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        梅毒螺旋體不同檢測方法在診斷新生兒梅毒中的價值比較

        2018-02-22 14:41:08羅杏
        中國當代醫(yī)藥 2018年36期
        關(guān)鍵詞:診斷靈敏度檢驗

        羅杏

        [摘要]目的 探討梅毒螺旋體不同檢測方法在新生兒梅毒診斷中的應用價值。方法 選擇我院2015年1月~2017年12月確診的45例新生兒梅毒患者和其對應產(chǎn)婦45例及100例同期健康新生兒作為研究對象,分別采用梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(TP-ELISA)、密螺旋體顆粒凝集實驗(TPPA)和甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)對所有研究對象血清進行檢測,比較三種檢測方法對新生兒梅毒的診斷價值。結(jié)果 梅毒產(chǎn)婦TRUST試驗各血清抗體滴度下梅毒的檢測陽性率普遍高于新生兒(100.00% vs. 53.33%,P<0.05)。45例梅毒產(chǎn)婦的三種檢測結(jié)果均為陽性,新生兒TRUST檢測陽性檢出率明顯低于產(chǎn)婦,差異有統(tǒng)計學意義(53.33% vs. 100.00%,P<0.05)。新生兒TP-ELISA檢測陽性檢出率和TPPA檢測陽性檢出率與產(chǎn)婦比較,差異無統(tǒng)計學意義(97.78% vs. 100.00%,100.00% vs. 100.00%,P>0.05)。通過對45例梅毒新生兒和100例健康新生兒血清檢測,結(jié)果顯示,TRUST檢測出24例梅毒陽性,TP-ELISA檢測出44例梅毒陽性,TPPA檢測出100例梅毒陽性,TPPA檢測的靈敏度(100.00%)和特異度(100.00%)均明顯高于TRUST檢測(53.33%,91.00%)和TP-ELISA檢測(97.78%,96.00%)。結(jié)論 在新生兒梅毒的診斷中,TP-ELISA檢測的靈敏度和特異度均較高,適合作為新生兒梅毒的初篩實驗,而TPPA檢測過程相對繁瑣,可作為確診實驗。

        [關(guān)鍵詞]新生兒梅毒;梅毒螺旋體;檢驗;診斷;靈敏度

        [中圖分類號] R759.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721(2018)12(c)-0143-03

        [Abstract] Objective To explore the value of different methods of Treponema pallidum (TP) in the diagnosis of neonatal syphilis. Methods A total of 45 neonatal syphilis patients, 45 cases of corresponding puerpera and 100 healthy neonates diagnosed in our hospital from January 2015 to December 2017 were selected as study subjects. They were detection with Treponema pallidum enzyme-linked immunosorbent assay (TP-ELISA), Treponema pallidum particles agglutination assay (TPPA) and toluidine red unheated serum test (TRUST). The diagnostic value of three detection methods for neonatal syphilis were compared. Results The positive rate of syphilis detected by TRUST test in all serum antibody titers of syphilis parturients was generally higher than that of newborns (100.00% vs. 53.33%, P<0.05). Positive results were found in all 45 TP parturients by these three methods, the positive rate of TRUST in TP newborns was significantly lower than that in TP parturients,with significant difference (53.33% vs. 100.00%, P<0.05). There was no significant difference of positive results in TP-ELISA and TPPA between TP newborns and TP parturients (97.78% vs. 100.00%,100.00% vs. 100.00%, P>0.05). After serum check for 45 TP newborns and 100 healthy newborns, it showed that 24 cases of positive results were found by TRUST, 44 cases of positive results were found by TP-ELISA and 100 cases of positive results were found by TPPA. The sensitivity (100.00%) and specificity (100.00%) of TPPA were significantly higher than those of TRUST (53.33%, 91.00%) and TP-ELISA (97.78%, 96.00%) (P<0.05). Conclusion In the diagnosis of neonatal syphilis, the sensitivity and specificity of TP-ELISA are high, which is suitable for the initial screening test of neonatal syphilis. The detection process of TPPA is relatively complicated and can be used as a confirmatory test.

