張琦，帥訓(xùn)軍，侯念果，艾登斌*

（1泰山醫(yī)學(xué)院研究生院臨床麻醉學(xué)教研室，泰安，271000；2山東省青島市市立醫(yī)院麻醉科，山東省青島市臨床麻醉研究中心，青島，266000）

近年來(lái)臨床危重病如燒傷、創(chuàng)傷、感染、敗血癥、肺炎、誤吸胃內(nèi)容物、毒性物質(zhì)攝入、胰腺炎、出血性休克等發(fā)病率不斷提高，患者全身炎癥反應(yīng)細(xì)胞介導(dǎo)彌漫性肺損害，并發(fā)急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征（acute lung injury / acute respiratory distress syndrome，ALI/ARDS），嚴(yán)重危害患者健康。ALI/ARDS的急性期病理表現(xiàn)為急劇彌漫性大量中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞聚集、浸潤(rùn)肺泡組織，導(dǎo)致肺泡毛細(xì)血管內(nèi)皮、肺泡上皮通透性增加，血液中細(xì)胞、蛋白質(zhì)等流體成分滲入間質(zhì)間隙、肺泡腔，肺組織順應(yīng)性持續(xù)降低，引起非心源性肺水腫[1]?；颊吲R床表現(xiàn)為難治性低氧血癥和致命性呼吸衰竭[2]。目前大多采取保護(hù)性肺通氣、保護(hù)性液體治療、細(xì)胞因子和內(nèi)毒素拮抗劑、血濾以及抗生素等對(duì)癥治療策略緩解患者急性期的臨床癥狀，無(wú)法從根本上實(shí)現(xiàn)結(jié)構(gòu)重建、恢復(fù)正常的氣體交換。這不僅增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，也給社會(huì)造成巨大壓力[3]。免疫原性極低的干細(xì)胞，因其對(duì)ALI/ARDS的“拯救”作用逐漸引起學(xué)者重視，現(xiàn)主要針對(duì)干細(xì)胞如何在ALI/ARDS治療過(guò)程中所發(fā)揮作用及其機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)定義

由于迄今為止尚未發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSC）特異性的表面標(biāo)志物，因此2006年國(guó)際細(xì)胞治療協(xié)會(huì)通過(guò)了沿用至今的3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，賦予MSC準(zhǔn)確的定義：①在標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)條件下，MSC必須貼壁生長(zhǎng)；② MSC細(xì)胞表面必須表達(dá)CD105、CD90和CD73等標(biāo)志物，但不能夠表達(dá)CD45、CD34、CD14和CD11b；③在體外培養(yǎng)條件下，MSC必須具有分化為間充質(zhì)細(xì)胞譜系的能力，包括成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成神經(jīng)細(xì)胞[4]。鑒于實(shí)驗(yàn)技術(shù)的不斷提高，目前已從多種組織中成功分離出MSC，主要包括臍帶血、胎盤(pán)、脂肪和肺組織。研究表明，MSC不具備胚胎干細(xì)胞的可塑性，僅能分化為成纖維細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成肌細(xì)胞和上皮細(xì)胞[5]等細(xì)胞譜系。由于MSC免疫原型極低，易分離、培養(yǎng)，臨床使用過(guò)程中并不涉及類(lèi)似于胚胎干細(xì)胞常常引起的倫理問(wèn)題，因此過(guò)去幾年圍繞干細(xì)胞展開(kāi)大量研究，MSC在人類(lèi)成骨不全、骨關(guān)節(jié)炎、移植物抗宿主病、克羅恩氏病、慢性阻塞性肺疾病、急性心肌梗塞、糖尿病、缺血性心力衰竭、肝功能衰竭以及急性腎功能衰竭等疾病具有潛在的治療作用[6]。有趣的是，脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的ALI/ARDS動(dòng)物靜脈注射MSC后，其優(yōu)先歸巢于受損嚴(yán)重的肺組織，與在肺組織正常的陰性對(duì)照組相比，MSC在ALI/ARDS動(dòng)物肺組織存活時(shí)間明顯延長(zhǎng)。

