章艷娟

（撫州市第一人民醫(yī)院感染科，江西 撫州 344000）

HCV是指人體被感染后，引發(fā)肝臟細胞受損，繼而誘發(fā)肝臟變性及壞死與炎癥，最終導(dǎo)致肝硬化，甚至肝癌等[1]。這一方面與患者感染HVC基因病毒有關(guān)，另一方面還與宿主基因機體免疫狀態(tài)與細胞因子表達水平及基因型等原因相關(guān)。患者受到HCV感染后，約20%～30%的受感染者可以自發(fā)性的清除病毒，70%～80%會發(fā)展為CHC，當(dāng)然自發(fā)性清除有賴于病原體及宿主基因相關(guān)因素，宿主基因的免疫反應(yīng)占有重要地位在自發(fā)性清除中，一旦免疫反應(yīng)無法對HCV徹底清除時，就會導(dǎo)致其發(fā)生慢性感染[2]。其慢性炎癥感染會誘發(fā)肝臟組織出現(xiàn)大量纖維增生，更甚者致使感染者發(fā)生肝硬化及肝癌[3]。IL-28B基因?qū)HC發(fā)生及預(yù)后復(fù)發(fā)有著重要的預(yù)測功效，可為臨床提供其參考價值，現(xiàn)做如下報道。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 從2012年1月～2016年12月間，來本院接受慢性丙型肝炎（chronic hepatitis C，CHC）治療的200例病患作為研究對象。同時本研究經(jīng)本院倫理委員會審核并批準通過。入選標(biāo)準：①所有患者均符合《丙型肝炎預(yù)防指南》對CHC診斷標(biāo)準；②CHC患者感染均有超過6個月，或是病發(fā)日期不明；③抗HCV-RNA及HCV陽性；④患者或家屬均對本研究知情并簽署同意書。排除標(biāo)準：①感染者有合并HE與HAV及HDV與HBV者；②肝硬化處于失代償期；③代謝性（或自身免疫件）肝??；④人類免疫缺陷病毒（HIV）合并感染者；⑤其長期酗酒或戒酒不足半年者；⑥長期接受免疫抑制劑患者，另外還包括器官移植者。依據(jù)丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）基因分型，將入選患者分為1b型組（100例）與2a型組（100例）。其中1b型組男59例，女41例，年齡15～71歲，平均（45.28±12.76）歲，BMI指數(shù)為22～31 kg/m2,平均BMI指數(shù)為（22.25±2.65）kg/m2。2a型組男58例，女42例，年齡15～71歲，平均（45.35±12.25）歲，BMI指數(shù)為22～31 kg/m2,平均BMI指數(shù)（23.13±2.49）kg/m2。兩組患者在性別年齡以及BMI指數(shù)等資料方面相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，有可比性。

1.2 研究方法 兩組患者距給予48周普通干擾素聯(lián)合利巴韋林（PR方案）規(guī)范治療，并進行為期24周的隨訪。選用提取儀（杭州博日）試劑盒（Promega GoTaq Green Mix from USA）對患者進行DNA提取，操作步驟嚴格按照說明書執(zhí)行。同時經(jīng)本院檢驗科使用的自動生化儀檢測血常規(guī)及肝功。用COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 48定量檢測RNA：PCR-熒光法。基因庫中IL-28B-rs12979860及IL-28B-rs12980275與IL-28B-rs8099917基因序列引物用軟件DNAMan6.0.3.99軟件。Life Pro PCR擴增儀（北京鼎國昌盛DG-600C）引物序列：rs8099917下游5’-ACATAAAAAGCCAGCTACCAAACT-3’，上游 5’-CTCCTTTTGTTTTCCTTTCTGTGA-3’，rs12989760下游5’-AGCGCGGAGTGCAATTCA-3’，上游5’-GTCGTGCCTGTCGTGTACTGA-3’；rs12980275下游 5’-TACCCCGGCAAATATTTAGACAC-3’，上游 5’-ACATGAGGTGCTGAGAGAAGTCAA-3’。

1.3 療效評價 記錄患者快速病毒學(xué)應(yīng)答率（RVR）、早期應(yīng)答率（EVR）、持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答率（SVR）、ALT 復(fù)常率、HCV-RNA轉(zhuǎn)陰率、不良反應(yīng)等情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)的處理用SPSS 19.0軟件進行，計數(shù)資料以百分數(shù)和例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療后兩組患者HCV-RNA轉(zhuǎn)陰率對比 治療后12周以及24周和48周1b組患者轉(zhuǎn)陰率均顯著低于2a組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 治療后兩組患者HCV-RNA轉(zhuǎn)陰率對比（n）