        [Key words] Neonatal syphilis; Treponema pallidum; Test; Diagnosis; Sensitivity

        梅毒是由蒼白(梅毒)螺旋體感染人體而引起的常見性傳播疾病,主要通過血液、性、母嬰途徑傳播,傳染性很高[1]。近年來我國梅毒的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢,對人類以及社會健康均造成嚴重威脅。對梅毒血清學方面的檢查已很完善,但單一檢查方式仍存在不足之處,尤其針對新生兒梅毒患者,在血清檢測方面還有很多問題需要研究[2-3]。在臨床工作中,不同檢測方法的應用情況不同,各方法互相補充,從而得到確切的診斷,所以正確的實驗室檢查在新生兒梅毒診斷初篩中具有至關(guān)重要的作用。本研究針對梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(TP-ELISA)、梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)、密螺旋體顆粒凝集實驗(TPPA)三種梅毒檢測方法檢測新生兒血清進行分析,旨在探討其臨床價值。

        1資料與方法

        1.1一般資料

        選擇我院2015年1月~2017年12月確診的45例新生兒梅毒患者作為新生兒組及對應45例產(chǎn)婦作為產(chǎn)婦組,選擇100例同期健康新生兒作為對照組。45例新生兒梅毒患兒中,男20例,女25例;年齡1 h~14 d,平均(7.14±1.14)d。健康新生兒中,男45例,女55例;年齡為1 h~13 d,平均(6.97±1.18)d。產(chǎn)婦組中,年齡22~38歲,平均(26.92±3.19)歲。新生兒組與對照組的一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。納入標準:①確診為梅毒患者;②合并硬下疳、多形皮損等;③家屬對本研究知情,并簽署同意書。排除標準:①合并心、肝、腎嚴重病變;②意識不清。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。

        1.2方法

        1.2.1儀器與試劑 采集所有對象空腹靜脈血2~3 ml,離心分離血清處理之后,于-20℃環(huán)境保存留用,所用儀器包括TECAN全自動酶免分析儀(HAMILTON公司)、離心機。TRUST試劑盒由上海榮盛公司生產(chǎn),批號為160121;TP-ELISA試劑盒由英科新創(chuàng)公司生產(chǎn),批號為160318;TPPA試劑由日本富士珠海麗珠公司生產(chǎn),批號為VN40628。

        1.2.2 TPPA法檢測 使用明膠顆粒包被梅毒螺旋體Nichols株菌體成分做成致敏顆粒,然后對其進行檢測分析,若樣本中TP抗體與顆粒結(jié)合時開始出現(xiàn)凝集反應,則試驗結(jié)果判斷為陽性結(jié)果。若顆粒于孔底聚集成紐扣形狀則試驗結(jié)果可判斷為陰性。

        1.2.3 TRUST試驗 以心磷脂包被的膽固醇作載體,和血清中非特異性抗體產(chǎn)生抗體抗原反應,產(chǎn)生微粒。若抗體和抗原微粒反應,生成肉眼能見到的粉紅凝集塊,則試驗結(jié)果判斷為陽性結(jié)果。根據(jù)試劑盒上的具體說明,依據(jù)1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32倍比進行稀釋,以獲得梅毒血清的TRUST滴度。

        1.2.4 TP-ELISA檢測 使用被超聲波擊碎的Nichol株抗原,通過ELISA法進行檢測,按照試劑說明書操作,酶標儀波長設置為450 nm,空白孔調(diào)零,測量OD值,當OD值/cutoff值≥1則結(jié)果為陽性,OD值/cutoff值<1則結(jié)果為陰性。

        1.3觀察指標

        觀察梅毒產(chǎn)婦和新生兒的TRUST試驗抗體滴度、三種檢測方法的結(jié)果以及靈敏度和特異度,靈敏度=真陽性例數(shù)/(真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100.00%,特異度=真陰性例數(shù)/(真陰性+假陽性例數(shù))×100.00%。

        1.4統(tǒng)計學方法

        采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析和處理,計數(shù)資料采用χ2檢驗,計量資料采用t檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        2結(jié)果

        2.1不同TRUST試驗抗體滴度下產(chǎn)婦和新生兒梅毒檢測陽性率的比較

        梅毒產(chǎn)婦TRUST試驗各血清抗體滴度下梅毒的檢測陽性率普遍高于新生兒,差異有統(tǒng)計學意義(100% vs. 53.33%,P<0.05)(表1)。

