨床安全性

健脾生血顆粒與健脾生血片臨床應(yīng)用已有多年，在多種疾病領(lǐng)域應(yīng)用療效顯著，安全性良好。左新河等[19]在應(yīng)用健脾生血片治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥合并貧血的過(guò)程中，以抗甲狀腺藥物作為基礎(chǔ)治療，琥珀酸亞鐵作為對(duì)照，考察了健脾生血片的臨床療效與安全性。結(jié)果顯示，健脾生血片組僅2例患者出現(xiàn)不良反應(yīng)(分別為惡心和便秘，發(fā)生率為4.2%)，對(duì)照組有10例患者出現(xiàn)不良反應(yīng)(發(fā)生率為21.9%)。由此可見(jiàn)，健脾生血片的中藥成分對(duì)于亞鐵所致的不良反應(yīng)有一定的緩解作用。傅蘭清等[20]在應(yīng)用健脾生血顆粒治療骨科擇期手術(shù)貧血的過(guò)程中，以琥珀酸亞鐵片作為對(duì)照，比較經(jīng)過(guò)4周治療后的血清鐵蛋白復(fù)常情況及安全性。結(jié)果顯示，健脾生血顆粒觀(guān)察組不良反應(yīng)發(fā)生率為18.33%，低于對(duì)照組(38.33%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。宋恩峰等[21]應(yīng)用健脾生血顆粒治療腫瘤化療相關(guān)性貧血，以硫酸亞鐵緩釋片作為對(duì)照，考察中醫(yī)證候改善、貧血相關(guān)指標(biāo)變化情況及安全性。結(jié)果顯示，2組不良反應(yīng)發(fā)生率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，健脾生血顆粒觀(guān)察組不良反應(yīng)發(fā)生率明顯要低。李慧等[22]應(yīng)用健脾生血顆粒聯(lián)合多糖鐵復(fù)合物治療妊娠期缺鐵性貧血，以口服多糖鐵復(fù)合物膠囊作為對(duì)照，在對(duì)照組的基礎(chǔ)上口服健脾生血顆粒作為觀(guān)察組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，2組患者在治療過(guò)程中均未發(fā)生藥物相關(guān)不良反應(yīng)情況。

健脾生血顆粒在兒科的應(yīng)用方面，嚴(yán)芳芝[23]以口服硫酸亞鐵作為對(duì)照，健脾生血顆粒聯(lián)合富馬酸亞鐵作為觀(guān)察組，研究治療小兒缺鐵性貧血的療效與安全性。結(jié)果顯示，觀(guān)察組與對(duì)照組不良反應(yīng)發(fā)生率分別為4.44%和11.11%，2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，賴(lài)鵬程等[24]應(yīng)用健脾生血顆粒治療小兒缺鐵性貧血觀(guān)察中，以右旋糖酐鐵口服液作為對(duì)照，考察了健脾生血顆粒治療小兒缺鐵性貧血的療效與安全性。結(jié)果顯示，健脾生血顆粒組總不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組，但2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

5 總結(jié)

綜上所述，健脾生血顆粒及健脾生血片不論在臨床應(yīng)用還是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中均顯示出良好的安全性，尤其是相對(duì)于純(亞)鐵制劑，健脾生血顆粒的不良反應(yīng)發(fā)生率明顯要低，這可能與該產(chǎn)品的獨(dú)特制劑工藝及中藥成分的健脾和胃作用有關(guān)，詳細(xì)作用機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

[1]Camaschella C.Iron-deficiency anemia[J].New England Journal of Medicine,2015,372(19):1832-1843.

[2]De Andrade Cairo RC，Rodrigues Silva L，Carneiro Bustani N，et al.Iron deficiency anemia in adolescents; a literature review[J].Nutricion Hospitalaria,2014,29(6):1240-1249.

[3]Gebreegziabher T，Stoecker BJ.Iron deficiency was not the major cause of anemia in rural women of reproductive age in Sidama zone，southern Ethiopia: A cross-sectional study[J].PLoS One,2017,12(9):e0184742.

