郭棟豪，陳 亮，武小芬，齊 慧，王克勤*

(1.湖南大學(xué)隆平分院，湖南長沙410125;2.湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 核農(nóng)學(xué)與航天育種研究所農(nóng)業(yè)生物輻照工程技術(shù)研究中心，湖南長沙410125)

木質(zhì)纖維素燃料乙醇具有可再生、清潔環(huán)保的優(yōu)勢(shì)，對(duì)于緩解能源危機(jī)、氣候變暖、環(huán)境污染具有重要意義［1-2］。玉米秸稈是我國僅次于水稻秸稈的第二大作物秸稈，具有產(chǎn)量大、價(jià)格低廉等特點(diǎn)［3］?，F(xiàn)階段，玉米秸稈的主要利用方式為秸稈還田(直接、間接)、畜牧業(yè)飼料、工業(yè)利用(造紙、建材)、生物燃料等，其中利用玉米秸稈生產(chǎn)燃料乙醇是清潔生產(chǎn)的主要發(fā)展方向，其工藝流程為:預(yù)處理—糖化—發(fā)酵—純化［4］。但玉米秸稈主要由結(jié)構(gòu)致密的木質(zhì)纖維素(纖維素、半纖維素和木質(zhì)素)組成，纖維素、半纖維素被木質(zhì)素包裹其中，分子結(jié)晶度高，直接進(jìn)行水解還原糖得率極低，因此，需先對(duì)原材料進(jìn)行預(yù)處理，增加纖維原料多孔性，提高水解反應(yīng)的糖得率［4-5］。木質(zhì)纖維素預(yù)處理方法主要有生物法(白腐菌、褐腐菌和軟腐菌等)、化學(xué)法(酸處理、堿處理、臭氧解等)、物理法(精磨、高壓、熱水、微波、射線等)、物理化學(xué)法等［4-13］。但這些預(yù)處理方法均存在一些不足，無法滿足現(xiàn)代農(nóng)業(yè)高效、清潔的生產(chǎn)要求，如生物法預(yù)處理耗時(shí)長，堿處理污染環(huán)境，酸水解會(huì)產(chǎn)生抑制糖化發(fā)酵的副產(chǎn)物，精磨能耗高，蒸汽爆破對(duì)設(shè)備要求高等［10-19］。γ射線輻照預(yù)處理在常溫常壓下進(jìn)行，具有環(huán)境友好、能耗低、抑制物少、轉(zhuǎn)化率高等優(yōu)勢(shì)，目前已廣泛應(yīng)用于木質(zhì)纖維素材料的預(yù)處理［20-24］。一般認(rèn)為，輻照預(yù)處理可以破壞生物質(zhì)結(jié)構(gòu)，從而提高其酶解效率。易錦瓊［25］研究表明，隨著輻照劑量的增大玉米秸稈結(jié)晶度逐漸降低，2 000 kGy輻照處理時(shí)，結(jié)晶度由未經(jīng)輻照的 22.64%降低至 3.85%。Liu 等［26］、蔣怡樂等［27］認(rèn)為，微晶纖維素聚合度隨著預(yù)處理輻照劑量的提高而降低，即輻照劑量越高，降解程度越高。陳靜萍等［28］研究表明，隨著輻照劑量的提高，稻草酶解纖維素轉(zhuǎn)化率逐漸提高，當(dāng)輻照劑量為1 500 kGy時(shí)，纖維素轉(zhuǎn)化率由未輻照的19.5%提高至88.7%。

