李莉，黃新，陳冬梅，俞艷

泰州市第二人民醫(yī)院病理科，江蘇泰州 225500

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，近年來其發(fā)病率呈逐年上升且具有年輕化的趨勢[1]。隨著治療水平的不斷提高，乳腺癌分子分型的研究成為乳腺癌研究領(lǐng)域的熱點，以分子分型來指導(dǎo)乳腺癌的臨床個體化治療和預(yù)后評估有良好的研究基礎(chǔ)及應(yīng)用前景。人類表皮生長因子受體-2（HER-2）、增殖細胞核抗原 Ki67（Ki-67 nuclear antigen）、上皮鈣黏素（E-cad）均是廣泛應(yīng)用于乳腺癌治療與預(yù)后評價的重要分子標(biāo)志物[2]。該研究擬采用免疫組織化學(xué)SP法，檢測該院2014年1月—2017年11月確診的100例不同分子分型的浸潤性乳腺癌患者中HER-2、Ki67和E-cad的表達特點，分析其與乳腺癌分子分型的關(guān)系和臨床病理意義。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的初診為原發(fā)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者100例?；颊吣挲g范圍 28～75歲，平均年齡48歲；絕經(jīng)情況：絕經(jīng)前67例，絕經(jīng)后33例；手術(shù)方式：改良根治術(shù)51例，保乳根治術(shù)31例，乳腺單純切除10例，乳腺切除重建手術(shù)8例。根據(jù)《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范》（2017 版）[3]，乳腺癌組織學(xué)分級：I級 2 例，II級 69 例，III級29例；按照2011版乳腺癌診療規(guī)范，TNM臨床分期為：Ⅰ期17例，Ⅱ期61例，Ⅲ期19例，Ⅳ期3例。按乳腺癌患者分子分型分組，并每組隨機選取20例，采用免疫組織化學(xué)二步法檢測各組乳腺癌HER-2、Ki67和E-cad蛋白的表達。所有乳腺癌患者術(shù)前均未進行化療和放射治療。

1.2 研究方法

采用免疫組化二步法檢測，并依據(jù)《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范》對乳腺癌進行分子分型[3-4]。所有抗體（包括 ER、PR、HEK-2、Ki67 和 E-cad 等）、免疫組化染色試劑盒及其他試劑均購自上海長島抗體診斷試劑有限公司，并嚴(yán)格按照說明書進行實驗。HER-2陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：如免疫組織化學(xué)檢測無著色或表現(xiàn)為微弱、不完整的細胞膜染色，結(jié)果顯示 HER-2 為（-）或 HER-2 為（+），則判斷為HER-2陰性；如染色結(jié)果顯示大于1/3細胞呈現(xiàn)較強、完整的細胞膜棕褐色著色，記為HER-2（+++），則判斷為HER-2陽性；如染色結(jié)果顯示細胞完整但不均勻的細胞膜棕黃色染色或小于1/3的細胞呈呈現(xiàn)較強、完整的細胞膜棕褐色著色，記為HER-2為（++）。Ki67陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：結(jié)果以胞核內(nèi)棕黃色顆粒染色為陽性，并計算陽性細胞百分比：低于14%為低表達，大于等于14%為高表達。E-cad陽性判定標(biāo)準(zhǔn)[5-7]：以胞核內(nèi)棕黃色顆粒染色為陽性著色，并計算陽性細胞百分比：低于50%為陰性表達，高于50%為陽性表達。

1.3 統(tǒng)計方法

應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，計數(shù)資料采用百分率（%）表示，組間數(shù)據(jù)采用 χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HER-2、Ki67和E-cad蛋白在乳腺癌組織中的表達情況

該研究100例原發(fā)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者中HER-2、Ki67和E-cad蛋白的陽性率，結(jié)果見表1。

表1 乳腺癌組織中HER-2、Ki67和E-cad的表達

2.2 HER-2、Ki67和E-cad在不同分子分型乳腺癌中的陽性率比較

比較HER-2、Ki67和E-cad蛋白在不同分子分型乳腺癌中表達情況詳見表2。

表2 HER-2、Ki67和E-cad在不同分子分型乳腺癌中的表達

2.3 HER-2、Ki67和E-cad在乳腺癌中表達與臨床病理特征的相關(guān)性

HER-2、Ki67及E-cad蛋白表達與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系詳見表3。

表3 HER-2、Ki67及E-cad蛋白表達與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

隨著治療水平的不斷提高，多項臨床研究表明，人類表皮生長因子受體-2（HER-2）、增殖細胞核抗原Ki67、上皮鈣黏素（E-cad）均是廣泛應(yīng)用于乳腺癌治療與預(yù)后評價的重要分子標(biāo)志物[8]。2011年，St.Gallen國際乳腺癌的會議提出將Ki67作為區(qū)別Luminal A型和Luminal B型的關(guān)鍵因素，Ki67大于14%提示腫瘤惡性程度較高，且預(yù)后較差[9]。該研究中，發(fā)現(xiàn)Luminal A型乳腺癌Ki67陽性率最低 （40.0%），Luminal B （HER-2-）型陽性率最高（95.0%），表明相對于其他分子分型，Luminal B （HER-2-）型乳腺癌腫瘤細胞的增殖活躍較高，而LuminalA型惡性程度相對較低，這與前人研究結(jié)果一致[10-11]。

該次研究中，Kid67蛋白表達與患者年齡、腫瘤大小、組織學(xué)分級、腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)以及ER/PR狀態(tài)均無關(guān)；HER-2表達僅與腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)有關(guān)；E-cad同時與腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)和組織學(xué)分級顯著相關(guān)。但這可能與入選病例的個體特異性有關(guān)，日后還需進一步擴大病例數(shù)量來探究三種標(biāo)志性蛋白與以上臨床病理資料之間的相互關(guān)系[12]。因此，聯(lián)合檢測HER-2、Kid67和E-cad對不同分子分型乳腺癌有一定的預(yù)測預(yù)后價值，必要時可擴大樣本量，進一步研究三者對乳腺癌分子分型關(guān)系的影響和相互作用。