張 波， 榮立蘋(píng)

(1.金陵科技學(xué)院園藝學(xué)院，江蘇南京 210038； 2.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林延吉 133002)

玉露(HaworthiacooperiBaker)為百合科十二卷屬多肉植物[1]，其肉質(zhì)葉通透似玉、晶瑩圓潤(rùn)，如同藝術(shù)品般可擺放于陽(yáng)臺(tái)或書(shū)桌上，因此，備受多肉植物愛(ài)好者的歡迎。玉露園藝品種繁多，因其葉色晶瑩剔透且富于變化而受到人們的追捧，從而導(dǎo)致行情火爆、價(jià)格偏高[2]。

霓虹燈玉露是多肉植物中的經(jīng)典品種，源自南非原始種大衛(wèi)玉露和冰燈玉露雜交的錦斑變異。該品種以大而透亮的窗、光滑呈紫黑色的葉片，以及色彩斑斕的錦斑而具有極高的觀賞價(jià)值。霓虹燈玉露目前主要采用扦插繁殖，較低的繁殖系數(shù)導(dǎo)致其僅有較少的市場(chǎng)存量，因而其價(jià)格持續(xù)走高[3]。研究表明，不同多肉植物根據(jù)自身特性，可以用不同的誘導(dǎo)方式以及增殖手法來(lái)進(jìn)行組培擴(kuò)繁[4]。本試驗(yàn)以霓虹燈玉露為材料，試圖建立該珍稀多肉植物的組織培養(yǎng)與快速擴(kuò)繁體系，為其規(guī)?；N苗繁殖提供技術(shù)支撐，滿足多肉愛(ài)好者的市場(chǎng)需求。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)材料為珍稀多肉植物霓虹燈玉露的幼嫩花莖。

1.2 方法

1.2.1 無(wú)菌材料的獲得 將選取的培養(yǎng)材料用流水沖洗 2 h，用濾紙吸干水分后先用1%次氯酸鈉浸泡3 min，并用無(wú)菌水沖洗3～4次，然后用75%乙醇浸泡10 s，用無(wú)菌水沖洗3～4次。將消毒后的材料置于無(wú)菌濾紙上，剪切成 1 cm 左右的小段。

1.2.2 培養(yǎng)基的篩選 針對(duì)不同培養(yǎng)階段，分別設(shè)置9個(gè)不同類型的培養(yǎng)基，其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+NAA(0.1、0.2、0.3 mg/L)+6-BA(2.0、3.0、4.0 mg/L)；增殖培養(yǎng)基為MS+NAA(0.1、0.2、0.3 mg/L)+6-BA(0.5、0.8、1.0 mg/L)；生根培養(yǎng)基為MS+NAA(0.1、0.2、0.3 mg/L)+6-BA(0.1、0.3、0.5 mg/L)。以MS培養(yǎng)基作對(duì)照，每種培養(yǎng)基接20瓶，每瓶接種3個(gè)，30 d統(tǒng)計(jì)生長(zhǎng)情況，篩選出適合的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基。其中誘導(dǎo)率=誘導(dǎo)出芽的外植體數(shù)/外植體總數(shù)×100%；增殖系數(shù)=產(chǎn)生的新苗數(shù)/接種苗數(shù)；生根率=生根苗數(shù)/接種苗數(shù)×100%；平均根數(shù)=總根數(shù)/接種苗數(shù)。

1.2.3 培養(yǎng)條件 培養(yǎng)基均添加蔗糖30 g/L、瓊脂5 g/L，調(diào)節(jié)pH值至5.8～5.9，配制分裝后121 ℃高壓滅菌20 min；培養(yǎng)溫度(24±1) ℃，光照時(shí)間10 h/d，光照度 2 000 lx。

2 結(jié)果與分析

2.1 誘導(dǎo)分化

將外植體接種到9種不同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，7 d后發(fā)現(xiàn)部分外植體切面開(kāi)始逐漸膨大，但是沒(méi)有愈傷組織形成；約21 d后逐漸形成綠色、蓬松的顆粒狀愈傷組織；約28 d后顆粒狀愈傷組織表面出現(xiàn)圓形隆起并陸續(xù)分化為幼小芽體，芽體逐步變大(圖1)。