輻照對(duì)木質(zhì)纖維素材料粒徑也有影響，在一定輻照劑量范圍內(nèi)，隨著輻照劑量的提高，小顆粒所占比重逐漸增大。唐洪濤等［29-31］研究發(fā)現(xiàn)，玉米秸稈經(jīng)輻照預(yù)處理后，其粒徑向細(xì)顆粒方向遷移，800 kGy處理秸稈粒度＜75 μm的顆粒占比由7.60%(未輻照)增大到 42.4%，沈志強(qiáng)［32］、楊春平等［33］利用輻照預(yù)處理麥秸時(shí)也得到了一致的結(jié)論。陳軍等［34］研究表明，隨著玉米秸稈粒徑的減小，其酶解還原糖得率提高，酶解不同粒徑的秸稈微觀形貌也有一定的差異。但輻照劑量與粉碎粒徑對(duì)木質(zhì)纖維素酶解轉(zhuǎn)化率是否存在協(xié)同效應(yīng)，目前還沒有文獻(xiàn)報(bào)道。鑒于此，以玉米秸稈為材料，經(jīng)過不同劑量的輻照、粉碎處理后，以粒徑和酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率為主要指標(biāo)，研究輻照和粉碎對(duì)秸稈類木質(zhì)纖維素酶解轉(zhuǎn)化率的影響，旨在為基于輻照技術(shù)的秸稈能源化利用提供理論參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料及設(shè)計(jì)

供試玉米(品種為中單3880)秸稈(稈和葉)為2016年湖南省作物研究所秋季秸稈，輻照劑量設(shè)置為 0(對(duì)照)、400、800 kGy，粒徑設(shè)置為 r＞0.450 mm、0.180 mm＜r＜0.450 mm、0.125 mm＜r＜0.180 mm、0.075 mm＜r＜0.125 mm、r＜0.075 mm，試驗(yàn)于 2017 年 4 月26日—7月6日在湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院核農(nóng)學(xué)與航天育種研究所進(jìn)行。

試劑:D–無水葡萄糖(Sigma)、D–木糖(Rubibio)、纖維素酶(北京高瑞森科技有限公司)、硫酸(衡陽市凱信化工試劑股份有限公司)、甲醇(安徽天地高純?nèi)軇┯邢薰?、乙酸(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)、無水乙酸鈉(天津大茂化學(xué)試劑廠)，均為分析純。

供試儀器:中草藥粉碎機(jī)(FW177，天津市泰斯特儀器有限公司)、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥器(GZX－9246MBE，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)、恒溫?fù)u床(HZQ－F100，常州諾基儀器有限公司)、立式壓力蒸汽滅菌箱(YXQ－LS－50S11，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)、臺(tái)式高速離心機(jī)(TG16－Ⅱ，長沙平凡儀器儀表有限公司)。

輻射源:60Co，源強(qiáng) 2.96×1016Bq。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理 玉米秸稈收獲后，自然曬干，切成5 cm左右的小段，每個(gè)處理2 kg，裝入金屬樣品盒，常溫下進(jìn)行輻照。取0、400、800 kGy輻照的玉米秸稈各100 g，用中草藥粉碎機(jī)在24 000 r/min下粉碎 30 s，依次過 0.450、0.180、0.125、0.075 mm 篩，收集粒徑 r＞0.450 mm、0.180 mm＜r＜0.450 mm、0.125 mm＜r

＜0.180 mm、0.075 mm＜r＜0.125 mm、r＜0.075 mm 的樣品并稱質(zhì)量。

1.2.2 水提與水提液酸水解 取上述粒徑的0、400、800 kGy輻照玉米秸稈 3 g(精確至 0.000 1 g)置于具塞三角瓶中，加入90 mL蒸餾水，于50℃、200 r/min條件下提取2 h后過濾，濾渣烘干至恒質(zhì)量，濾液測(cè)定葡萄糖和木糖含量，同時(shí)取上清液14 mL，加入0.5 mL 72%硫酸，置于高壓滅菌鍋中，121℃條件下反應(yīng)1 h后離心，取上清液測(cè)定酸水解后水提液中葡萄糖和木糖含量，計(jì)算樣品中可溶性葡聚糖、木聚糖含量［35］，公式如下:

可溶性葡聚糖含量=(水提液酸水解后葡萄糖含量－水提液葡萄糖含量)×0.9/樣品質(zhì)量×100%，

可溶性木聚糖含量=(水提液酸水解后木糖含量－水提液木糖含量)×0.88/樣品質(zhì)量×100%。

1.2.3 水提液濾渣酸水解 水提后烘干濾渣，稱取0.3 g(精確至0.000 1 g)，加入3 mL 72%硫酸，30 ℃水浴條件下反應(yīng)1 h，加入84 mL蒸餾水，置于高壓滅菌鍋中121℃條件下反應(yīng)1 h，然后取出冷卻過濾，收集濾液，測(cè)定葡萄糖、木糖含量，計(jì)算樣品中不溶性葡聚糖和木聚糖含量［35］。