[4]Engle-Stone R，Aaron GJ，Huang J，et al.Predictors of anemia in preschool children: Biomarkers Reflecting Inflammation and Nutritional Determinants of Anemia (BRINDA) project[J].American Journal of Clinical Nutrition,2017,106(Suppl 1):402S.

[5]Wirth JP，Woodruff BA，Engle-Stone R，et al.Predictors of anemia in women of reproductive age: Biomarkers Reflecting Inflammation and Nutritional Determinants of Anemia (BRINDA) project[J].American Journal of Clinical Nutrition,2017,106(Suppl 1):416S-27S.

[6]Mu M，An P，Wu Q，et al.The dietary flavonoid myricetin regulates iron homeostasis by suppressing hepcidin expression[J].Journal of Nutritional Biochemistry,2016,30:53-61.

[7]Guan Y，An P，Zhang Z，et al.Screening identifies the Chinese medicinal plant Caulis Spatholobi as an effective HAMP expression inhibitor[J].Journal of Nutrition,2013,143(7):1061-1066.

[8]何麗，高江河，趙剛.健脾生血片與多糖鐵復(fù)合物膠囊治療妊娠期缺鐵性貧血的臨床對(duì)比研究[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(2):334-337.

[9]趙剛，張雪瓊，裴學(xué)軍，等.健脾生血顆粒(片)治療各型貧血作用解析[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(2):474-476.

[10]Khuu G，Dika C.Iron deficiency anemia in pregnant women[J].Nurse Practitioner,2017,42(10):42-47.

[11]Yang GY，Luo H，Liao X，et al.Chinese herbal medicine for the treatment of recurrent miscarriage: a systematic review of randomized clinical trials[J].BMC Complementary and Alternative Medicine,2013,13:320.

[12]Singla N，Challana S.Reproductive toxicity of triptolide in male house rat，Rattus rattus[J].Scientific World Journal,2014,2014:879405.

[13]屈文，金志春，趙剛，等.健脾生血顆粒對(duì)大鼠生育力與早期胚胎發(fā)育毒性的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2017,37(3):356-359.

[14]Bansal AK，Bilaspuri GS.Effect of ferrous sulphate and ascorbic acid on motility，viability and lipid peroxidation of crossbred cattle bull spermatozoa[J].Animal,2008,2(1):100-104.

[15]葉向鋒，劉芷含，王靈芝，等.SD大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性試驗(yàn)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志,2011,21(10):162-164.

[16]趙剛，夏瑩，黃志軍，等.健脾生血顆粒對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性研究[J].世界中醫(yī)藥,2015,10(10):1582-1585.

[17]魏玉蘭，廖建玲.小劑量硫酸亞鐵結(jié)合飲食干預(yù)治療妊娠合并缺鐵性貧血的臨床觀(guān)察[J].臨床合理用藥雜志,20125(11A):110-111.

[18]趙剛，屈文，肖飛，等.健脾生血顆粒對(duì)圍產(chǎn)期大鼠的毒性研究[J].中國(guó)藥房,2017,28(16):2190-2193.

[19]左新河，牧亞峰，趙勇.健脾生血片治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥合并貧血臨床觀(guān)察[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(3):580-581.

[20]傅蘭清，胡亞俊，郭小娟.健脾生血顆粒治療骨科擇期手術(shù)貧血的臨床觀(guān)察[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(4):815-818.

[21]宋恩峰，吳紫紅，梅莎莎，等.健脾生血顆粒治療腫瘤化療相關(guān)性貧血臨床觀(guān)察[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(7):1534-1537.

[22]李慧，周玉華，吳小妹.健脾生血顆粒聯(lián)合多糖鐵復(fù)合物治療妊娠期缺鐵性貧血的療效觀(guān)察[J].現(xiàn)代藥物與臨床,2017,32(8):1544-1546.

[23]嚴(yán)芳芝.健脾生血顆粒聯(lián)合富馬酸亞鐵治療小兒缺鐵性貧血90例療效觀(guān)察[J].中醫(yī)兒科雜志,2014,10(4):42-45.

[24]賴(lài)鵬程，沈朝霞.健脾生血顆粒治療小兒缺鐵性貧血臨床研究[J].兒科藥學(xué)雜志,2014,20(4):36-38.