彭建偉

（河北省承德縣農(nóng)牧局，河北 承德 067400）

禽腺病毒是一種病原體，高度多樣性，可分為不同的亞群，包括四型腺病毒，火雞出血性腸炎、減蛋綜合征和包涵體肝炎等，

1 材料和方法

1.1 主要試劑

在廣東環(huán)凱微生物科技有限公司購(gòu)買的麥糠凱瓊脂平板和血平板；在天根化科技有限公司提取了基因組DNA；在北京全式金生物科技有限公司購(gòu)買Taq DNA聚合酶和NTPs；在廣州市凱秀貿(mào)易有效公司購(gòu)買了伊紅和蘇木。

1.2 樣品采集

解剖和檢查患病雞，觀察樣品的病變狀況；采集明顯病變的組織器官。

1.3 細(xì)菌分離

采集無(wú)菌肝臟和心包積液，分離麥康凱瓊脂平板和血平板，培養(yǎng)一天，再觀察結(jié)果。

1.4 病例組織學(xué)檢查

使用福爾馬林，固定已經(jīng)病變的肝組織，按照一定的方法制作石蠟切片，診斷HE染色組織病理。

1.5HCR監(jiān)測(cè)

按照 1：5 的比例，采集肝臟組織，滅菌 PBS（pH7.2），充分研磨，凍融3次，按照科學(xué)的方法，提取基因組DNA試劑，采用PCR技術(shù)檢測(cè)HPS。參考Hexon序列保守區(qū)設(shè)計(jì)1引用通用物，5’-AATTTCGCCATGACGGCCCA-3’為上游引物的序列，5’-TGGCGAACGGCGTACGGAAC-TA-3’為下游引物的序列，500bp是增加片段，PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?min 95℃預(yù)變性，45s 94℃變性，45s 53℃，1min 72℃，10min 72℃，共有35個(gè)循環(huán)期。

1.6 Hexon基因的序列檢測(cè)與分析

回收目的基因要按照AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒說(shuō)明書(shū)，并送于南京金斯瑞生物科技有限公司檢測(cè)，采用生物信息學(xué)軟件MEGA 4.1進(jìn)行分析，分離毒株，且對(duì)序列和遺傳進(jìn)化進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 剖檢病變

解剖和檢查患病雞，發(fā)現(xiàn)及肝臟表現(xiàn)出現(xiàn)血點(diǎn)，質(zhì)地非常脆，心包有很多積液腺胃出現(xiàn)了出現(xiàn)網(wǎng)格狀。

2.2 細(xì)菌分離

分離病料接種麥糠凱瓊脂培養(yǎng)基和血平板，分開(kāi)培養(yǎng)，時(shí)間1天，如果沒(méi)有發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)，可以排除細(xì)菌感染的狀況。

2.3 病理組織學(xué)診斷

采用福爾馬林，固定病變的肝臟，組織切片，在HE染色后，觀察病灶內(nèi)嗜堿性核內(nèi)包涵體。

2.4 PCR檢測(cè)和序列分析

電泳結(jié)果顯示，DNA模板是在病雞肝臟中提取，PCR增出特異性條帶，就證明雞群患有腺病毒的感染。

一般通過(guò)NCBI中的BLAST程序，驗(yàn)證Hexon基因的核苷酸，采用Lasergen 7.0軟件，分析序結(jié)果和GenBank，將其他禽腺病毒作同源性分析，病毒包括Hexon基因核苷酸和氨基酸序列。分析已經(jīng)分離的毒株，分析序列與遺傳進(jìn)化，分離株與FAdV-4型腺病毒有一個(gè)很高的同源性，此疫病的病原為AdV-4，命名為GDl601。

3 討論

禽腺病毒是一種傳染病原，一般出于家禽和野禽中，可分為I、Ⅱ、Ⅲ亞群腺病毒，Ⅱ亞群腺病毒是一種血性腸炎病毒，而Ⅲ亞群腺病毒是一種產(chǎn)蛋下降綜合征病毒，I亞群腺病毒是一種發(fā)病原，與血清型不同，也出現(xiàn)了相同的血清型不同毒株，引發(fā)疾病，甚至死亡。特異性病原是由HPS引起的FAdV-4，肝細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞從FAdV-4型腺病毒親嗜性，HPS的發(fā)生是因?yàn)镕AdV-4本身，在HPS頻發(fā)的地區(qū)，常有雞傳染性法氏囊病和雞傳染性貧血，兩者具有免疫和抑制作用，在免疫機(jī)能損傷的情況下，禽腺病毒很容易出現(xiàn)更強(qiáng)致病能力。因此，要提高雞群免疫機(jī)能，要加強(qiáng)強(qiáng)IBD疫苗免疫，這是防控HPS的主要措施。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，在建設(shè)中，智能建筑的建設(shè)要結(jié)合電氣自動(dòng)化的概述、自動(dòng)化控制系統(tǒng)的工作原理和自動(dòng)化控制系統(tǒng)的意義進(jìn)行分析，將電氣自動(dòng)化控制應(yīng)用在智能建筑中，需要配電系統(tǒng)智能化得到確保，自動(dòng)化系統(tǒng)的布線方式，超負(fù)荷故障的解決措施，樓宇自動(dòng)化，智能建筑通信系統(tǒng)和能源系統(tǒng)要點(diǎn)等，提高我國(guó)電力自動(dòng)化安全和穩(wěn)定的同時(shí)，從而提高我國(guó)電力行業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。

[1]楊瑞，等.一例肉雞心包積液綜合征的診斷[J].中國(guó)家禽，2016，38(21)：68-70.

[2]牛玉娟，等.雞肝炎-心包積液綜合征的病理學(xué)診斷[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2017，37(6)：1111-1114.