不溶性葡聚糖含量=濾渣酸水解后葡萄糖含量×0.9/樣品質(zhì)量×100%，

不溶性木聚糖含量=濾渣酸水解后木糖含量×0.88/樣品質(zhì)量×100%。

1.2.4 酶解 稱取不同粒徑的0、400、800 kGy輻照的玉米秸稈2.0 g于具塞三角瓶中，按固液比1∶15加入30 mL 0.1 mol/L的乙酸–乙酸鈉緩沖液(pH值為4.8)，纖維素酶加入量為 20 FPU/g，搖勻后置于50℃、130 r/min條件下進(jìn)行酶解反應(yīng)。在反應(yīng)時(shí)間24、48、72、96 h 各取樣 0.5 mL，離心后取上清液 0.2 mL，加入 0.8 mL 0.005 mol/L 硫酸溶液，測(cè)定葡萄糖和木糖含量，計(jì)算酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率。

葡聚糖含量=可溶性葡聚糖含量+不可溶性葡聚糖含量，

葡聚糖轉(zhuǎn)化率=(酶解液葡萄糖含量－水提液葡萄糖含量)×0.9/樣品葡聚糖含量×100%。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.3.1 纖維素酶活 根據(jù) Ghose［36］的濾紙底物法(FPA)測(cè)定纖維素酶活，其中以高效液相色譜(HPLC)代替3，5–二硝基水楊酸法來測(cè)定還原糖濃度。

1.3.2 葡萄糖、木糖含量 參照陳亮等［35］采用HPLC法測(cè)定。色譜條件為流動(dòng)相 0.005 mol/L H2SO4、流速 0.600 mL/min、柱溫 55 ℃，色譜柱為Aminex HPX－87H，檢測(cè)器為示差折光檢測(cè)器。

1.3.3 輻照劑量與粉碎粒徑交互作用對(duì)葡聚糖酶解轉(zhuǎn)化率的影響 首先對(duì)以葡聚糖轉(zhuǎn)化率為因變量、輻照劑量和粉碎粒徑為影響因子的試驗(yàn)數(shù)據(jù)做兩因素方差分析，判斷輻照劑量與粉碎粒徑之間是否存在交互作用。在兩者具有交互作用前提下，用S值來判斷相互作用的性質(zhì)，用A值大小來度量交互作用的強(qiáng)弱，計(jì)算公式:

各公式符號(hào)意義見表1。

表1 符號(hào)說明

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2010和SPSS 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，Duncan氏法進(jìn)行多重比較，采用Origin 8.0軟件進(jìn)行圖形繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 輻照對(duì)玉米秸稈粒度分布的影響

由圖1可知，與對(duì)照(0 kGy)相比，輻照處理后粒徑 r＞0.450 mm、0.180 mm＜r＜0.450 mm 的顆粒含量隨輻照劑量提高顯著減小;粒徑r＜0.075 mm范圍內(nèi)的秸稈顆粒所占比重隨輻照劑量提高而顯著增加，0、400、800 kGy輻照劑量的玉米秸稈在同一粉碎條件下獲得粒徑r＜0.075 mm顆粒的比重依次為15.03%、53.22%、63.09%，400、800 kGy 輻照處理較對(duì)照分別顯著增加38.19、48.06個(gè)百分點(diǎn)，即樣品中小顆粒比重隨輻照劑量的增大而增大。說明輻照處理的玉米秸稈其粉碎后的粒徑向小顆粒方向遷移。

