(1.四川省畜牧科學(xué)研究院,四川 成都 610066; 2.動(dòng)物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川 成都 610066)
豬流行性腹瀉病毒呈多形性,傾向圓形,外有囊膜。核酸型為RNA型,病毒只能在腸上皮組織培養(yǎng)物內(nèi)生長(zhǎng)。經(jīng)免疫熒光和免疫電鏡試驗(yàn)可知該病毒與豬傳染性胃腸炎病毒、豬血球凝集性腦脊髓炎病毒,新生犢牛腹瀉病毒、犬腸道冠狀病毒、貓傳染性腹膜炎病毒無(wú)抗原關(guān)系。該病毒受外界環(huán)境影響大,對(duì)消毒劑抵抗力弱,常規(guī)消毒劑可將其滅活。
豬流行性腹瀉流行有一定的季節(jié)性,多發(fā)于冬春寒冷季節(jié),但近年出現(xiàn)了新的變化,也偶在天氣炎熱時(shí)發(fā)生,部分養(yǎng)豬場(chǎng)還有全年發(fā)病的現(xiàn)象。經(jīng)研究證實(shí),豬流行性腹瀉病毒可在持續(xù)存在,各年齡段的豬均易感。該病潛伏期一般在5~8 d,主要傳染源為帶毒豬和發(fā)病豬,即使康復(fù)豬的糞便中也可能長(zhǎng)期帶毒。被發(fā)病豬糞便污染后的飼草、墊料、水槽等,豬場(chǎng)中的車(chē)輛、各種養(yǎng)殖用具都可能是病毒的傳播媒介 ,易感豬群通過(guò)接觸病毒傳播媒介,誘發(fā)感染。同時(shí)有研究表明,豬流行性腹瀉還可以通過(guò)乳汁進(jìn)行垂直傳播。一旦發(fā)病,可快速波及全群。哺乳仔豬、架子豬和育肥豬為該病高發(fā)群體,發(fā)病率可高達(dá)100%,其中剛出生7 d內(nèi)的哺乳仔豬危害最嚴(yán)重。目前豬流行性腹瀉呈現(xiàn)一種混發(fā)趨勢(shì),常與傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒、豬圓環(huán)病毒及大腸桿菌等混合感染,但是臨床表現(xiàn)出典型的豬流行性腹瀉癥狀。給該病的診治帶來(lái)難度。近年,分離到一種可導(dǎo)致仔豬出生后第2天就出現(xiàn)典型腹瀉癥狀的豬流行性腹瀉病毒變異毒株,這種病毒對(duì)仔豬致死率最高可達(dá)100%,豬流行性腹瀉的診治面臨著新的挑戰(zhàn)。
豬流行性腹瀉因與豬傳染性胃腸炎的臨床表現(xiàn)十分相似,在診斷中容易混淆。病毒在產(chǎn)房?jī)?nèi)傳播方式呈跳躍式,哺乳仔豬發(fā)病在時(shí)間上有間歇特點(diǎn),哺乳仔豬一旦感染,癥狀明顯,有典型的癥狀,嘔吐多發(fā)生于哺乳和吃食之后,吐出黃白色黏性胃內(nèi)容物。腹瀉開(kāi)始時(shí)排黃色黏稠便,接著呈水樣腹瀉,并混有黃白色的凝乳塊,排泄污物粘于肛門(mén)及臀部?;疾∽胸i常伴有精神沉郁、厭食、消瘦、衰竭和脫水。癥狀輕重及死亡率與年齡呈負(fù)相關(guān),年齡越小,癥狀越重,死亡率越高。7日齡以?xún)?nèi)的哺乳仔豬常于腹瀉后2~4 d脫水死亡,病死率常高于50 %。斷奶仔豬、育肥豬癥狀較輕,腹瀉一般持續(xù)4~7 d后絕大多數(shù)可自行康復(fù)。
根據(jù)該病的流行特點(diǎn)、臨床癥狀和病理變化可作初步判斷,但該病臨床癥狀與豬傳染性胃腸炎相似,可根據(jù)該病的病死率低,傳播速度較豬傳染性胃腸炎緩慢,且不同年齡均可發(fā)病加以區(qū)分。對(duì)病死豬進(jìn)行解剖,病理變化主要在小腸,小腸腸腔內(nèi)充滿(mǎn)黃白色液體,腸系膜充血出血,伴有腸系膜淋巴結(jié)水腫出血,顯微鏡下可見(jiàn)小腸絨毛縮短,根據(jù)這些解剖病理變化可作進(jìn)一步診斷。
實(shí)驗(yàn)室檢查為該病主要確診手段,可采用直接免疫熒光法、免疫電鏡法、免疫酶染色法、RT-PCR和膠體金檢測(cè)等方法檢測(cè)該病抗原,也可采用血清中和試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)該病抗體[1]。
