(定興縣農(nóng)業(yè)局, 河北 定興 072650)

1 檢測(cè)對(duì)象不同的樣品采集技術(shù)

1.1 檢測(cè)細(xì)菌

假若豬樣品用于檢測(cè)細(xì)菌，則選擇樣品時(shí)應(yīng)選取病狀較典型且死亡時(shí)間較短的豬為最佳，假若條件不允許，則應(yīng)對(duì)采集的組織或樣品做無(wú)菌處理，亦可以在實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場(chǎng)做無(wú)菌處理。主要方法為使用接種棒將豬試驗(yàn)品中所需的血樣及肝臟通過(guò)接種的方法放置于血平板處。且需注意的一點(diǎn)是該樣品不經(jīng)允許不得加入任何物質(zhì)，處理完成后，應(yīng)立即將樣品放置于密閉性較好的、經(jīng)過(guò)滅菌處理的空間內(nèi)，并為其貼上詳細(xì)的標(biāo)簽以便下一次的尋找，緊接著為該樣品尋找一個(gè)空間較大的冷藏室，以備即將實(shí)施的送檢工作。

1.2 檢測(cè)病毒

假若該豬樣品的主要目的是檢測(cè)病毒，應(yīng)選擇在豬病發(fā)體溫升高的過(guò)程中進(jìn)行采集，該樣品的采集結(jié)構(gòu)一般為豬的臟器或是糞便，與上述檢測(cè)細(xì)菌的處理方法相似，大致流程為“采集-無(wú)菌處理-貼標(biāo)簽-冷藏處理-送檢”。假設(shè)運(yùn)送路途過(guò)于遙遠(yuǎn)，則可以采取先將樣品凍結(jié)的方法以保障采集樣品的可使用性，另一種有效手段為將所需樣品防治在酸堿度適中的乳液內(nèi)部，并在該容器內(nèi)加入適量的青霉素或鏈霉素，緊接著進(jìn)行冷藏放置以備送檢。假若此次采集過(guò)程中所需樣品只能是抗凝血，則應(yīng)在采集樣品前，在用于采血的容器內(nèi)部添加適量的濃度為0.1%的肝素物質(zhì)，豬樣品應(yīng)從使用注射或真空采血的方法對(duì)其前腔靜脈做抽血處理。假若樣品需求量較少，則可選擇其他部分進(jìn)行抽取，例如耳靜脈等。

1.3 檢測(cè)血清

采集檢測(cè)血清的豬樣品可使用的工具為一次性采血器、一次性注射器。首先利用注射器從豬的靜脈位置抽取大約3ml的血液樣品，并將其放置于一次性采血儀器內(nèi)部，緊接著為其貼標(biāo)簽，將其放置在室溫環(huán)境內(nèi)，確定血液凝固后為其安排送檢。經(jīng)過(guò)相關(guān)操作，使得樣品結(jié)構(gòu)內(nèi)的血清在最快程度內(nèi)分離出來(lái)[1]。值得注意的一點(diǎn)是假若在放置過(guò)程中，部分血液已呈現(xiàn)凝固狀態(tài)，則應(yīng)即刻進(jìn)行低溫儲(chǔ)存，如若較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)不做檢測(cè)處理，血清樣品應(yīng)保存在溫度為4℃的環(huán)境中，切記血清樣品不得多次做凍融處理，否則對(duì)于樣品的檢測(cè)結(jié)果會(huì)有所影響。

1.4 檢測(cè)病理組織

假設(shè)樣品用于檢測(cè)病理組織，則采集過(guò)程中的首要需求為保證樣品采集的新鮮程度，應(yīng)選擇病狀具有代表性的結(jié)構(gòu)組織，且采集時(shí)應(yīng)連同健康組織一起，以確保結(jié)構(gòu)的完整性。采集樣品的規(guī)格為長(zhǎng)寬1～2cm，厚度為0.5cm，采集完成后立即進(jìn)行固定處理，輔助材料為比例高達(dá)95%的酒精液體或是比例為4%酸堿度適中的甲醛緩沖液。

2 技術(shù)要點(diǎn)