        2.2 45例確診梅毒母親和新生兒血清梅毒螺旋體抗體檢測結(jié)果的比較

        45例梅毒產(chǎn)婦的三種檢測結(jié)果均為陽性,新生兒TRUST檢測陽性檢出率明顯低于產(chǎn)婦,差異有統(tǒng)計學意義(53.33% vs. 100.00%,P<0.05)。新生兒TP-ELISA檢測陽性檢出率和TPPA檢測陽性檢出率與產(chǎn)婦比較,差異無統(tǒng)計學意義(97.78% vs. 100.00%,100.00% vs. 100.00%,P>0.05)(表2)。

        2.3三種檢測方法診斷新生兒梅毒結(jié)果的比較

        通過對45例梅毒新生兒和100例健康新生兒血清檢測,結(jié)果顯示,TRUST檢測出24例梅毒陽性,TP-ELISA檢測出44例梅毒陽性,TPPA檢測出100例梅毒陽性,TPPA檢測的靈敏度(100.00%)和特異性(100.00%)均明顯高于TRUST檢測(53.33%,91.00%)和TP-ELISA檢測(97.78%,96.00%)(P<0.05)(表3)。

        3討論

        胎兒在宮內(nèi)感染蒼白螺旋體,或在哺乳期等接觸傳染可導致新生兒梅毒的發(fā)生。妊娠期梅毒產(chǎn)婦體內(nèi)蒼白螺旋體可以經(jīng)過臍靜脈和胎盤傳染胎兒,最早可在妊娠后7周發(fā)生宮內(nèi)感染,但多數(shù)發(fā)生在妊娠4個月之后,大多數(shù)會造成流產(chǎn)、早產(chǎn)以及先天性梅毒兒等[4-5]。新生兒梅毒的防治已經(jīng)是一項重要的社會以及醫(yī)學問題,因此早期診斷干預治療具有重大意義[6]。我國先天性梅毒對新生兒的健康已經(jīng)產(chǎn)生較大影響,為了實現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育,對出生人口質(zhì)量進行優(yōu)化,早期的診治是基礎(chǔ)工作。在臨床工作中,對于不同檢測方法的應用意義明顯,各方法互補優(yōu)劣,得到最佳診斷效果,所以正確的實驗室檢查在新生兒梅毒診斷初篩中具有至關(guān)重要的作用[7-8]。在感染5~7周后可對非特異性抗體進行檢測,在感染后2周可對特異性IgM抗體進行檢測,在感染后4周才能檢測出特異性IgG抗體[9-10]。本研究結(jié)果顯示,TRUST檢測和TP-ELISA檢測的靈敏度分別為53.33%和97.78%,均明顯低于TPPA檢測的100.00%(P<0.05);TRUST檢測和TP-ELISA檢測的特異度分別為91.00%和96.00%,均明顯低于TPPA檢測的100.00%(P<0.05)。TRUST屬于非特異性的檢測試驗,其應用較多的領(lǐng)域主要在梅毒的療效效果觀察以及再感染情況的判斷中。該抗體會比特異性抗體晚3周左右出現(xiàn),并且隨病程進展,會不斷升高,經(jīng)治療之后又可明顯降低。但是在臨床上也有其他集中疾病對TRUST試驗結(jié)果具有一定的影響,例如活動性肺結(jié)核、傳染性肝炎、慢性腎炎、肝硬化、病毒性感染等,因此這些患者易出現(xiàn)假陽性的情況[11-12]。TP-ELISA、TPPA均為特異性試驗,前者是通過基因重組特異性抗原包被酶標板孔,然后通過雙抗原夾心法對特異性IgG、IgM抗體檢測,在篩查高危人群梅毒方面應用廣泛,是血站、醫(yī)院較為常用的方法,可作為一種首選方法[13-14]。后者是通過Nichols株梅毒螺旋體特異性抗原檢測梅毒抗體,具有很高的穩(wěn)定性,批間差極小,是目前國內(nèi)外公認的有效檢測實驗,但是也存在窗口期問題有待商榷。文獻報道顯示,TPPA在結(jié)腸癌、免疫性疾病、妊娠、毒品成癮等人群中具有0.1%的假陽性[15]。

        綜上所述,不可僅依靠梅毒的血清學試驗陽性診斷新生兒梅毒,其只能提示標本中有類脂抗體,也不能因?qū)嶒炇覚z查陰性而排除梅毒螺旋體感染,需要具體分析,在新生兒梅毒的診斷中,TP-ELISA檢測的靈敏度和特異度均較高,適合作為新生兒梅毒的初篩實驗,而TPPA檢測過程相對繁瑣,可作為確診實驗。

        [參考文獻]

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