RT-PCR法特異性高,簡(jiǎn)便、快捷,是目前對(duì)該病抗原檢測(cè)的常用方法,在養(yǎng)豬場(chǎng)可以快速準(zhǔn)確的診斷出豬流行性腹瀉病毒。該法需要采集病豬新鮮糞便或小腸內(nèi)容物進(jìn)行RNA提取,提取出的RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后,使用根據(jù)豬流行性腹瀉病毒的N基因設(shè)計(jì)引物對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物加以測(cè)序比對(duì)后即可確診。該法與豬的其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
膠體金檢測(cè)技術(shù)是近年來(lái)獸醫(yī)臨床上應(yīng)用較多的快速檢測(cè)手段,其主要原理是將體外表達(dá)的豬流行性腹瀉病毒M蛋白抗原和自制的抗SPA多抗血清包被NC膜,分別作為檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn),制備可檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒血清抗體的快速診斷試紙條。該方法快捷、簡(jiǎn)單、適用,一般5~10 min即可檢出結(jié)果,適合基層使用。目前市場(chǎng)上有很多商品化的膠體金產(chǎn)品,但產(chǎn)品質(zhì)量尚需考量。
直接免疫熒光技術(shù)法,據(jù)相關(guān)報(bào)道該法檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒抗原敏感、快速和準(zhǔn)確率高。取腹瀉48 h以?xún)?nèi)的病豬小腸(自然死亡病例的小腸不可靠),制作小腸黏膜抹片或小腸冰凍切片,風(fēng)于后使用丙酮固定,然后向其中加入熒光染色劑對(duì)小腸病毒抗體染色標(biāo)記,封片后鏡檢觀(guān)察,若可發(fā)現(xiàn)被染色的感染細(xì)胞,則可對(duì)該病進(jìn)行確診[2]。
由于該病在臨床癥狀、流行病學(xué)等方面與豬傳染性胃腸炎相似,因此在條件允許下需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查,兩種病原在抗原性方面有著顯著的差異性,另外該病還需要與仔豬輪狀病毒病、仔豬白痢、黃痢進(jìn)行區(qū)別診斷。
目前豬流行性腹瀉無(wú)特效治療藥物和方法,臨床上,對(duì)發(fā)病豬場(chǎng),應(yīng)本著早發(fā)現(xiàn)、早治療,抗菌消炎,及時(shí)補(bǔ)液,母仔兼治的原則進(jìn)行治療。針對(duì)發(fā)病豬只應(yīng)試投一些抗菌藥,助消化藥,吸附劑,同時(shí)進(jìn)行葡萄糖,電解質(zhì)補(bǔ)充,以降低病毒和細(xì)菌的繼發(fā)感染或劇烈腹瀉脫水引起的死亡。另外,需做好發(fā)病豬場(chǎng)內(nèi)的消毒隔離工作,應(yīng)立即隔離病豬,及時(shí)消毒豬舍地面、各類(lèi)養(yǎng)殖用具、運(yùn)輸車(chē)輛等,禁止飼養(yǎng)人員竄舍,以避免交叉感染。