圖1 輻照對(duì)玉米秸稈粒徑分布的影響

2.2 輻照對(duì)玉米秸稈葡聚糖和木聚糖含量的影響

由表2可知，0、400、800 kGy輻照處理水提液中葡萄糖和木糖含量均較低，0 kGy輻照處理葡萄糖、木糖含量均隨粒徑減小而提高，400 kGy輻照處理葡萄糖和木糖含量隨粒徑減小而降低，800 kGy輻照處理各粒徑間無明顯規(guī)律。與酸水解前樣品相比，酸水解后0、400、800 kGy輻照處理葡萄糖和木糖含量分別提高了 0.01～8.10、2.66～8.32、9.99～17.36倍和 0.94～1.95、2.06～4.79、8.39～10.67 倍，且提高幅度隨著輻照劑量升高而增加。不同輻照劑量下，各粒徑樣品中可溶性葡聚糖和木聚糖含量表現(xiàn)為800 kGy＞400 kGy＞0 kGy。同一粒徑不同輻照劑量下，葡聚糖和木聚糖含量均存在顯著差異，且與對(duì)照相比，800 kGy輻照處理葡聚糖、木聚糖含量分別提高了 14.01～426.00、3.17～5.99倍。

表2 輻照對(duì)玉米秸稈葡聚糖和木聚糖含量的影響 mg/g

2.3 粉碎粒徑與輻照劑量對(duì)玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率的影響

2.3.1 粉碎粒徑的影響 由圖2可知，未輻照玉米秸稈其酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率隨著粒徑的減小呈升高趨勢(shì)，且不同粒徑間葡聚糖轉(zhuǎn)化率差異顯著。當(dāng)粒徑由r＞0.450 mm 減小到 r＜0.075 mm 時(shí)，其酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率由16.01%提高至 30.25%，顯著增加了 14.24個(gè)百分點(diǎn)。400 kGy輻照處理的玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率隨粒徑的減小而提高，當(dāng)粒徑由r＞0.450 mm減小到 r＜0.075 mm 時(shí)，其酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率由31.54%提高至59.71%，顯著增加了 28.17個(gè)百分點(diǎn)。除 0.180 mm＜r＜0.450 mm 與 0.125 mm＜r＜0.180 mm 的酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率無顯著差異外，其余粒徑間差異顯著。800 kGy輻照處理的玉米秸稈不同粒徑間酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率無顯著差異。

2.3.2 輻照劑量的影響 由圖3可知，不同粒徑范圍內(nèi)，玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率均隨輻照劑量的增加而提高，輻照處理葡聚糖轉(zhuǎn)化率較對(duì)照顯著提高 15.53～46.80 個(gè)百分點(diǎn)。除粒徑 r＜0.075 mm 外，其余粒徑下，不同輻照處理間差異顯著。粒徑r＜0.075 mm在400、800 kGy輻照處理下葡聚糖轉(zhuǎn)化率顯著高于對(duì)照，但兩者間無顯著差異。400 kGy處理的最佳粒徑為r＜0.075 mm，此時(shí)葡聚糖轉(zhuǎn)化率較對(duì)照提高了29.46個(gè)百分點(diǎn);800 kGy處理的最佳粒徑為r＞0.450 mm，此時(shí)葡聚糖轉(zhuǎn)化率較對(duì)照提高了46.80 個(gè)百分點(diǎn)。

圖2 粉碎粒徑對(duì)玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率的影響

圖3 輻照劑量對(duì)玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率的影響

2.3.3 輻照劑量與粉碎粒徑交互作用的影響 由輻照劑量與粉碎粒徑對(duì)玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率影響試驗(yàn)的兩因素方差分析可知，輻照劑量、粉碎粒徑及兩者交互對(duì)玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率均有顯著影響。400 kGy輻照時(shí)，粉碎粒徑與輻照劑量對(duì)玉米秸稈葡聚糖轉(zhuǎn)化率呈協(xié)同作用，粉碎粒徑由r＞0.450 mm 分別減小至 0.180 mm＜r＜0.450 mm、0.125 mm＜r＜ 0.180 mm、0.075 mm ＜r＜ 0.125 mm、r＜ 0.075mm時(shí)，協(xié)同作用較強(qiáng)，增長率依次為42.80%、39.95%、34.65%、46.82%;800 kGy 輻照時(shí)，粒徑由0.180 mm＜r＜0.450 mm 減小至 0.125 mm＜r＜0.180 mm時(shí)，粉碎粒徑與輻照劑量對(duì)玉米秸稈葡聚糖轉(zhuǎn)化率呈協(xié)同作用，其余粉碎粒徑與輻照劑量對(duì)玉米秸稈葡聚糖轉(zhuǎn)化率有拮抗作用(表3)。400 kGy和800 kGy輻照劑量與粉碎粒徑交互作用相對(duì)于單獨(dú)輻照和單獨(dú)粉碎處理增長率分別為0.24%～46.82%和－26.90%～0.42%。