2.1 樣品適宜

豬樣品所使用的作用不同，檢測(cè)樣品也會(huì)發(fā)生一定改變。假若需對(duì)疫病做具體檢測(cè)，應(yīng)選擇具有較重疫病的豬樣品。如若該疫病沒(méi)有具體定論，則應(yīng)采取全面采集的方法，例如豬瘟疫病檢測(cè)時(shí)，應(yīng)采取豬的淋巴結(jié)、全血等等各類結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)以確定該疫病的起因。檢測(cè)口蹄疫時(shí)，則應(yīng)檢測(cè)水泡皮、淋巴結(jié)等結(jié)構(gòu)。

2.2 樣品具代表性

以檢測(cè)細(xì)菌的豬樣品為例，樣品選擇時(shí)應(yīng)選擇未經(jīng)過(guò)治療的、病狀極具代表性、病變情況尤為顯著的豬樣品；檢測(cè)病毒的豬樣品則應(yīng)采取極具普遍性的豬樣品；在檢測(cè)豬的并發(fā)癥時(shí)，應(yīng)選擇并發(fā)癥狀較為顯著的豬樣品。這樣的選擇方法會(huì)使得檢測(cè)結(jié)果較為合理且能說(shuō)明問(wèn)題。

2.3 采集時(shí)間適當(dāng)

采集過(guò)程中，對(duì)于采集的時(shí)間段亦有相關(guān)要求，應(yīng)根據(jù)采集樣品的特點(diǎn)合理化選擇豬樣品。例如在選擇檢測(cè)免疫抗體的豬樣品時(shí)，應(yīng)從注射疫苗的作用時(shí)間、疫苗類型等方面來(lái)全面考慮，用于分離病原體的豬樣品，則應(yīng)在病發(fā)時(shí)或癥狀較具代表性時(shí)方可達(dá)到最佳效果，病死的樣品更具實(shí)效性，應(yīng)在動(dòng)物死的那刻立刻做采集處理。

2.4 無(wú)菌操作

假若樣品用于病原組織及血清的檢驗(yàn)時(shí)，無(wú)菌操作是采樣過(guò)程中必須完成的一項(xiàng)重要操作，且參與采樣處理的各項(xiàng)設(shè)備都應(yīng)事先進(jìn)行滅菌操作，用于尸體解剖檢驗(yàn)的豬樣品，則應(yīng)在采樣處理完成后對(duì)其進(jìn)行病理的深入研究，以保障采集樣品的可使用性，有效杜絕細(xì)菌、病毒等相關(guān)物質(zhì)的干預(yù)，提升檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確程度。

2.5 樣品需足量

由于檢測(cè)方法及物質(zhì)的不同，所需的豬樣品的質(zhì)量也存在較大差異，工作人員應(yīng)依據(jù)相關(guān)檢測(cè)內(nèi)容科學(xué)化確定其用量[2]。用量是否足量具有兩個(gè)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，一方面相關(guān)人員所收集的豬樣品數(shù)量需滿足實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)于量的需求，另一方面豬樣品的采集數(shù)量盡可能留有剩余部分，因?yàn)椴杉瘮?shù)量的不足會(huì)導(dǎo)致采集難度的顯著性提高，且整個(gè)采集過(guò)程在人力、時(shí)間上的消耗遠(yuǎn)高于材料滿足時(shí)的情況[3]。

3 結(jié)束語(yǔ)

綜上所示，只有針對(duì)不同的檢測(cè)，選擇不同的采集樣品的方法，才能維護(hù)檢測(cè)結(jié)果的精確程度，對(duì)于疫病研究有所助益。

[1]張祖勇.常見(jiàn)動(dòng)物病原學(xué)檢測(cè)樣品活體采集技術(shù)[J].貴州畜牧獸醫(yī),2016,40(1):55-56.

[2]王亞萍,鄧瓊,廖體萍.血清抗體監(jiān)測(cè)在豬疫病防控中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)與裝備,2017(2):191.

[3]孫美玲.貯存時(shí)間、濕度、銅源和添加劑來(lái)源對(duì)預(yù)混料中B族維生素穩(wěn)定性的影響[D].沈陽(yáng)：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué),2016.