鮑蘊(yùn)文， 顧孔珍， 徐克前

（1. 中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510120；2. 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，湖南 長(zhǎng)沙 410013）

糞便檢查是臨床“三大常規(guī)”檢查項(xiàng)目之一，對(duì)消化道疾病[1-3]和寄生蟲病[4]的診斷和鑒別診斷有重要作用。以前糞便檢查方法以手工鏡檢法為主，其生物安全風(fēng)險(xiǎn)較高，且由于標(biāo)本的特殊氣味和性狀，使操作者容易產(chǎn)生排斥心理。隨著檢驗(yàn)儀器自動(dòng)化的高速發(fā)展，越來越多的糞便自動(dòng)檢測(cè)分析儀已經(jīng)應(yīng)用到臨床檢驗(yàn)工作中，使糞便檢測(cè)變得簡(jiǎn)單、易操作[5]，降低了生物安全風(fēng)險(xiǎn)，也減輕了操作者的心理負(fù)擔(dān)。本研究以手工鏡檢法為金標(biāo)準(zhǔn)，分析AVE-562全自動(dòng)糞便分析儀（簡(jiǎn)稱AVE-562）糞便常規(guī)檢查結(jié)果；儀器自動(dòng)糞便隱血（occult blood，OB）檢測(cè)與武漢康珠OB試紙條人工檢測(cè)進(jìn)行比較，探討AVE-562的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來源

收集2015年10月—2016年1月中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院3 028份門診和住院患者的糞便標(biāo)本。

1.2 儀器試劑

AVE-562及其配套試劑（長(zhǎng)沙愛威科技公司），OB試驗(yàn)人工檢測(cè)采用OB試紙條（武漢康珠公司，批號(hào)20150906）。

1.3 方法

每份糞便標(biāo)本同時(shí)用手工鏡檢法和AVE-562進(jìn)行檢測(cè)。手工鏡檢法按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第4版）[6]的要求操作，挑取糞便標(biāo)本，生理鹽水懸液以看清報(bào)紙上字跡為宜，低倍鏡觀察10個(gè)視野以上，高倍鏡觀察20個(gè)視野以上。AVE-562按儀器說明書操作，將糞便標(biāo)本按標(biāo)準(zhǔn)操作卡手工多點(diǎn)取樣置于標(biāo)本采集處理器中送檢。門診患者糞便標(biāo)本0.5 h內(nèi)檢查完畢，住院患者標(biāo)本2 h內(nèi)檢查完畢。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，手工鏡檢法和AVE-562 2種方法檢測(cè)結(jié)果的差異采用配對(duì)χ2檢驗(yàn)，一致性采用kappa檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AVE-562的OB檢測(cè)

AVE-562 自動(dòng)檢測(cè)與OB試紙條手工法檢測(cè)糞便標(biāo)本OB結(jié)果見表1。3 028份糞便標(biāo)本經(jīng)上述2種方法檢測(cè)，陽性率分別為15.65%（474/3 028）和15.49%（469/3 028），二者一致率為97.85%[（439+2 524）/3 028]。

2.2 AVE-562的糞便常規(guī)檢測(cè)

AVE-562與手工鏡檢法檢測(cè)糞便標(biāo)本常規(guī)檢測(cè)結(jié)果分別見表2～表6。以手工鏡檢法作為金標(biāo)準(zhǔn)，AVE-562檢測(cè)紅細(xì)胞（red blood cell，RBC）、白細(xì)胞（white blood cell，WBC）、寄生蟲蟲卵和脂肪球的敏感性分別為86.05%、80.95%、72.00%和91.89%；特異性分別為99.63%、99.80%、99.73%和99.86%；準(zhǔn)確率分別為99.44%、99.54%、99.50%和99.67%；kappa值分別為0.810、0.827、0.703和0.930。

表1 AVE-562 自動(dòng)檢測(cè)與武漢康珠OB試紙條手工檢測(cè)糞便標(biāo)本OB的結(jié)果 （例）

表2 AVE-562與手工鏡檢法檢測(cè)糞便標(biāo)本中RBC的結(jié)果

表3 AVE-562與手工鏡檢法檢測(cè)糞便標(biāo)本中WBC的結(jié)果

表4 AVE-562與手工鏡檢法檢測(cè)糞便標(biāo)本中寄生蟲蟲卵的結(jié)果

表5 AVE-562與手工鏡檢法檢測(cè)糞便標(biāo)本中脂肪球的結(jié)果

表6 AVE-562檢測(cè)糞便標(biāo)本性能評(píng)價(jià) （%）

3 討論

糞便檢驗(yàn)在消化道疾病的診斷及鑒別診斷中有重要意義，糞便檢驗(yàn)包括理學(xué)、化學(xué)和顯微鏡檢查等。長(zhǎng)期以來糞便顯微鏡檢查都由人工完成。隨著檢驗(yàn)儀器自動(dòng)化的高速發(fā)展，糞便顯微鏡檢查也逐漸由手工法過渡到自動(dòng)分析法。自動(dòng)分析法具有簡(jiǎn)便快速、干擾因素少、高安全性以及智能化等優(yōu)點(diǎn)，可有效減輕操作人員勞動(dòng)強(qiáng)度，極大提高實(shí)驗(yàn)室工作效率和安全性。但與此同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室為保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[7-8]，亦需要對(duì)新儀器的臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行評(píng)價(jià)。