2 間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性肺損傷的機(jī)制

來(lái)源于肺內(nèi)、外的干/祖細(xì)胞群可以在呼吸道各個(gè)部位再生出肺泡上皮和血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過(guò)旁分泌或內(nèi)分泌方式釋放：①可溶性生長(zhǎng)因子，促進(jìn)肺泡上皮細(xì)胞生長(zhǎng)；②抗炎細(xì)胞因子抑制炎癥反應(yīng)，抗菌、抗微生物肽等細(xì)胞成分直接殺滅肺組織局部的細(xì)菌；③調(diào)節(jié)先天性和適應(yīng)性免疫的細(xì)胞因子、調(diào)節(jié)肺泡上皮和肺內(nèi)皮細(xì)胞通透性的細(xì)胞因子，在ALI/ARDS的治療中發(fā)揮其強(qiáng)大的作用。

2.1 微泡的生物學(xué)功能

MSC腹腔內(nèi)給藥減輕了LPS誘導(dǎo)的肺部炎癥反應(yīng)，而僅有不足1%的MSC定植于肺組織，說(shuō)明其抗炎作用并非依賴(lài)于其局限性的定位于肺組織，而主要通過(guò)釋放旁分泌可溶性因子來(lái)介導(dǎo)[7]。Wang及其同事經(jīng)實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論：移植到ALI小鼠肺部的MSC，可恢復(fù)肺內(nèi)皮細(xì)胞通透性、清除肺泡腔滲出液，同時(shí)發(fā)揮抗感染作用[8]。已知經(jīng)氧糖剝奪，可以刺激MSC釋放跟細(xì)胞本身一樣具有生物活性、直徑50～200nm之間的無(wú)核質(zhì)膜結(jié)合片段，這些片段即為微泡（microvesicle, MV）。MV作為外泌體，從多種細(xì)胞類(lèi)型的胞質(zhì)隔室內(nèi)組成性釋放或者直接從質(zhì)膜上脫落。與干細(xì)胞類(lèi)似，微泡主動(dòng)性歸巢于肺組織炎癥部位。肺泡上皮細(xì)胞通過(guò)CD44受體介導(dǎo)的攝取作用將MV內(nèi)化，MV將其裝載的具有修復(fù)損傷和抗炎特性的蛋白質(zhì)、多肽、mRNA、microRNA、脂質(zhì)和線(xiàn)粒體等細(xì)胞器轉(zhuǎn)移至受損上皮細(xì)胞內(nèi)行使功能[9]，事實(shí)上MSC分泌的MV在受損肺組織發(fā)揮與MSC相同的治療作用。Camussi及其同事通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出：MV將mRNA和microRNA轉(zhuǎn)移至受損腎小管上皮細(xì)胞介導(dǎo)保護(hù)作用，減少受損的腎小管上皮細(xì)胞凋亡[10]。

2.2 角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生物學(xué)作用

對(duì)MV內(nèi)mRNA進(jìn)行RT-PCR實(shí)驗(yàn)分析顯示，角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子(keratinocyte growth factor，KGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor，HGF）和血管生成素-1（angiopoietin-1，Ang-1）的mRNA含量豐富。KGF siRNA預(yù)處理MSC，其釋放的MV治療效果下降，表明KGF蛋白表達(dá)在MV的治療機(jī)制中作用重大[11]。KGF是一種強(qiáng)有效的上皮組織特異性促分裂原和分化因子。KGF提高II型肺泡上皮細(xì)胞有絲分裂活性，刺激細(xì)胞增值、分化以及DNA修復(fù)，提高肺泡上皮脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和肺泡表面活性劑的分泌、鈉和氯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的轉(zhuǎn)錄和翻譯，抑制受損肺泡上皮以及內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。