從表1可以看出，不同濃度的NAA和6-BA配比對(duì)霓虹燈玉露花莖誘導(dǎo)分化有明顯影響，當(dāng)培養(yǎng)基為MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 3.0 mg/L時(shí)，誘導(dǎo)率最高為97.78%，顯著高于其他培養(yǎng)基，是最適合霓虹燈玉露的誘導(dǎo)培養(yǎng)基。

表1 不同激素配比對(duì)霓虹燈玉露花莖誘導(dǎo)分化的影響

2.2 增殖培養(yǎng)

從表2可見(jiàn)，將誘導(dǎo)出的芽轉(zhuǎn)接到不同增殖培養(yǎng)基上，14 d 后開(kāi)始形成叢生芽。培養(yǎng)基為MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA時(shí)，增殖倍數(shù)達(dá)到8.41，顯著高于除處理2以外的其他培養(yǎng)基。因此，MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L6-BA是最適宜霓虹燈玉露快速繁殖的增殖培養(yǎng)基。

表2 不同激素配比對(duì)霓虹燈玉露增殖培養(yǎng)的影響

2.3 生根培養(yǎng)

將增殖培養(yǎng)產(chǎn)生的叢生苗分割，轉(zhuǎn)接到9種不同的生根培養(yǎng)基上，約30 d后開(kāi)始生根，當(dāng)NAA濃度為0.3 mg/L、6-BA 濃度為0.3 mg/L時(shí)，幼苗生根率最高，達(dá)100%，且每個(gè)苗可生成4～6條根(圖2、表3)，是最佳的生根培養(yǎng)基。當(dāng)苗生長(zhǎng)健壯，在葉片頂端形成該品種所特有的“窗”(葉子頂端透明的部分)之后即可移栽。

2.4 馴化移栽

打開(kāi)瓶蓋煉苗3～5 d后，取出洗凈根部瓊脂，置于通風(fēng)干燥處風(fēng)干，然后栽入滅菌好的基質(zhì)(草炭、蛭石體積比= 3 ∶1)，待其長(zhǎng)出新根。移栽后基質(zhì)應(yīng)保持濕潤(rùn)，避免積水，以

表3 不同激素配比對(duì)霓虹燈玉露試管苗生根培養(yǎng)的影響

防爛根；玉露對(duì)光線較敏感，應(yīng)放在低光照、陰涼的通風(fēng)透氣處，避免陽(yáng)光直射。每月可以施1次稀薄液肥，施肥時(shí)間宜選擇天氣晴朗的上午或傍晚。約30 d后玉露幼苗可形成新根并開(kāi)始正常生長(zhǎng)，成活率可達(dá)90%以上。

3 討論與結(jié)論

在進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)過(guò)程中，外植體的選擇非常關(guān)鍵，葉片、花序和種子均可。相關(guān)研究表明，花序?yàn)樽钸m外植體，取材方便，不傷害母本，滅菌效果好，愈傷組織誘導(dǎo)率和叢生芽分化率高，獲得的種苗完全保留了母本的優(yōu)良性狀[5-7]。本試驗(yàn)也采用花序作為外植體進(jìn)行快繁，并取得了成功，證明花序是十二卷屬玉露組培快繁較為理想的材料。

霓虹燈玉露作為一種珍稀的多肉植物，具有非常高的觀賞價(jià)值和市場(chǎng)前景。為了保持玉露的優(yōu)良性狀，通常采用葉插和底座繁殖等無(wú)性繁殖方式，這些繁殖方法容易損害母本，且繁殖系數(shù)小、繁殖速度慢，導(dǎo)致玉露價(jià)格居高不下[8-9]。組織培養(yǎng)是快速繁殖的最有效方法[7]。本研究利用組織培養(yǎng)方法成功獲得了霓虹燈玉露的組培苗，建立了優(yōu)質(zhì)組培苗工廠化生產(chǎn)程序，能批量供應(yīng)優(yōu)質(zhì)再生種苗；同時(shí)為玉露系多肉植物的組培苗規(guī)模化生產(chǎn)提供了參考，具有較好應(yīng)用前景。