AVE-562是由愛威科技公司自主研發(fā)的一款全自動(dòng)糞便分析儀。該儀器按糞便常規(guī)檢驗(yàn)經(jīng)典流程設(shè)計(jì)，具備以下特點(diǎn)：檢測(cè)流程全自動(dòng)化，一站式完成理學(xué)檢查、OB卡檢測(cè)、顯微鏡檢查；使用糞便標(biāo)本采集處理器全封閉式處理標(biāo)本，無需人工干預(yù)，降低了生物安全風(fēng)險(xiǎn)；標(biāo)本采集處理器具有多觸點(diǎn)結(jié)構(gòu)可供多點(diǎn)取樣，螺旋槳設(shè)計(jì)保證混勻充分使病理成分富集；具有動(dòng)態(tài)雙層濾網(wǎng)設(shè)計(jì)，可有效回收標(biāo)本中的有形成分、集卵并防止堵塞，檢驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確；使用一次性計(jì)數(shù)板，防止堵塞和交叉污染；儀器自動(dòng)對(duì)糞便外觀、檢測(cè)卡、顯微鏡下圖片拍照并自動(dòng)判讀結(jié)果，圖片可供人工在電腦上復(fù)審可疑標(biāo)本，無需再次涂片復(fù)查。

近年來，結(jié)直腸癌的發(fā)病率逐漸升高，篩查有助于結(jié)直腸癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療， 這是預(yù)防結(jié)直腸癌和降低結(jié)直腸癌病死率的重中之重，糞便OB試驗(yàn)是篩查結(jié)直腸癌常用的方法[9-10]。AVE-562的OB試驗(yàn)檢測(cè)流程全自動(dòng)化，檢測(cè)卡結(jié)果由儀器自動(dòng)識(shí)別，對(duì)儀器檢測(cè)結(jié)果存在疑問時(shí)，可通過審核儀器拍攝的檢測(cè)卡結(jié)果圖片對(duì)儀器自動(dòng)判讀的結(jié)果進(jìn)行復(fù)審。武漢康珠OB試紙條為手工檢測(cè)，人工判斷結(jié)果。在3 028份糞便標(biāo)本中，有65份糞便標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果不符，其中OB試紙條陽性、AVE-562自動(dòng)檢測(cè)陰性的有30份，武漢康珠OB試紙條陰性、AVE-562自動(dòng)檢測(cè)陽性的有35份。2種檢查方法結(jié)果不符合的可能原因?yàn)椋簶?biāo)本挑取位置與量不同（手工法一般挑取少許標(biāo)本進(jìn)行稀釋檢測(cè)，儀器法取0.5 g左右糞便標(biāo)本稀釋混勻過濾后加樣至檢測(cè)卡進(jìn)行檢測(cè)）；稀釋倍數(shù)不同（手工法1倍左右，儀器法10倍以上）；OB卡廠家提供的膠體金卡敏感性有差異（0.1 μg/mL和0.2 μg/mL）；檢測(cè)卡反應(yīng)時(shí)間有差異（武漢康珠OB試紙條為人工記錄結(jié)果，反應(yīng)時(shí)間不一定控制得精準(zhǔn)，AVE-562為儀器設(shè)定的固定時(shí)間）；OB卡廠家提供的膠體金卡本身穩(wěn)定性有部分問題；不同人員對(duì)于弱陽性的判斷有差異。

AVE-562自動(dòng)檢測(cè)RBC的陽性率高于手工鏡檢法，結(jié)果不相符標(biāo)本中手工鏡檢法陽性、儀器法陰性的有6份，手工鏡檢法陰性、儀器法陽性的有11份。2種方法結(jié)果差異的可能原因?yàn)椋簶?biāo)本挑取位置與量不同（手工鏡檢法一般是挑取少許標(biāo)本進(jìn)行涂片檢測(cè)，儀器法取0.5 g左右稀釋混勻過濾后充池到25 μL的計(jì)數(shù)板進(jìn)行檢測(cè)）；觀察方法不同（手工鏡檢法看10個(gè)以上視野，儀器法檢測(cè)視野數(shù)最少10個(gè)，最多可達(dá)200個(gè)，本實(shí)驗(yàn)設(shè)置視野數(shù)為40個(gè)）；受食物殘?jiān)绊?，儀器可能將糞便微顆粒判斷為RBC，導(dǎo)致陽性率偏高，可通過人工審核儀器拍攝的鏡下實(shí)景圖對(duì)錯(cuò)判目標(biāo)進(jìn)行糾正后發(fā)出報(bào)告。

與OB試驗(yàn)結(jié)果對(duì)照，儀器法和手工鏡檢法RBC的陰性率均偏高，可能原因?yàn)镽BC易被消化破壞，因而在顯微鏡下不能觀察到而OB試驗(yàn)可檢出。臨床應(yīng)用的OB試驗(yàn)主要有化學(xué)法和免疫法2種，但化學(xué)法易受糞便中血紅蛋白的多少、過氧化氫的濃度、標(biāo)本觀察時(shí)間、標(biāo)本量、食物及藥物等多種因素的影響，容易出現(xiàn)假陽性和假陰性[11]。本研究采用膠體金抗體檢測(cè)法，不易受其他藥物、鐵劑、動(dòng)物血等干擾，具有快速、方便、敏感性高和特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

AVE-562自動(dòng)檢測(cè)WBC、寄生蟲蟲卵和脂肪球的準(zhǔn)確率高，敏感性和特異性好。WBC假陰性（19.05%）與同類儀器相比有明顯下降[12]，與手工鏡檢法有良好的一致性（kappa=0.827）。寄生蟲蟲卵檢查與手工鏡檢法有較好的一致性（kappa=0.703）。淀粉顆粒和真菌假陽性較低，可能為儀器將糞便微顆粒誤判斷為淀粉顆粒和真菌，發(fā)報(bào)告前可通過人工審核儀器拍攝的鏡下實(shí)景圖予以糾正。

通過評(píng)價(jià)儀器的綜合性能，我們發(fā)現(xiàn)AVE-562為糞便檢測(cè)提供了一種新方法，有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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