劉興華，倪俊卿，宋首宏，李建明，楊玉英

（河北省畜牧良種工作站，河北石家莊050000）

種公牛冷凍精液的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響母牛的受胎率和繁殖率,也與養(yǎng)牛戶的經(jīng)濟(jì)利益密切相關(guān),所以時(shí)刻樹立質(zhì)量意識,對冷凍精液質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格的控制尤為重要。河北品元畜禽育種有限公司作為全國大站,擁有優(yōu)質(zhì)種公牛200多頭,生產(chǎn)的冷凍精液發(fā)往全國各地,多年來一直遵循確保每一支凍精優(yōu)質(zhì)合格,讓每位養(yǎng)牛戶用上放心凍精的原則，在生產(chǎn)過程中，形成一系列的質(zhì)量控制措施，保證了冷凍精液的質(zhì)量。

1　細(xì)菌數(shù)的控制

國標(biāo)規(guī)定，每劑量的精液細(xì)菌數(shù)不能超過800個(gè)，在實(shí)際生產(chǎn)中，細(xì)菌數(shù)是最不好控制的指標(biāo)，往往一個(gè)細(xì)節(jié)的疏忽，就造成最終細(xì)菌數(shù)的超標(biāo),尤其在炎熱潮濕的夏季,細(xì)菌數(shù)控制更是重中之重,為此我們也做了大量的工作。

首先，精液采集及處理的大環(huán)境衛(wèi)生無菌處理是非常必要的，而大環(huán)境主要就是精液處理室、采精廳、采精準(zhǔn)備室。精液處理室及采精準(zhǔn)備室需要定人定崗進(jìn)行衛(wèi)生打掃，保持室內(nèi)的干凈清潔，并且使用定時(shí)開關(guān)在每天下班后對室內(nèi)進(jìn)行紫外線照射30～60min消毒，而為了防止外來因素對環(huán)境造成的污染，精液處理室嚴(yán)禁非工作人員進(jìn)入，工作人員必須首先在更衣室更換干凈無菌鞋帽后進(jìn)入走廊最后進(jìn)入精液處理室，更衣室以及走廊也設(shè)有紫外線燈照射進(jìn)行消毒；工作人員保證個(gè)人衛(wèi)生，勤洗手不留指甲等等，有效的防止人為造成細(xì)菌污染；保持采精廳內(nèi)的通風(fēng)干燥，采精廳每次使用完畢后由專人進(jìn)行清掃消毒，用水沖刷地面然后再潑灑消毒液，防止細(xì)菌的滋生。

第二個(gè)大的方面是精液采集處理過程中所使用的器具，由于這些器具跟精液有直接的接觸，如果消毒不完全或者被污染，那么精液自然也就被污染，所以器具必須進(jìn)行嚴(yán)格消毒。采精所用的假陰道、內(nèi)胎、三角漏斗需經(jīng)過三道清洗，首先使用清水沖刷后用洗潔精水進(jìn)行二次清洗，最后再用清水沖洗，清洗干凈后使用蒸汽消毒機(jī)進(jìn)行蒸汽消毒，消毒后放在無菌的環(huán)境中備用，在安裝時(shí)再使用75%酒精擦拭消毒。集精杯、錐形瓶、量筒等直接和精液接觸的玻璃器皿在常規(guī)清洗后使用干燥箱120度消毒2h；包裝用的塑料管、塑料細(xì)管及紗布袋都于前一天用紫外線消毒30min。所有器皿消毒后放于無菌環(huán)境中備用，防止污染。

第三方面就是精液采集和處理過程中的控制：無論是公牛和采精用的臺牛都要做好牛體清潔消毒工作，要定期對公牛進(jìn)行牛體刷拭以保證干凈，尤其是牛體腹部的清潔，采精前對采精公牛陰莖周圍陰毛進(jìn)行修剪并清洗消毒，避免采精過程中身上污染物、微生物或者包皮中的污物進(jìn)入精液。臺牛每次使用前需用高錳酸鉀溶液刷洗后軀并用干凈毛巾擦拭干凈，在采精過程中要保持臺牛的干凈狀態(tài)，一旦后驅(qū)被牛糞污染需要立即清洗，同時(shí)定期剪除臺牛尾巴上過長的尾毛，在采精過程中使用栓系尾巴的方法來避免臺牛甩尾，這樣可以有效的避免臺牛身上污物和微生物落入假陰道污染精液；采精過程中采精員需佩戴一次性手套，防止細(xì)菌污染以及交叉感染的發(fā)生，假陰道潤滑液定期消毒避免細(xì)菌的滋生。

