王文道，王選增，馬 迪

（山東省蓬萊市大辛店畜牧獸醫(yī)站，山東 蓬萊 265612）

1 雞毒支原體概述

1.1 雞毒支原體（MG）的病原學特征

雞毒支原體（MG），其大小為250～500nm，能通過450nm的細菌濾器，形態(tài)不一，呈高度多形性，常見的有球狀、絲狀，還有桿狀、環(huán)狀、螺旋狀等不規(guī)則形態(tài)。姬姆薩染色著色良好，革蘭氏染色陰性，著色較淡。MG可吸附于雞、火雞和倉鼠等動物的紅細胞，這是與非致病性禽源支原體的主要區(qū)別。MG為需氧或兼性厭氧菌；在人工培養(yǎng)時對營養(yǎng)要求較高，需要在培養(yǎng)基中加入10%～15%的滅活豬或馬血清、胰酶水解物和酵母浸出物才能生長。在固體培養(yǎng)基上，需置潮濕的環(huán)境中培養(yǎng)3～10d才能形成表面光澤透明、邊緣整齊、露滴樣的小菌落，且菌落為“煎蛋樣”，菌落很小，最大不超過1mm，肉眼不可見，光學顯微鏡下可清楚觀察到菌落形態(tài)。

MG對理化因素的抵抗力不強，對紫外線敏感，陽光直射便迅速喪失活力，一般常用的化學消毒劑均能迅速將其殺死；50℃約20min即可將其滅活，在沸水中立刻死亡。液體培養(yǎng)物在4℃保存不超過1個月，在-30℃中可保存1～2年。MG對鏈霉素、四環(huán)素族、氯霉素、紅霉素、泰樂菌素敏感，但也易產生耐藥性。

1.2 臨床癥狀與剖檢變化

MG單獨感染時臨床癥狀較輕，感染雞偶有夜間咳嗽，不影響雞的食欲和精神狀態(tài)。但是MG極易和其他病原混合感染，癥狀明顯:病雞咳嗽、流鼻涕、流淚、呼吸時發(fā)出濕鑼音，死亡率高。

1.3 診 斷

血清學方法是臨床診斷MG感染應用最普遍的方法，血清學試驗呈陽性者，結合臨床癥狀就可以在MG分離和鑒定之前作出初步診斷。用于檢測MG的血清學試驗很多，但都不同程度的缺乏特異性和敏感性。分子生物學方法也常用于MG的感染。

1.3.1 病原體的分離和鑒定

分離病原體適用的培養(yǎng)基有人工培養(yǎng)基 (FM24培養(yǎng)基和PPLO培養(yǎng)基)、雞胚、組織培養(yǎng)物(雞腎細胞培養(yǎng)物和雞氣管培養(yǎng)物)。病料為可疑感染雞的氣管或氣囊的滲出液、肺的懸浮液或鼻竇的滲出液，均可選擇上述培養(yǎng)基進行分離培養(yǎng)，同時還需結合血清學方法來確定。此法工作量大，耗費時間長，不適合于生產上的快速診斷和監(jiān)測。

1.3.2 血清學方法

生產上多用血清學方法結合病史和臨床癥狀來診斷MG感染。常用的血清學方法有血清平板凝集試驗(SPA)、血凝抑制試驗(HI)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和斑點酶聯(lián)免疫吸附試驗(Dot2ELISA)等，該方法可用于檢測卵和血清中的MG抗體，也有人利用該方法檢測MG抗原。

1.3.3 分子生物學方法

主要包括核酸探針和PCR方法，敏感性和特異性均較血清學方法高，并且可用于MG和MS的鑒別診斷。

1.4 疫苗預防

國內使用的活疫苗為MG康涅狄克F株疫苗，F(xiàn)株是由Carpenter等(1981)命名并用于疫苗生產的，其致病力極弱，給1、3、20日齡的雛雞滴眼接種，不會引起任何可見的癥狀和氣囊病變，不影響增重。它比野毒株致病性低，可經點眼、噴霧或飲水途徑免疫，以點眼法最為安全。中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所用弱毒株F-36制成的活疫苗免疫接種雞，不影響雞體增重，不引起氣囊損傷，接種雞不表現(xiàn)任何臨床癥狀。

活苗研究中，美國將F株、TS11株及6/85株制成疫苗應用，TS11株及6/85株為MG溫度敏感變異株，6/85疫苗株為凍干制品，通過噴霧法接種后，可在呼吸道存在幾周，須注意的是6/85株引起的免疫應答幾乎檢測不到，TS11株引起的抗體應答也很弱。因此，通過血清學方法無法檢測到6/85株的免疫效果。

根據市場調查，TS-11株（澳大利亞生物資源公司生產）說明書的用法與用量：用于蛋雞和種雞點眼接種，每只0.03mL。推薦在3～6周齡時進行接種。MG6/85株（英特威美國分公司生產）商品名：邁可威，說明書的用法與用量：用水稀釋后噴霧接種6周齡以上的雞每只1羽份。由于肉雞飼養(yǎng)周期一般為38～42日齡，以上兩種疫苗不適合肉雞免疫。