表3 輻照劑量與粉碎粒徑交互作用對(duì)玉米秸稈酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率的影響

3 結(jié)論與討論

輻照預(yù)處理對(duì)木質(zhì)纖維素微觀形貌、化學(xué)組分、熱穩(wěn)定性、化學(xué)穩(wěn)定性等理化特性產(chǎn)生影響［21-22，25-26］。本研究結(jié)果表明，0～800 kGy 輻照處理后玉米秸稈中的小顆粒所占比重隨著輻照劑量的增加而增大，這與前人的研究結(jié)果［26-30］一致。易錦瓊［25］利用掃描電鏡觀察0～2 000 kGy輻照劑量處理后的玉米秸稈微觀形貌發(fā)現(xiàn)，玉米秸稈表面出現(xiàn)溝痕和坑穴，結(jié)構(gòu)變得疏散，在1 600～2 000 kGy輻照下，纖維原有整齊束狀結(jié)構(gòu)被打斷，扭曲成蜂窩狀，因此，更加易于粉碎獲得細(xì)小顆粒。本研究中，各輻照劑量樣品水提液中葡萄糖和木糖含量均較低，水提液酸水解后葡萄糖和木糖含量均增加，且增加倍數(shù)隨著輻照劑量的提高而增大，原因可能是輻照作用將玉米秸稈總纖維素降解為可溶性聚糖，提高了可溶性葡萄糖和木糖含量，進(jìn)而提高了秸稈酶解轉(zhuǎn)化率。0、400 kGy輻照處理的秸稈酶解轉(zhuǎn)化率隨粉碎粒徑的減小而提高，輻照劑量和粉碎粒徑對(duì)酶解葡聚糖轉(zhuǎn)化率有顯著影響，且大多為協(xié)同作用，這與前人研究結(jié)果［29-33］一致。一般認(rèn)為，粉碎的機(jī)械力對(duì)纖維的沖擊和剪切作用可破壞纖維原有結(jié)構(gòu)使其比表面積增加，從而提高纖維素酶與底物分子結(jié)合的概率，進(jìn)而提高了酶解轉(zhuǎn)化率［37-38］，但800 kGy輻照的玉米秸稈不同粒徑酶解轉(zhuǎn)化率無顯著差異，且輻照與粉碎粒徑幾乎沒有協(xié)同作用。說明此時(shí)輻照的影響已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于粉碎，這可能是當(dāng)輻照劑量增大到一定程度，玉米秸稈結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞，導(dǎo)致粗顆粒內(nèi)部產(chǎn)生多孔性結(jié)構(gòu)，從而增加其比表面積，提高了酶與底物的接觸概率。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，采用掃描電鏡研究輻照微晶纖維素、木聚糖和半纖維素表觀結(jié)構(gòu)時(shí)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)劑量大于800 kGy時(shí)，微晶纖維素、木聚糖以及半纖維素表面變得粗糙，出現(xiàn)許多孔洞或裂紋［39-41］，說明輻照劑量較大時(shí)，木質(zhì)纖維素材料會(huì)出現(xiàn)疏松多孔結(jié)構(gòu)，從而提高其酶解效率。

0、400 kGy輻照下的玉米秸稈，粉碎粒徑越小，酶解轉(zhuǎn)化率越高，這在優(yōu)化預(yù)處理和酶解糖化工藝等方面具有一定價(jià)值。但800 kGy輻照下玉米秸稈不同粒徑酶解轉(zhuǎn)化率無顯著差異，其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

［1］ 梁剛，裴國平，王宇.2013年全球油氣儲(chǔ)量、石油產(chǎn)量增長平緩［J］.國際石油經(jīng)濟(jì)，2014(1):186-189.