2.2 治療后兩組患者RVR以及EVR和SVR對比 兩組EVR差異無統(tǒng)計學(xué)意義，1b組RVR為47.00%，低于2a組的67.00%；1b組SVR為59.00%，低于2a組的82.00%；差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 治療后兩組患者RVR以及EVR和SVR對比（n）

2.3 兩組不良反應(yīng)對比 兩組均有不同程度不良反應(yīng)發(fā)生，1b組總不良反應(yīng)發(fā)生率為51.00%，顯著高于2a組的28.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 兩組不良反應(yīng)對比（n）

2.4 兩組患者IL-28B rs12979860、rs8099917和rs12980275三個位點的SNP對比 1b組rs12979860CC占比81.00%，2a組CC占比76.00%；1b組rs8099917TT占比83.00%，2a組TT占比76.00%；1b組rs12980275AA占比77%，2a組AA占比78.00%，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，見表4。

表4 兩組患者IL-28B rs12979860、rs8099917和rs12980275三個位點的SNP對比[n（%）]

3 討論

目前本市CHC患者人數(shù)較多，且多數(shù)患者承擔(dān)治療的經(jīng)濟能力有限，為此選擇患者能接受的行之有效的治療方案成為我們醫(yī)療工作者研究的難點也是重點[4-5]。國產(chǎn)抗病毒干擾素較之其他治療藥物經(jīng)濟實惠，我們希望經(jīng)CHC患者IL-28B基因多態(tài)性與國產(chǎn)抗病毒干擾素治療后的預(yù)后關(guān)聯(lián)，來進一步明確療效及復(fù)發(fā)與療程中的狀況[6]。治療前對疑似患者行IL-28B SNP檢測，為患者提供其能接受的治療方案，并對其提供科學(xué)合理的有針對性的治療意見及預(yù)后科學(xué)指導(dǎo)，進一步為民著想，擴大治療的效益，確?；颊叩闹委熡行Э尚?。

本院通過IL-28B基因型多態(tài)性對慢性丙型肝炎不同分型患者的療效預(yù)測及復(fù)發(fā)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療后12周以及24周和48周1b組患者轉(zhuǎn)陰率均顯著低于2a組。與李沛元等[7]的報道相一致，表明IL-28B基因多態(tài)性與國產(chǎn)抗病毒干擾素對2a組的治療轉(zhuǎn)陰率更高。IL-28B基因型多態(tài)性能較為準確預(yù)測國產(chǎn)抗病毒干擾素的治療效果，這是IL28B基因IFN-γ3編碼為干擾素3型，在染色體（19號）上，囊括6個外顯子，是IFN-γs家族成員，IL-28B基因的變異是預(yù)后病情的影響的重要因素，白介素及干擾素有效刺激基因多態(tài)性同HCV感染相關(guān)，影響免疫功能進而對CHC病情產(chǎn)生影響[8-9]。其診斷及抗HCV療效預(yù)測為臨床制定治療決策提供有力的依據(jù)[10]。此外，兩組EVR差異無統(tǒng)計學(xué)意義，1b組RVR為47.00%，低于2a組的67.00%；1b組SVR為59.00%，低于2a組的82.00%。符合彭瑾瑜等[11]的報道，表明對HCV患者給予IL-28B基因多態(tài)性與國產(chǎn)抗病毒干擾素治療，2a分型的病毒應(yīng)答率更高。本研究還發(fā)現(xiàn)，1b組rs12979860CC占比81.00%，2a組 CC占比 76.00%；1b組 rs8099917TT占比83.00%，2a組TT占比76.00%；1b組rs12980275AA占比77%，2a組AA占比78.00%，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。這表明IL-28B-rs12979860點及PIL-28B-rs12980275點與HCV抗病毒與自發(fā)清除有密切相關(guān)性，IL-28B rs8099917點與CHC患者干擾素療效相關(guān)。這是IL28B基因作為干擾素能經(jīng)過通路（Jak-SATA）激活部分抗病毒蛋白[12-13]。IL-28B基因型保護性抗病毒治療對持續(xù)應(yīng)答獲得更加容易。rs12979860點位1b組與2a組CC型占比均顯著高于CT型占比；rs8099917點位1b組與2a組TT型占比均顯著高于TG型占比；rs12980275點位1b組與2a組AA型占比均顯著高于AG型占比。說明IL-28B的基因多態(tài)性對普通干擾素抗丙型肝炎病毒治療應(yīng)答有重要影響，可以預(yù)測抗病毒療效，為實現(xiàn)個體化治療提供重要依據(jù)。本研究還發(fā)現(xiàn)，兩組患者均出現(xiàn)以下不良反應(yīng)，白細胞降低以及血小板降低，部分患者出現(xiàn)貧血和發(fā)熱癥狀，且1b組總不良反應(yīng)發(fā)生率為51.00%，顯著高于2a組的28.00%。表明2a分型患者經(jīng)IL-28B基因多態(tài)性與國產(chǎn)抗病毒干擾素治療其不良反應(yīng)更少。有報道稱IL-28B基因檢測干擾素治療CHC療效顯著，這是由于IL-28B基因多態(tài)性對肝臟功能具有具體機制的影響，再加之對HCV RNA水平具有抑制復(fù)制的作用[14-15]。