精液采集后通過無菌傳遞窗送達(dá)精液處理室，在精液處理室進(jìn)行活力檢測使用的槍頭應(yīng)提前使用紫外線進(jìn)行消毒，其他玻璃器皿全部進(jìn)行高溫消毒后使用。精液稀釋所用稀釋液需進(jìn)行無菌處理，最好使用進(jìn)口稀釋液，避免自配稀釋液使用卵黃，因無菌處理不到位而造成細(xì)菌數(shù)超標(biāo)。

2　活力的控制

精液冷凍后由兩人一組進(jìn)行凍后活力的初次檢測。檢測方法是同時(shí)解凍兩支混勻，用移液槍吸取7～8ul滴于載玻片上，蓋上蓋玻片置于37℃的載物臺上 （載玻片蓋玻片提前放置37℃載物臺上預(yù)熱）進(jìn)行觀察，每個(gè)鏡片取三個(gè)視野進(jìn)行活力檢測，取其平均活力評價(jià)值作為最終結(jié)果，而兩人一組的方法有效的避免了人為主觀因素對活力的誤判，減少誤差的發(fā)生。初步檢測合格精液放入儲藏室等待質(zhì)檢人員進(jìn)行質(zhì)檢，質(zhì)檢合格在進(jìn)行分裝后，對產(chǎn)品再一次進(jìn)行抽檢，經(jīng)過這三次活力的檢測確保精液活力合格。

3　有效精子數(shù)、劑量的控制

有效精子數(shù)由稀釋儀、密度分析儀來進(jìn)行分析，精密的儀器保證了每劑凍精中精子的總數(shù)，而嚴(yán)格把關(guān)活力則保證了每劑凍精中有效精子數(shù)。為確保儀器準(zhǔn)確性，避免出現(xiàn)錯(cuò)誤，生產(chǎn)人員需要每周對稀釋儀、密度分析儀進(jìn)行一次人工校對。校對需由兩人進(jìn)行，防止人為的誤差。對灌裝機(jī)每次使用完后進(jìn)行嚴(yán)格的清潔以及保養(yǎng)，確保了劑量的合格。

4　畸形率的控制

畸形率表面上人為控制不了，但是從精子畸形的形態(tài)可以分析出某些原因，比如采精的頻率，飼養(yǎng)水平等等，所以質(zhì)檢人員及時(shí)與生產(chǎn)管理人員溝通，根據(jù)每頭牛精子的形態(tài)情況及時(shí)調(diào)整某些牛的采精頻率以及營養(yǎng)水平。

在生產(chǎn)過程中,制定操作規(guī)程，要求操作人員嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作，每一道工序責(zé)任落實(shí)到人，并且定期培訓(xùn)，監(jiān)督，防止因?yàn)槿藛T操作不當(dāng)造成的質(zhì)量問題。

5　質(zhì)量檢測控制

定期檢測凍精的劑型、劑量、畸形率、有效精子數(shù)、細(xì)菌數(shù)、直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)，嚴(yán)格按照質(zhì)量檢測操作規(guī)程操作，質(zhì)檢所用儀器設(shè)備定期校對，自檢。質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行高于國家標(biāo)準(zhǔn)的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，任何一項(xiàng)指標(biāo)不合格，該產(chǎn)品即作廢處理，不讓一支不合格產(chǎn)品流入市場。檢測過程做好原始記錄，檢測人員、復(fù)核人員、檢測負(fù)責(zé)人簽字，最后出具檢測報(bào)告。同時(shí)在質(zhì)量檢測中使用精子分析系統(tǒng)進(jìn)行輔助檢測，檢測結(jié)果出具詳細(xì)的數(shù)據(jù)報(bào)告，質(zhì)檢結(jié)果更加客觀準(zhǔn)確，并且根據(jù)各項(xiàng)精子數(shù)據(jù)來隨時(shí)做好種公牛的飼養(yǎng)管理工作。

細(xì)節(jié)決定成敗，近幾年來，嚴(yán)格控制生產(chǎn)中的每一個(gè)環(huán)節(jié)，確保了凍精質(zhì)量，為牛品種改良和牛養(yǎng)殖戶繁殖率提高提供了質(zhì)量的保障。