KGF是負(fù)責(zé)維持內(nèi)皮屏障穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵介質(zhì)，Lee及其同事發(fā)現(xiàn)提高人MSC（hMSC）分泌KGF的功能，有助于受損肺泡內(nèi)的液體清除[12]。KGF通過(guò)FGF-2絡(luò)氨酸激酶受體（FGFR2-IIIb）作用于肺泡上皮細(xì)胞，增加肺泡上皮細(xì)胞鈉離子通道、血管生成素-1和鈉-鉀-ATP酶的活性及肺泡內(nèi)液體轉(zhuǎn)運(yùn)能力，減輕ALI/ARDS導(dǎo)致的肺水腫[13]。Aguilar等人發(fā)現(xiàn)用四環(huán)素誘導(dǎo)KGF構(gòu)建體轉(zhuǎn)染MSC后，保護(hù)博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化小鼠的肺功能。Le將重組的DN23-KGF經(jīng)氣管內(nèi)滴注實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，增強(qiáng)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和TGF-β的生成，提高肺組織再生修復(fù)[14]功能。Tong及其同事發(fā)現(xiàn)KGF-2通過(guò)PI3K和P42/44 MAP激酶途徑誘導(dǎo)ATII增值[15]。通過(guò)Poly(I:C)處理的MV進(jìn)一步增加KGF的分泌，提高M(jìn)V降低LPS誘導(dǎo)小鼠ALI的支氣管肺泡灌洗液中的細(xì)菌計(jì)數(shù)的作用[16]。Wu在小鼠肺炎模型中，KGF刺激肺泡上皮細(xì)胞分泌粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF），增加巨噬細(xì)胞向肺泡區(qū)域的募集性，啟動(dòng)STAT5磷酸化，激活并增強(qiáng)肺泡巨噬細(xì)胞對(duì)革蘭氏陰性菌的吞噬活性、氧化劑反應(yīng)和滅菌作用。KGF還以劑量依賴(lài)性方式增加AKT磷酸化，降低血液?jiǎn)魏思?xì)胞的乳酸脫氫酶（LDH）釋放量，綜上，KGF在抗肺泡上皮細(xì)胞凋亡的同時(shí)還增加細(xì)菌的清除率[17]。

2.3 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生物學(xué)作用

經(jīng)過(guò)低氧培養(yǎng)和LPS刺激放大MSC旁分泌HGF的作用，提高其改善肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性、降低免疫細(xì)胞從血液到肺間質(zhì)和肺泡的浸潤(rùn)程度[18]的效果。HGF誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、促血管生成，抑制Rho GTPase以提高肺內(nèi)皮細(xì)胞穩(wěn)定性、完整性，抑制細(xì)胞凋亡。HGF改善肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HMVEc）的蛋白質(zhì)通透性，修復(fù)細(xì)胞間緊密連接和內(nèi)皮細(xì)胞的連接點(diǎn)，還原細(xì)胞骨架[19]。HGF降低TNF-α、IL-6和細(xì)胞間黏附分子-1的分泌和表達(dá)。HGF增加抗炎細(xì)胞因子IL-10、Bcl-2的表達(dá)，抑制Caspase 3的激活來(lái)提高M(jìn)SCs在肺組織的存活率[20]。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)HGF降低轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子b、Colla1（1型膠原，a1）等導(dǎo)致組織纖維化的細(xì)胞因子的表達(dá)，抑制纖維化的進(jìn)展和凝血酶損傷后的肺內(nèi)皮細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白應(yīng)力纖維的形成[21]，改善高氧誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激、放射性損傷嚙齒動(dòng)物模型中肺、支氣管等結(jié)構(gòu)的異常發(fā)育[22]。HGF激活SPK后釋放磷酸肌醇3-激酶、啟動(dòng)EPK/MAPK途徑，產(chǎn)生生物活性脂質(zhì)SIP并激活其下游信號(hào)。Wang研究發(fā)現(xiàn)MSC-HGF增加SIPR1在肺中的表達(dá)，而SIP1在血管生成、血管成熟以及免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞的運(yùn)輸、內(nèi)皮屏障功能、維持血管壁張力等方面起關(guān)鍵作用[23]。SIP/ SIPR1參與HGF/cMet介導(dǎo)的抗炎和抗纖維化反應(yīng)，通過(guò)基因治療改善放射性肺損傷導(dǎo)致的肺部炎癥因子浸潤(rùn)、減少促纖維化因子的分泌，抑制肺纖維化?；蛐揎椇筮^(guò)表達(dá)HGF的MSC可以預(yù)防博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化、高原性肺水腫、LPS、機(jī)械通氣或者缺血再灌注誘導(dǎo)的肺損傷，有望提供治療心臟、肝臟、腸和肺等損傷的新手段。值得注意的是，KGF只在肺組織受傷之前或者受傷同時(shí)使用才有效。

