黃健，陳明棠，覃廣勝，譚正準，李輝，趙朝步

（廣西水牛研究所，南寧 530001）

0 引言

現(xiàn)階段，國內(nèi)相關(guān)部門提高了對水牛業(yè)發(fā)展的重視，給予了水牛業(yè)較高的經(jīng)濟扶持，并且將擴大水牛奶業(yè)規(guī)模來作為鄉(xiāng)鎮(zhèn)經(jīng)濟發(fā)展的新項目，從而為水牛業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展提供了保障。然而因水牛本身生育能力的弱化，如晩發(fā)情、晚育、兩次生育時間過長、受孕率不高等特點，致使國內(nèi)水牛雜交優(yōu)化過程體現(xiàn)出優(yōu)良受精卵缺失的情況，要改善這樣的情況，就應(yīng)該合理運用先進的生物技術(shù)，以強化水牛的生育能力，以此保證水牛業(yè)的良好發(fā)展。

1 人工授精技術(shù)

國內(nèi)對育齡水牛實行人工授精技術(shù)，早在20世紀40年代就已開始。相關(guān)資料顯示，國內(nèi)相關(guān)部門所實行的水牛雜交改良優(yōu)化模式，不僅提高了各地區(qū)水牛的產(chǎn)奶量，而且水牛的肉質(zhì)大大提高[1]。

2 超數(shù)排卵和同期發(fā)情

在通常狀態(tài)下，水牛在發(fā)情期都只會產(chǎn)生一個卵子，養(yǎng)殖者借助對外源激素的運用，可以提高發(fā)情水牛的卵子產(chǎn)出個數(shù)，以促進仔牛產(chǎn)出量的提高，同時借助胚胎移植來促進良好基因類型的擴散。相對于奶牛來說，水牛發(fā)情時的卵泡數(shù)量往往會低30%，并且卵泡的閉鎖率也比奶牛高，更重要的是，水牛對促排卵激素的反應(yīng)也不明顯，所以仔牛產(chǎn)量的提升率也往往會低于奶?！，F(xiàn)階段，水牛的犢牛出生率盡管有明顯的提升，有效受精卵有時也會由原來的1個提升到3個，然而更多的情況下還是只有1個。常用于水牛超排的促性腺激素有PMSG（孕馬血清促性腺激素）和FSH （促卵胞素），F(xiàn)SH的超排效果優(yōu)于PMSG，每次超排獲得有效胚胎的數(shù)量是2.09∶0.56。同期發(fā)情技術(shù)便于掌握適時輸精，縮短發(fā)情配種時間，有利于提高人工授精配種受胎率和胚胎移植受胎率。我國相關(guān)部門對水牛同期發(fā)情技術(shù)的運用進行了全面的分析探索，并且將這種技術(shù)運用到了強化水牛生育能力的環(huán)節(jié)中，如GnRH法、孕酮法、2次PGF2α法、孕酮和ECG方法等。經(jīng)諸多分析實踐得出，在一般情況下，高質(zhì)量卵子與黃體并存時，就會明顯強化受孕率，尤其是對水牛的同期發(fā)情會起到很大的作用，在水牛發(fā)情期借助對孕酮的運用可強化生育能力。然而，從整體情況來分析，水牛同期發(fā)情技術(shù)的運用程度還需要強化。因為水牛對促排卵反應(yīng)力較差，再加上其發(fā)情的征兆也不明顯，所以排卵數(shù)量和同期發(fā)情的效果也不明顯。所以，就應(yīng)該建立較長時間的分析探索方案，以明確水牛排卵和發(fā)情的特點，以采取相應(yīng)的發(fā)情識別技巧[2]。

3 水牛胚胎體外生產(chǎn)

