徐晶晶,蒲敬偉
(新疆生產建設兵團第十二師畜牧獸醫(yī)工作站,新疆 烏魯木齊 830009)
豬弓形體病,又稱為弓漿蟲病或弓形蟲病,是由弓形體感染動物和人而引起人畜共患的原蟲病。本病以高熱、呼吸及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、豬只死亡和懷孕母豬流產、死胎、胎兒畸形為主要特征。弓形蟲可致母豬流產和仔豬生長發(fā)育不良,給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。由于豬是弓形蟲重要的中間宿主,通過攝食未煮熟的含包囊的豬肉制品可使人感染弓形蟲病,從而嚴重影響豬肉品質并威脅人類的身體健康。應用弓形體膠體金快速檢測卡操作簡單,敏感性和特異性較高,結果判定直觀,對操作人員要求不高,適合應用于養(yǎng)殖場、牧區(qū)等不具備實驗室條件的基層單位使用。
1.1.1 血清樣品 對來源于不同養(yǎng)殖場的豬全血樣本150份,通過直接涂片,姬姆薩染色鏡檢,以看到新月形滋養(yǎng)體即可初步判為陽性,結果檢出陽性樣本13份。全部全血樣本分離出血清后低溫保存?zhèn)溆谩?/p>
1.1.2 檢測試劑 弓形體抗體膠體金檢測試劑盒(批號20170601),由深圳市綠詩源生物技術有限公司提供。
先將檢測卡和待檢血清恢復至室溫。取出檢測卡,用吸管吸取待檢血清,滴2~3滴到加樣孔;也可用移液器加70 μL血清到加樣孔。室溫條件下15 min內判定結果。若質控(C)線、檢測(T)線均顯色,表示血清樣本中含有弓形體抗體;若檢測(T)線不顯色,僅質控(C)線顯色,則表示血清樣本中不含有弓形體抗體或其含量低于檢測域值;若未出現(xiàn)質控(C)線,表明操作不正確或檢測卡已失效。
應用膠體金檢測卡對150份豬血清樣本進行檢測,檢測結果詳見表1。
表1 應用膠體金法與直接涂片法檢測豬血清樣品的陽性率比較
結果顯示,直接涂片法檢出陽性樣本13份,陽性率8.7%;膠體金法檢測出陽性樣本15份,陽性率10%。膠體金法與直接涂片法的符合率為98.7%。
(1)根據(jù)《豬弓形蟲病防治技術規(guī)程》(DB13 T 555—2004)中關于豬弓形體病的診斷和判定方法,直接涂片法是判定陽性動物的主要標準之一,但此法由于人為因素易造成漏檢情況的出現(xiàn)。而膠體金法作為新型快速診斷方法,可以作為直接涂片法的補充和驗證。
(2)根據(jù)試驗結果,應用膠體金法較直接涂片法陽性率略高,說明前者的敏感性大于后者。在實際應用中,直接涂片法所需的試驗器材較多,步驟繁瑣,對檢測人員要求較高,檢出率較低;而膠體金檢測卡操作簡易高效,準確性較高,非專業(yè)人員也可操作,同時具有良好的特異性、敏感性、重復性和穩(wěn)定性,適用于弓形體病早期檢測和診斷,特別適合在基層推廣應用。
(3)膠體金法不僅限于檢測血清,還可以對當天采集的抗凝全血進行檢測。在養(yǎng)殖場和牧區(qū)等不具備離心條件的場所可以應用,該方法將在新疆生產建設兵團第十二師逐步推廣。