2.4 血管生成素-1的生物學(xué)作用

MSC還分泌大量Ang-1，參與恢復(fù)肺泡上皮完整性、穩(wěn)定血管、抗炎、抗?jié)B透。Ang-1的本質(zhì)是配體絡(luò)氨酸激酶Tie2的受體，Tie2調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞遷移、促進(jìn)血管形成、穩(wěn)定新形成的血管。Tie蛋白存在于成人靜止的上皮細(xì)胞內(nèi)，Ang-1與Tie2結(jié)合后迅速介導(dǎo)受體磷酸化，參與維持細(xì)胞靜息和存活狀態(tài)[24]。研究證實(shí)，Ang-1在胚胎血管發(fā)育中起重要作用，在個(gè)體出生后，Ang-1負(fù)責(zé)穩(wěn)定靜息血管表型，因而也被稱(chēng)為內(nèi)皮存活和血管穩(wěn)定因子。通過(guò)修飾內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)和細(xì)胞間連接來(lái)降低內(nèi)皮細(xì)胞通透性，抑制白細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞相互作用[25]。

肺泡上皮由90% ATI和10%ATII組成，ATII合成表面活性蛋白、轉(zhuǎn)運(yùn)鈉和氯離子，清除肺泡內(nèi)液體。正常情況下肺泡上皮細(xì)胞間單層細(xì)胞連接比內(nèi)皮細(xì)胞的連接更緊密，ATI、ATII之間的細(xì)胞骨架的主要為緊密連接、粘附連接和橋粒組成細(xì)胞連接復(fù)合物，形成物理屏障，限制蛋白質(zhì)、脂質(zhì)擴(kuò)散，維持肺泡上皮的屏障特性[26]。而上皮屏障功能障礙直接引起富含蛋白質(zhì)的水腫液、炎癥細(xì)胞在肺泡聚集。Ang-1提高肌動(dòng)蛋白等細(xì)胞骨架的重建，恢復(fù)ATII的通透性。

2.5 線(xiàn)粒體的生物學(xué)作用

線(xiàn)粒體是細(xì)胞發(fā)生氧化磷酸化的能量工廠(chǎng)，參與細(xì)胞間、細(xì)胞內(nèi)的信息傳遞的同時(shí)，為細(xì)胞新陳代謝提供能量。通過(guò)減輕細(xì)胞內(nèi)的鈣超載，穩(wěn)定線(xiàn)粒體膜電位可以提高線(xiàn)粒體的活性，改善ATP酶和線(xiàn)粒體呼吸鏈酶復(fù)合體活性。線(xiàn)粒體是氧自由基（ROS）的產(chǎn)生場(chǎng)所，功能受損后將釋放大量具有殺傷力的氧自由基，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。研究表明，ALI/ARDS炎癥反應(yīng)的早期階段即出現(xiàn)顯著的線(xiàn)粒體功能失調(diào)、結(jié)構(gòu)改變，產(chǎn)生大量氧自由基（ROS），導(dǎo)致生物膜脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNA發(fā)生過(guò)氧化，最終啟動(dòng)細(xì)胞凋亡通路，造成組織嚴(yán)重?fù)p傷。Wang及其同事通過(guò)光學(xué)顯微技術(shù)發(fā)現(xiàn)LPS誘導(dǎo)ALI小鼠的線(xiàn)粒體，從MSC轉(zhuǎn)移至肺上皮細(xì)胞[23]，與LPS感染后滴注MSC相比，在LPS感染之前滴注MSC提高了受損肺組織再生率、肺部保護(hù)劑的分泌量以及受損上皮細(xì)胞內(nèi)抗氧化劑如SOD、GPX、CAT和GR的正常活性和分泌計(jì)量。