目前，在蓬萊市部分肉雞場雞毒支原體感染率較高，為有效控制該病，進行實驗研究，主要研究7日齡肉雞點眼1羽份和1.5羽份的雞毒支原體活疫苗（F-36株）后，通過與空白組做對照試驗，觀察各組肉雞的成活率、日增重以及料重比的變化，進行統(tǒng)計分析，為有效控制雞毒支原體感染肉雞提供理論基礎和依據。

2 材料與方法

2.1 實驗疫苗

雞毒支原體活疫苗（F-36株），福州大北農生物技術有限公司；

雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗(LaSota株+H120株)，瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司（商品名：新支妥）；

雞傳染性法氏囊病活疫苗（B87株），瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司（商品名：法必妥）；

雞新城疫活疫苗(LaSota株)，齊魯動物保健品有限公司；全程蓬萊福潤牧業(yè)有限公司飼料廠全價顆粒飼料。

2.2 實驗動物、地點

愛拔益加白羽肉雞2萬只，購自山東民和牧業(yè)股份有限責任公司；

實驗場所為蓬萊市某肉雞養(yǎng)殖場。

2.3 實驗設計

將愛拔益加白羽肉雞2萬只，隨機分布在2棟雞舍中，每棟雞舍飼養(yǎng)1萬只，第一棟雞舍中隨機選取一個位置，飼養(yǎng)300只雞，隔離分組，每組飼養(yǎng)100只。第二棟雞舍同第一棟雞舍分組，做重復試驗。

第一棟雞舍分別為試驗1組、試驗2組和對照1組，第二棟雞舍分別為試驗3組、試驗4組和對照2組；試驗1組和試驗3組在7日齡點眼1羽份雞毒支原體活疫苗（F-36株），試驗2組和試驗4組在7日齡點眼1.5羽份雞毒支原體活疫苗（F-36株），對照1組和對照2組，不做雞毒支原體活疫苗免疫，各組肉雞均在同一條件下進行飼養(yǎng)。

實驗于2017年3月1日～4月9日進行，為期40d。

2.4 免疫程序

表1 免疫程序

2.5 測定記錄與統(tǒng)計分析

出欄時記錄出欄數，計算成活率；1日齡和出欄時，測定每組試驗雞只的初始重量、出欄重量，計算日增重；記錄飼料用量，計算料重比。

采用Excell軟件對原始數據進行處理，利用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行顯著性檢驗。

3 結果與分析

試驗1組和試驗3組平均值為第一組，試驗2組和試驗4組平均值為第2組，對照1組和對照2組平均值為對照組。

3.1 對肉雞成活率的影響

表2 各組肉雞成活率

從表2看出：第一組、第二組成活率高于對照組，差異顯著（p＜0.05）；第一組和第二組之間成活率差異不顯著（p＞0.05）。

圖1 各組肉雞成活率結果柱狀圖

實驗過程中每天記錄死亡的只數，40日齡計算每組的死亡個數，用總數200減去死亡個數，除以200得出每組成活率。

3.2 對肉雞日增重的影響

表3 各組肉雞日增重

從表3看出：第1組、第2組日增重高于對照組，差異顯著（p＜0.05）；第1組和第2組之間日增重差異不顯著（p＞0.05）。

圖2 各組肉雞日增重結果柱狀圖

實驗過程中記錄1日齡平均體重和出欄時的平均體重，計算40日齡每天的日增重。

3.3 對肉雞料重比的影響

表4 各組肉雞的料重比

圖3 各組肉雞的料重比柱狀圖

料重比（F/G）:記錄各組實驗期內的飼料總消耗量與雞只總重量，兩者之比。

4 小結與討論

通過實驗，可以看出，愛拔益加白羽肉雞在使用雞毒支原體活疫苗（F-36株）1羽份和1.5羽份后，第1組和第2組成活率、日增重顯著高于對照組（p＜0.05）；第1組和第2組料重比顯著低于對照組（p＜0.05），表明免疫疫苗效果確切；免疫接種量1羽份和1.5羽份，組間差異不顯著（p＞0.05）。

（1）免疫效果確切，免疫能增強機體抵抗力，提高成活率；

（2）雞群在健康未發(fā)病的情況下，日增重明顯；

（3）免疫后，飼料轉化率提高，料重比低，經濟效益顯著。

5 結論

5.1為有效控制雞毒支原體感染肉雞，對肉雞進行雞毒支原體活疫苗（F-36株）免疫試驗，通過對結果統(tǒng)計分析表明，雞毒支原體活疫苗接種劑量1羽份，即可有效抵抗野毒的攻擊，增強免疫力，有效降低雞毒支原體感染帶來的風險。

5.2雞毒支原體活疫苗（F-36株）在我市的免疫應用表明，肉雞成活率、日增重明顯提高，料重比明顯降低，為提升肉雞的生產性能提供了技術支撐。

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