綜上所述，撫州地區(qū)IL-28B基因型多態(tài)性對CHC患者的療效預(yù)測具有非常重要的意義，其不同分型的轉(zhuǎn)陰率不同，且不同分型治療后的RVR以及EVR和SVR不同，因此可根據(jù)多態(tài)性反應(yīng)中應(yīng)答率對基因分型進行檢測分析。

[1] 高曉娟,余祖江,劉翠萍,等.白細胞介素-28B的基因多態(tài)性與干擾素抗丙型肝炎病毒治療應(yīng)答的關(guān)系[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2012,34(9):832-835.

[2] 史萍,蔣龍鳳,李軍,等.IL-28B基因型與慢性丙型肝炎的關(guān)系[J].國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志,2014,41(3):201-204.

[3] 叢瑞,佟小非,劉三都,等.白細胞介素28B(IL-28B)基因多態(tài)性與丙型肝炎病毒(HCV)感染者自發(fā)清除的相關(guān)性[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2012,33(3):326-329.

[4] 謝俊強,郭小燕,李新華,等.白細胞介素-28B基因多態(tài)性與丙型肝炎病毒感染自然清除的相關(guān)性[J].中華傳染病雜志,2012,30(9):538-541.

[5] 雷君,王瑩,王黎黎,等.IL-28B基因的單核苷酸多態(tài)性與慢性丙型肝炎患者肝臟硬度值的相關(guān)性[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2016,26(6):330-332.

[6] 孫海榮,周冰清,劉麗萍,等.IL-28B基因多態(tài)性對老年丙型肝炎抗病毒的治療應(yīng)答影響分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2017,23(8):93-94.

[7] 李沛元,姚藍,郭波,等.IL-28B基因多態(tài)性-丙型肝炎個體化治療的新起點[J].世界華人消化雜志,2012,20(2):119-124.

[8] 謝俊強,張曉紅,李新華,等.IL-28B基因突變與慢性丙型肝炎治療應(yīng)答的相關(guān)性研究[J].中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志,2012,26(4):298-300.

[9] 史昌河,宋秀云,魏陽,等.青島地區(qū)宿主IL-28B基因多態(tài)性及HCV基因型對慢性丙型肝炎抗病毒療效的影響[J].中華實驗和臨床感染病雜志（電子版）,2017,11(1):45-50.

[10]張蕭.臨床檢驗中丙型肝炎病毒的常用檢測項目及意義[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2011,18(15):14-15.

[11]彭瑾瑜,陳曦,賀健梅,等.白細胞介素-28B和平衡性核苷轉(zhuǎn)運載體1基因多態(tài)性與HIV/HCV合并感染者HCV自發(fā)清除的關(guān)系研究[J].中華流行病學(xué)雜志,2015,36(4):379-382.

[12]顏進.rs12979860和rs8099917基因多態(tài)性在HCV治療中的意義[J].醫(yī)學(xué)信息,2015,28(6):269-270.

[13]毛亦佳,毛小榮,蔣妮,等.白細胞介素28B等細胞因子基因多態(tài)性與HCV感染的關(guān)系[J].臨床肝膽病雜志,2015,31(8):1347-1350.

[14]楊紅梅,周斌泉,堯敏之.索菲布韋聯(lián)合普通IFN和利巴韋林治療1b型丙肝患者的療效觀察[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2017,23(15):70-72.

[15]羅旗,伍春霞,李成敏,等.白細胞介素28B基因多態(tài)性以及表達水平對慢性丙型肝炎患者抗病毒治療效果的影響研究[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2015,40(3):335-339.