Vallabhaneni[27]及其同事發(fā)現(xiàn)，MSC在體外與肺泡上皮細(xì)胞通過(guò)交換肌動(dòng)蛋白微粒從而形成由Cx43組成的隧道納米管（TNT），同時(shí)MSC細(xì)胞內(nèi)也形成TNT以運(yùn)送包裹線(xiàn)粒體的微泡（MV）。MV不僅先于TNT之前形成，而且參與TNT的形成過(guò)程[28]。Islam[29]及其同事發(fā)現(xiàn)，向LPS損傷后的小鼠氣管內(nèi)滴注BMSC，其更傾向于歸巢于高表達(dá)Cx43的肺泡上皮細(xì)胞區(qū)域。鈣離子作為啟動(dòng)信號(hào)啟動(dòng)BMSC形成裝載線(xiàn)粒體的MV，MV參與形成TNT并向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)。Ahmad[30]及其同事發(fā)現(xiàn)一種鈣敏感銜接蛋白Miro1，其本質(zhì)是線(xiàn)粒體Rho-GTPase,Miro1通過(guò)Miro2、TRAK1、TRAK2等一系列輔助蛋白，將線(xiàn)粒體附著于KIF5運(yùn)動(dòng)蛋白和Myo19，加速其從MSC向上皮細(xì)胞（EC）移動(dòng)。Chang[31]發(fā)現(xiàn)Miro1提高線(xiàn)粒體攝取鈣離子的速度，高濃度鈣離子加速線(xiàn)粒體沿細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間納米微管（TNT）移動(dòng)。通過(guò)光學(xué)實(shí)驗(yàn)只觀(guān)察到線(xiàn)粒體從MSC轉(zhuǎn)移至肺泡上皮細(xì)胞（EC），至今尚未發(fā)現(xiàn)線(xiàn)粒體的逆轉(zhuǎn)運(yùn)，表明線(xiàn)粒體的轉(zhuǎn)移具有方向性。線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)運(yùn)至EC為細(xì)胞新陳代謝提供能量，降低受損細(xì)胞內(nèi)活性氧含量，阻止細(xì)胞凋亡。

3 問(wèn)題與展望

誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的ALI/ARDS模型不能完全復(fù)制人類(lèi)患者臨床ALI/ ARDS的復(fù)雜性。盡管目前尚未在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)致命的免疫排斥反應(yīng)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)向臨床試驗(yàn)過(guò)渡還存在不可預(yù)測(cè)的安全隱患。由于對(duì)MSC的認(rèn)識(shí)尚存在著局限性，擁有強(qiáng)大的自我更新以及多向分化潛能的MSC歸巢于受損肺泡上皮細(xì)胞后，發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫、抗炎以及抗纖維化作用所涉及的分子機(jī)制和信號(hào)途徑仍不明確[32]，除此之外仍需對(duì)其安全性、最佳治療時(shí)間窗、最適治療劑濃度及劑量進(jìn)行深入研究，同時(shí)干細(xì)胞分離、培養(yǎng)技術(shù)有待規(guī)范和提高。綜上所述，我們寄希望于MSC為ALI/ARDS的治療帶來(lái)全新的應(yīng)用前景和曙光的同時(shí)，也相應(yīng)面臨了一系列需要我們克服的現(xiàn)實(shí)困難。面對(duì)這些新的挑戰(zhàn)，任然需要繼續(xù)開(kāi)展更多的臨床試驗(yàn)，廣大研究者仍需刻苦鉆研以取得新突破。