［2］ 朱劍明，彭代勇.世界能源現(xiàn)狀與內(nèi)燃機(jī)的發(fā)展機(jī)遇［J］.內(nèi)燃機(jī)工程，2011，32(2):81-84.

［3］ 左旭，王紅彥，王亞靜，等.中國玉米秸稈資源量估算及其自然適宜性評(píng)［J］.中國農(nóng)業(yè)資源與區(qū)劃，2015，36(6):5-10.

［4］ 張愛萍，謝君.生物質(zhì)制乙醇預(yù)處理方法的研究進(jìn)展［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，35(4):77-84.

［5］ 陳洪章.纖維素生物技術(shù)［M］.2版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:15-36.

［6］ 陳明.利用玉米秸稈制取燃料乙醇的關(guān)鍵技術(shù)研究［D］.杭州:浙江大學(xué)，2007.

［7］ 胡秋龍，熊興耀，譚琳，等.木質(zhì)纖維素生物質(zhì)預(yù)處理技術(shù)的研究進(jìn)展［J］.中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2011，27(10):1-7.

［8］ Silveira M H，Morais A R，Da C L A，et al.Current pretreatment technologies for the development of cellulosic ethanol and biorefineries［J］.ChemSusChem，2015，8(20):3366-3390.

［9］ Nadeem A，Kanika G，Dinesh G，et al.Recent advances in pretreatment technolgies for patefficient hydrolysis of lignocellulosic biomass［J］.Environmental Progress ＆ Sustainable Energy，2016，35(2):489-511.

［10］ Badal C S，Gregory J K，Nasib Q，et al.Biological pretreatment of corn stover with phlebia brevispora NRRL-13108 for enhanced enzymatic hydrolysis and efficient ethanol production［J］.Biotechnology Progress，2017，33(2):365-374.

［11］ 謝茂芳，吳坤，薛保國.參與玉米秸稈降解的真菌類型研究［J］.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，41(12):81-84.

［12］ 郭海鵬，李秀欣，馬海燕，等.不同方法糖化玉米秸稈的工藝優(yōu)化［J］.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，43(4):137-140.

［13］ 孫芹音，葛春梅，張潔，等.微生物轉(zhuǎn)化玉米秸稈用于飼料生產(chǎn)的研究［J］.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，40(6):149-152.

［14］ 李冬梅.玉米秸稈為原料燃料乙醇制備的關(guān)鍵技術(shù)研究［D］.哈爾濱:哈爾濱工業(yè)大學(xué)，2008.

［15］ Pang F，Xue S L，Yu S S，et al.Effect of microwave and microwave irradiation time on pretreatment efficiency and characteristics of corn stover using combination of steam explosion and microwave irradiation(SE-MI)pretreatment［J］.Bioresource Technology，2012，118:111-119.

［16］ Qing Q，Zhou L，Guo Q，et al.Milk alkaline presoaking and organosolv pretreatment of corn stover and their impacts on corn stover composition structure，and digestibility［J］.Bioresourse Technology，2017，233:284-290.

［17］ Nawa R B，Ajay S.Comparative techno-economic analysis of explosion dilute sulfuric acid，ammonia fiber explosion and biologicalpretreatments ofcorn stover［J］.Bioresourse Technology，2017，232:331-343.

［18］ Balan V，Bals B，Chundawat S P，et al.Lignocellulosic biomass pretreatment using AFEX［J］.Methods in Molecular Biology，2009，581:61-77.

［19］ Anil K M，Binod P，Rajeev K S，et al.An evaluation of dilute acid and ammonia-fiber explosion pretreatment for cellulosic ethanol production ［J］.Bioresourse Technology，2016，199:13-20.

［20］ Karimi M，Jenkins B，Strove P.Ultrasound irradiation in the production of ethanol from biomass［J］.Renewable ＆ Sustainable Energy Reviews，2014，40:412-421.

［21］ 張春艷.輻照預(yù)處理對(duì)油菜秸稈降解產(chǎn)糖效果的影響及機(jī)理研究［D］.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

［22］ Wang K Q，Xiong X Y，Chen J P，et al.Comparison of gamma irradiation and steam explosion pretreatment for eth-anol production from agricultural residues［J］.Biomass ＆ Bioenergy，2012，46(1):301-308.