養(yǎng)豬場(chǎng)圈舍內(nèi)應(yīng)干燥通風(fēng),保持空氣新鮮,定期對(duì)圈舍地面,設(shè)備,用具消毒,及時(shí)處理糞便,定期清洗消毒保育舍內(nèi)的仔豬料槽和飲水設(shè)備。母豬營(yíng)養(yǎng)需均衡,臨產(chǎn)前和哺乳期間應(yīng)做好母豬乳頭清潔衛(wèi)生消毒工作,檢查母豬奶水是否充足,接產(chǎn)器械應(yīng)嚴(yán)格消毒,仔豬出生后應(yīng)及時(shí)對(duì)臍帶消毒結(jié)扎。母源抗體對(duì)增強(qiáng)仔豬機(jī)體抗病能力尤為重要,應(yīng)幫助仔豬及早吸吮初乳,同時(shí)及時(shí)對(duì)產(chǎn)后母豬進(jìn)行消炎,增加飼料投喂量。產(chǎn)房?jī)?nèi)溫度應(yīng)控制在32℃左右,圈舍飲水保持新鮮,無(wú)污染。對(duì)于斷奶后的保育仔豬,堅(jiān)持少量多餐的原則,應(yīng)避免飼喂過(guò)飽,禁喂霉變飼料。
根據(jù)當(dāng)?shù)氐膭?dòng)物疫情以及養(yǎng)豬場(chǎng)的實(shí)際生產(chǎn)情況對(duì)母豬,仔豬制定合理的免疫程序。
5.2.1 基礎(chǔ)免疫
做好母豬的基礎(chǔ)免疫是提高初生仔豬免疫力的重要保障。母豬的基礎(chǔ)免疫主要包括藍(lán)耳病、豬瘟、圓環(huán)病毒病、偽狂犬病和口蹄疫等影響母豬繁殖性能和生產(chǎn)性能疾病的免疫。作好了基礎(chǔ)免疫妊娠母豬初乳中會(huì)有血清中的抗體,通過(guò)仔豬吃初乳的方式傳遞給仔豬,使仔豬獲得高含量的抗體,從而增強(qiáng)仔豬免疫抵抗力。
5.2.2 多聯(lián)苗接種
目前,臨床上引起以豬只腹瀉為明顯癥狀的病毒性傳染病主要有豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉及輪狀病毒病,偶爾還會(huì)出現(xiàn)幾種病毒病的交叉感染現(xiàn)象。只接種其中一種病毒的疫苗,效果不太理想,注射這幾種病毒的多聯(lián)疫苗有著較好的效果?,F(xiàn)在市面上常用的弱毒疫苗有豬傳染性胃腸炎—豬流行性腹瀉—輪狀病毒三聯(lián)弱毒苗和豬傳染性胃腸炎—豬流行性腹瀉二聯(lián)弱毒苗,養(yǎng)豬場(chǎng)須根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇。
5.2.3 母豬“返飼法”
因未免疫或免疫失敗造成豬流行性腹瀉急性暴發(fā)的豬場(chǎng),為降低哺乳仔豬死亡率,可對(duì)11月至次年3月份期間分娩的、臨產(chǎn)前半個(gè)月以上的懷孕母豬或空懷母豬進(jìn)行強(qiáng)毒人工感染——“返飼法”:即將帶毒的病豬糞便或采集2~5日齡發(fā)病癥狀典型的小豬小腸(包括內(nèi)容物)剪碎后拌在飼料里飼喂空懷或懷孕母豬。母豬經(jīng)感染后15 d便能誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體和乳汁免疫力,并通過(guò)初乳傳遞給哺乳仔豬,仔豬經(jīng)被動(dòng)免疫后可持續(xù)到斷奶而不發(fā)病,且能縮短該病的流行時(shí)間。對(duì)臨產(chǎn)15 d的懷孕母豬只能返飼1次[3]。“返飼法”有一定散毒風(fēng)險(xiǎn),可使得強(qiáng)毒持續(xù)存在,成為重要的傳染源,這是一種“亡羊補(bǔ)牢”、不得已而為之的辦法,須慎重使用。臨產(chǎn)前15 d以?xún)?nèi)禁止采用此法,因感染后15 d內(nèi)的乳汁可能帶毒。
[1] 姜玉武,王玉珍,林秀.豬流行性腹瀉的診斷與防治[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘,2014(1):138.
[2] 焦永亮.仔豬流行性腹瀉的診斷與防控[J].當(dāng)代畜牧,2015(Z11):88-89.
[3] 陳申秒,牛成明,何福慶,等.豬流行性腹瀉病毒研究進(jìn)展及疫苗應(yīng)用前景[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2014(3):223-229.