[1] Hu S, Li J, Xu X, et al. The hepatocyte growth factor-expressing character is required for mesenchymal stem cells to protect the lung injured by lipopolysaccharide in vivo. Stem Cell Res Ther, 2016, 7(1): 66.

[2] Zhang S, Danchuk SD, Imhof KM, et al. Comparison of the therapeutic effects of human and mouse adipose-derived stem cells in a murine model of lip opolysaccharide-induced acute lung injury. Stem Cell Res Ther, 2013, 4(1): 13.

[3] Bruno S, Grange C, Collino F, et al. Microvesicles derived from mesenchymal stem cells enhance survival in a lethal model of acute kidney injury. PLoS One, 2012, 7(3):e33115.

[4] Dominici M, Le Blanc K, Mueller I, et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy, 2006, 8(4): 315-317.

[5] Matthay MA, Thompson BT, Read EJ, et al. Therapeutic potential of mesenchymal stem cells for severe acute lung injury. Chest, 2010, 138(4): 965-972.

[6] Lee RH, Pulin AA, Seo MJ, et al. Intravenous hMSCs improve myocardial infarction in mice because cells embolized in lung are activated to secrete the anti-in fl ammatory protein TSG-6. Cell Stem Cell, 2009, 5(1): 54-63.

[7] Danchuk S, Ylostalo JH, Hossain F, et al. Human multipotent stromal cells attenuate lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice via secretion of tumor necrosis factor-α-induced protein 6. Stem Cell Res Ther, 2011, 2(3):27.

[8] Wang YY, Li XZ, Wang LB, et al. Therapeutic implications of mesenchymal stem cells in acute lung injury/acute respiratory distress syndrome. Stem Cell Res Ther, 2013, 4(3): 45.

[9] Ratajczak MZ. The emerging role of microvesicles in cellular therapies for organ/tissue regeneration. Nephrol Dial Transplant, 2011, 26(5): 1453-1456.

[10] Camussi G, Deregibus MC, Cantaluppi V, et al. Role of stem-cell-derived microvesicles in the paracrine action of stem cells. Biochem Soc Trans, 2013, 41(1): 283-287.

[11] Zhu YG, Feng XM, Abbott J, et al. Human mesenchymal stem cell microvesicles for treatment of Escherichiacoli endotoxin-induced acute lung injury in mice. Stem Cells, 2014, 32(1): 116-125.

[12] Lee JW, Fang X, Gupta N, et al. Allogeneic human mesenchymal stem cells for treatment of E. coli endotoxin-induced acute lung injury in the ex vivo perfused human lung. Proc Natl Acad Sci USA, 2009, 106(38): 16357-16362.

[13] Sartori C, Matthay MA. Alveolar epithelial fluid transport in acute lung injury: new insights. Eur Respir J, 2002, 20(5): 1299–1313.

[14] Le Blanc K, Tammik C, Rosendahl K, et al. HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells. Exp Hematol, 2003, 31(3): 890-896.

[15] Portnoy J, Curran-Everett D, Mason RJ, et al. Keratinocyte growth factor stimulates alveolar type II cell proliferation through the extracellular signal-regulated kinase and phosphatidylinositol 3-OH kinase pathways. Am J Respir Cell Mol Biol, 2004, 30(6): 901-907.

[16] Monsel A, Zhu YG, Gennai S, et al. Therapeutic Effects of Human Mesenchymal Stem Cell-derived Microvesicles in Severe Pneumonia in Mice. Am J Respir Crit Care Med, 2015, 192(3): 324-336.

