王 剛

（泰凌生物制藥江蘇有限公司，江蘇泰州225300）

0 引言

尿多酸肽注射液常與化療聯(lián)合應(yīng)用，可用于晚期乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌的輔助治療，近年還用于骨髓增生異常綜合征的治療。在尿多酸肽注射液合成過(guò)程中，使用了大孔樹脂吸附工藝，樹脂吸附后的藥液中含有多種活性成分。

經(jīng)研究，其主要成分為有機(jī)酸（馬尿酸、苯乙酰谷氨酰胺）和多肽。通過(guò)查閱相關(guān)參考文獻(xiàn)[1-2]，我們分別采用靜態(tài)吸附和動(dòng)態(tài)吸附兩種方式對(duì)樹脂吸附的上樣量進(jìn)行了考察，檢測(cè)靜態(tài)吸附后的藥液及動(dòng)態(tài)吸附后的流穿液中的多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果來(lái)確定樹脂吸附達(dá)到飽和的量，并得出可上柱藥液量與樹脂用量的比值。

1 靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)

分別取100 mL處理好的大孔樹脂，放入燒杯中，分別加入0160403批次的超濾液900 mL、1 200 mL、1 500 mL、2 000 mL，攪拌25 min后，取適量吸附后溶液，分別測(cè)定其中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。

2 動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)

模擬尿多酸肽注射液生產(chǎn)工藝進(jìn)行小試試驗(yàn)，取120 mL處理好的大孔樹脂裝柱（徑高比為1:2），使液面高出樹脂5 cm左右，取0160501-01、0160501-02、0160501-03批次的超濾液各約2.5 L，以60 mL/min的流速上樣于已裝好的大孔樹脂柱中，控制流穿液的流速為60 mL/min，流穿液用接收器接收，每200 mL收集一次，分別測(cè)定其中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。

3 流穿液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的測(cè)定

按照已經(jīng)批準(zhǔn)的方法測(cè)定流穿液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量。靜態(tài)吸附后溶液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的測(cè)定結(jié)果如表1所示。動(dòng)態(tài)吸附后各流穿液中多肽、馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的測(cè)定結(jié)果如表2～表6所示。

動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)中三批超濾液的各流穿液中多肽以及馬尿酸的泄漏曲線分別如圖1、圖2所示。

表1 靜態(tài)吸附結(jié)果

表2 不同比例上樣量與樹脂用量下流穿液中多肽的測(cè)定結(jié)果

表3 不同比例上樣量與樹脂用量下樹脂吸附多肽的結(jié)果

表4 不同比例上樣量與樹脂用量下流穿液中馬尿酸的測(cè)定結(jié)果

表5 不同比例上樣量與樹脂用量下樹脂吸附馬尿酸的結(jié)果

表6 不同比例上樣量與樹脂用量下流穿液中苯乙酰谷氨酰胺的測(cè)定結(jié)果

圖1 三批超濾液的各流穿液中多肽的泄漏曲線

圖2 三批超濾液的各流穿液中馬尿酸的泄漏曲線

4 結(jié)語(yǔ)

靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：隨著上樣量增加，樹脂吸附量增加，當(dāng)上樣量與樹脂用量體積比為15:1時(shí)馬尿酸吸附飽和，體積比增至20:1時(shí)吸附量不再增加；多肽與苯乙酰谷氨酰胺在上樣量與樹脂用量體積比為20:1時(shí)均未達(dá)到飽和。

動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：大孔樹脂對(duì)各組分的吸附作用有強(qiáng)有弱。隨著上樣量的增加，多肽組分也逐步增加，即在大孔樹脂柱中容易泄漏，上樣過(guò)程中會(huì)流失。多肽的泄漏曲線顯示，隨著上樣量的增加，多肽的泄漏趨勢(shì)趨于平緩，即上樣量與泄漏量處于相對(duì)平衡的狀態(tài)。多肽組分的含量測(cè)定不適合作為樹脂與上柱藥液量的計(jì)算依據(jù)及樹脂飽和終點(diǎn)的判定。

馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺不容易泄漏，大孔樹脂在一定程度上對(duì)馬尿酸及苯乙酰谷氨酰胺起到富集的作用。苯乙酰谷氨酰胺含量較小，不適合作為樹脂與上柱藥液量的計(jì)算依據(jù)?？紤]到馬尿酸作為本品的主要活性成分，在質(zhì)控上有一定的意義，因此選擇馬尿酸泄漏點(diǎn)作為樹脂吸附終點(diǎn)的判定依據(jù)，可避免主要有效成分的流失，通過(guò)合理計(jì)算上樣量，可有效控制工藝的穩(wěn)定性。

因此，采用HPLC法檢測(cè)馬尿酸是否泄漏，可作為判定大孔樹脂吸附飽和終點(diǎn)的依據(jù)。根據(jù)三批超濾液動(dòng)態(tài)吸附結(jié)果顯示，馬尿酸在上樣量與樹脂用量的體積比值為11.7～13.3時(shí)開始泄漏，得到馬尿酸的最佳上樣量與樹脂用量比為11:1。

[1]陳建真，季憶，陳彬.槐花散總黃酮大孔樹脂分離純化的工藝研究[J].中華中醫(yī)藥雜志，2015，30（7）：2607-2609.

[2]韓偉，劉曦.枇杷葉三萜酸的大孔樹脂分離純化工藝[J].南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2014，36（6）：66-71.