［23］ Yang G S，Zhang Y P，Wei M Y，et al.Influence of γ-ray radiation on the structure and properties of paper grade bamboo pulp［J］.Carbohydrate Polymers，2010，81:114-119.

［24］ 楊青丹，王克勤，胡春婷，等.稻草秸稈輻照酶解工藝優(yōu)化［J］.可再生能源，2011，29(5):75-78.

［25］ 易錦瓊.60Co－γ輻照降解玉米秸稈纖維質(zhì)及其機(jī)理研究［D］.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

［26］ Liu Y，Chen J P，Wu X F，et al.Insights into the effects of γ-irradiation on the microstructure，thermal stability and irradiation derived degradation components of microcrystalline celllulose(MCC)［J］.Royal Society of Chemmistry，2015，5:34353-34363.

［27］ 蔣怡樂，李清明，蘇小軍，等.蘆葦60Co－γ輻照降解副產(chǎn)物的分析［J］.激光生物學(xué)報(bào)，2013，23(4):323-328.

［28］ 陳靜萍，王克勤，熊興耀，等.60Co－γ輻照對(duì)稻草纖維組織及酶解效果的影響［J］.核農(nóng)學(xué)報(bào)，2008，22(3):304-309.

［29］ 唐洪濤，哈益明.γ射線輻照玉米秸稈預(yù)處理對(duì)酶解產(chǎn)糖的影響［J］.輻照研究與輻射工藝學(xué)報(bào)，2011，29(5):308-313.

［30］ 唐洪濤.輻照預(yù)處理對(duì)玉米秸稈酶解產(chǎn)糖率的影響［D］.北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2012.

［31］ 唐洪濤，王峰，李偉明，等.γ射線輻照與NaOH協(xié)同預(yù)處理對(duì)玉米秸稈預(yù)處理對(duì)酶解產(chǎn)糖及微觀結(jié)構(gòu)的影響［J］.核農(nóng)學(xué)報(bào)，2012，26(3):535-542.

［32］ 沈志強(qiáng).輻照預(yù)處理提高小麥秸稈酶解產(chǎn)糖的研究［J］.長沙:湖南大學(xué)，2008.

［33］ 楊春平，沈志強(qiáng)，喻國策，等.γ射線輻照預(yù)處理對(duì)麥秸纖維素酶水解產(chǎn)糖的影響［J］.原子能科學(xué)技術(shù)，2009，43(1):37-40.

［34］ 陳軍，趙曉燕，王憲昌，等.超微粉碎對(duì)酶解玉米秸桿粉纖維的影響研究［J］.生物技術(shù)，2014，24(3):74-78.

［35］ 陳亮，蘇小軍，熊興耀，等.輻照預(yù)處理水稻秸稈酶解糖化與發(fā)酵產(chǎn)乙醇工藝［J］.核農(nóng)學(xué)報(bào)，2015，29(4):704-709.

［36］ Ghose T K.Measurement of cellulase activities［J］.Pure and Applied Chemistry，1987，59(2):257-268.

［37］ Igathinathanea C，Womacb A R，Sokhansanjc S，et al.Size reduction of high-and low-moisture corn stalks by linear knife grid system［J］.Biomass and Bioenergy，2009，33(4):547-557.

［38］ Igathinathanea C，Womacb A R，Sokhansanjc S.Corn stalk orientation effect on mechanical cutting［J］.Biosystems Engineering，2010，107(2):97-106.

［39］ 武小芬，陳亮，陳靜萍，等.γ射線輻照降解木聚糖的機(jī)理研究［J］.核農(nóng)學(xué)報(bào)，2017，31(5):889-898.

［40］ 陳亮，武小芬，陳靜萍，等.γ射線輻照降解微晶纖維素的研究［J］.核農(nóng)學(xué)報(bào)，2016，30(9):1731-1737.

［41］ Chen J P，Wang L Y，Su X J，et al.Structure，morphology and irradiation mediated degradation fractions of hemicellulose treated with γ-irradiation ［J］.Waste and Biomass Valorization，2016，7(6):1415-1425.