[17] Aggarwal S, Pittenger MF. Human mesenchymal stem cells modulate allogeneic immune cell reponses.Blood, 2005, 105(4):1815–1822.

[18] Chen QH, Liu AR, Qio HB, et al. Interaction between mesenchymal stem cells and endothelial cells restores endothelial permeability via paracrine hepatocyte growth factor in vitro. Stem Cell Res Ther, 2015, 6(1): 44.

[19] Higginbotham K, Tian Y, Gawlak G, et al. Hepatocyte growth factor triggers distinct mechanisms of Asef and Tiam1 activation to induce endothelial barrier enhancement. Cell Signal, 2014, 26(11): 2306-2316.

[20] Chen S, Chen X, Wu X, et al. Hepatocyte growth factor-modified mesenchymal stem cells improve ischemia/reperfusion-induced acute lung injury in rats. Gene Ther, 2017, 24(1): 3-11.

[21] Birukova AA, Alekseeva E, Mikaelyan A, et al. HGF attenuates thrombin-induced endothelial permeability by Tiam1-mediated activation of the Rac pathway and by Tiam1/Rac-dependent inhibition of the Rho pathway. FASEB J, 2007, 21(11): 2776-2786.

[22] Aslam M, Baveja R, Liang OD, et al. Bone marrow stromal cells attenuate lung injury in a murine model of neonatal chronic lung disease. Am J Respir Crit Care Med, 2009, 180(11): 1122-1130.

[23] Hua W, Yang YF, Zhao L, et al. Hepatocyte Growth Factor Gene-Modi fi ed Mesenchymal Stem Cells Reduce Radiation-Induced Lung Injury. Hum Gene Ther, 2013, 24(3): 343-353.

[24] Fang X, Neyrinck AP, Matthay MA, et al. Allogeneic human mesenchymal stem cells restore epithelial proteinpermeability in cultured human alveolar type II cells by secretion of angiopoietin-1. J Biol Chem, 2010, 285(34): 26211-26222.

[25] Gamble JR, Drew J, Trezise L, et al. Angiopoietin-1 is an antipermeability and anti-in fl ammatory agent in vitro and targets cell junctions. Circ Res, 2000, 87(7): 603-607.

[26] Harhaj NS, Antonetti DA. Regulation of tight junctions and loss of barrier function in pathophysiology. Int J Biochem Cell Biol, 2004, 36(7): 1206-1237.

[27] Vallabhaneni KC, Haller H, Dumler I, et al. Vascular Smooth Muscle Cells Initiate Proliferation of Mesenchymal Stem Cells by Mitochondrial Transfer via Tunneling Nanotubes. Stem Cells Dev, 2012, 21(17): 3104-3113.

[28] Liu K, Ji K, Guo L, et al. Mesenchymal stem cells rescue injured endothelial cells in an in vitro ischemia–reperfusion model via tunneling nanotube like structure-mediated mitochondrial transfer. Microvasc Res, 2014, 92: 10-18.

[29] Islam MN, Das SR, Emin MT, et al. Mitochondrial transfer from bone-marrow-derived stromal cells to pulmonary alveoli protects against acute lung injury. Nat Med, 2012, 18(5): 759-765.

[30] Ahmad T, Mukherjee S, Pattnaik B, et al. Miro1 regulates intercellular mitochondrial transport & enhances mesenchymal stem cell rescue efficacy. EMBO J, 2014, 33(9): 994-1010.

[31] Chang KT, Niescier RF, Min KT, et al. Mitochondrial matrix Ca2+ as an intrinsic signal regulating mitochondrial motility in axons. Proc Natl Acad Sci USA, 2011, 108(37): 15456-15461.

[32] Wecth S, Rojas M. Mesenchymal stem cells in the treatment of chronic lung disease. Respirology, 2016, 21(8): 1366-1375.