胚胎體外生產(chǎn)包括卵母細胞體外成熟、體外受精和體外胚胎培養(yǎng)。通過IVP可大量生產(chǎn)良種胚胎，是解決水牛品種改良過程中胚胎來源困難的一個有效途徑。胚胎體外生產(chǎn)的卵母細胞來源主要分為屠宰場卵巢和活體采卵。屠宰場卵巢容易獲得，但是由于系譜不明確，而且絕大部分為沼澤型水牛卵巢，因此對水牛品種改良的意義不大。OPU通過B型超聲波引導(dǎo)，經(jīng)子宮壁采集卵母細胞，可重復(fù)從遺傳價值高的水牛采集卵母細胞，與體外受精技術(shù)相結(jié)合可生產(chǎn)大量系譜明確的胚胎，從而充分利用優(yōu)良母畜的遺傳潛力。OPU與體外胚胎生產(chǎn)技術(shù)相結(jié)合，生產(chǎn)的可移植胚胎為超數(shù)排卵的2～3倍，每頭供體每月可生產(chǎn)更多的可移植胚胎（2.0±0.6枚），并可克服母畜生殖道疾病對胚胎質(zhì)量的影響。體外胚胎生產(chǎn)雖然也取得了一定的成績，但是水牛胚胎體外生產(chǎn)所需條件較高，需要專業(yè)的儀器設(shè)備進行操作，實質(zhì)上仍處于研究階段，還未能真正應(yīng)用于生產(chǎn)中。今后應(yīng)降低胚胎體外生產(chǎn)的成本，提高體外生產(chǎn)效率。目前正由專業(yè)的單位進行良種胚胎體外生產(chǎn)，而后將胚胎冷凍保存，提供給基層的水牛養(yǎng)殖戶進行移植生產(chǎn)[3]。

4 水牛胚胎移植

實行胚胎移植屬于提供排卵數(shù)量、人工授精以及體細胞移植的后續(xù)流程，對高素質(zhì)水牛的繁衍會起到不可替代的保障作用。那么在具體行動中，所要考慮的首要項目就是緩解供卵個體與受卵個體的同期發(fā)情的矛盾，廣泛運用的措施與供卵水牛發(fā)情期處理過程幾乎是一致的。胚胎移植的操作關(guān)鍵是將胚胎準確地輸入到卵巢有黃體的子宮角中。因水牛本身黃體表現(xiàn)征兆較為淡化，為后續(xù)促孕環(huán)節(jié)帶來了難度，更為受精卵的移植過程帶來較大難度。在通常情況下，水牛宮頸在發(fā)情時，就會封閉，為移植受精卵管線的插入帶來難度，并很有可能導(dǎo)致子宮明顯的損傷，從而弱化胚胎移植質(zhì)量和水平。如果要想改善這樣的局面，強化水牛的受孕能力，就應(yīng)該選取具備2次以上生產(chǎn)經(jīng)驗的水牛來作為受體接受胚胎移植。需要強調(diào)的是，如果所選的水牛，其本身素質(zhì)不符合相關(guān)標準，則很有可能會導(dǎo)致胚胎移植失敗的不良后果。現(xiàn)階段，國內(nèi)水牛胚胎移植的成功率通常僅達到10%左右，即使各方面基礎(chǔ)條件完備時，其成功率也只有40%～60%，更重要的是受體水牛在懷孕初期往往會出現(xiàn)較高的流產(chǎn)率，具體會達到50%左右。所以，就必須要制定并落實標準的母牛飼喂、養(yǎng)護方案，不僅如此，還需要實行受精卵相互影響和受精卵發(fā)育的分析探索，以強化水牛的受孕能力。

5 水牛胚胎冷凍

現(xiàn)代的受精卵冷凍技術(shù)完全能夠脫離時間和空間的制約，緩解母牛分娩與移植在時間以及空間受限的情況，達到對水牛受精卵進行異地移植的目標，并且還會對高質(zhì)量種源進行長久的貯存，有利于受精卵的傳遞，為水牛生物技術(shù)的廣泛宣傳和運用奠定了堅實基礎(chǔ)。然而現(xiàn)階段，水牛受精卵冷凍技術(shù)還沒能得到較大范圍的運用，在未來還必須要進行更大規(guī)模的水牛受精卵冷凍工作，并且以狀態(tài)維護劑、冷凍措施以及受精卵成長時期等環(huán)節(jié)作為著重點，明顯強化水牛受精卵的成活能力，強化對受精卵冷凍技術(shù)的運用程度[4]。

6 結(jié)束語

水牛業(yè)屬于人們實現(xiàn)經(jīng)濟目標的新項目，有著非常廣闊的發(fā)展前景。但是水牛的受孕期往往會有明顯的季節(jié)性，并且其發(fā)情表現(xiàn)也較為淡化，為發(fā)情識別提高了難度，并且在一定時期內(nèi)，發(fā)情次數(shù)少、受孕率小，這些客觀因素限制著水牛生育能力的強化。即使這樣，國內(nèi)相關(guān)部門還是對水牛的內(nèi)分泌進行了分析、探索，并且對水牛的各種繁殖技術(shù)進行了充分的探索，從而為水牛生育能力的強化提供了保障。