張錄民 姚健 陳玲玲

肺癌是一種較為常見(jiàn)的惡性腫瘤，具有較高的發(fā)病率和死亡率，且近年來(lái)有上升的趨勢(shì)，尤其在中國(guó)等經(jīng)濟(jì)發(fā)展中國(guó)家。肺癌在診療中具有較大的研究進(jìn)展，但部分晚期肺癌患者仍死于復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。有學(xué)者[1]認(rèn)為：MUC1基因編碼的蛋白作為肺癌重要的相關(guān)抗原，也可能是肺癌基因轉(zhuǎn)移標(biāo)準(zhǔn)物。目前，關(guān)于MUC1基因在肺組織（正?；虬┙M織）中的表達(dá)量，以及MUC1基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系這方面尚無(wú)學(xué)者對(duì)此進(jìn)行研究，對(duì)此，筆者醫(yī)院探討了MUC1基因量（免疫組化法）在肺癌組織中的表達(dá)，旨在探討MUC1基因在肺癌及其轉(zhuǎn)移中的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 材料

以2015年1—12月為研究時(shí)間，在吉林省人民醫(yī)院胸外科手術(shù)切除的30例非小細(xì)胞肺癌患者為研究對(duì)象，所有患者術(shù)前均未進(jìn)行抗癌治療，病理檢查確診為肺癌，排除轉(zhuǎn)移癌。手術(shù)切除的新鮮肺癌組織標(biāo)本包括鱗狀細(xì)胞癌、腺癌各15例；同時(shí)切除肺正常組織作為肺正常組織標(biāo)本，以進(jìn)行對(duì)照研究。30例患者中男性17例，女性13例，年齡45～76歲，平均（58.6±4.2）歲。

1.2 方法

取材后固定（10%中性緩沖福爾馬林溶液），制備過(guò)程如下：80%乙醇－95%乙醇I－95%乙醇II－無(wú)水乙醇I－無(wú)水乙醇II梯度脫水，二甲苯透明2次，浸蠟包埋，連續(xù)切片，切片厚度為4μm，切片進(jìn)行常規(guī)HE染色、免疫組化染色。

免疫組化染色：s-p法，石蠟切片常規(guī)脫蠟，水化，滴加3%H2O2-甲醛液，在室溫下孵育，時(shí)間30 min，以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。滴加兔抗MUC1多克隆抗體，溫度為4℃，孵育過(guò)夜；滴加酶標(biāo)記的二抗，室溫濕盒中進(jìn)行孵育，時(shí)間為60 min；DAB顯色，時(shí)間1～3 min；Mayer蘇木素復(fù)染核，常規(guī)酒精梯度脫水、二甲苯透明、中性樹(shù)膠封片、光鏡觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在進(jìn)行染色的過(guò)程中，需以正常兔IgG代替一抗（陰性對(duì)照）。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：MUC1表達(dá)通過(guò)陽(yáng)性細(xì)胞百分率判定，＜10%為（-），10%～30%、31%～50%、＞50%分別記錄為中度表達(dá)（+）、高表達(dá)（++）、強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)（+++）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件采用SPSS 21.0處理，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MUC1基因在不同肺組織中的表達(dá)

肺癌組織中MUC1基因存在表達(dá)現(xiàn)象，染色后發(fā)現(xiàn)：陽(yáng)性顆粒為深棕色或棕黃色，主要存在于胞膜或胞漿。MUC1的陽(yáng)性表達(dá)率100.0%（30/30）與周?chē)５姆谓M織10.0%（3/30）之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 MUC1基因與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系

12例伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織切片中，（+）、（++）、（+++）表達(dá)率分別為8.3%、16.7%和75.0%；在18例沒(méi)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織切片中，陽(yáng)性表達(dá)率分別為44.4%、39.9%和16.7%。肺癌組織中，伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的MUC1基因強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

非小細(xì)胞肺癌是肺癌中一種較為常見(jiàn)的類(lèi)型，具有較高的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及病死率，目前僅常規(guī)病理檢查淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，但漏診率較高。粘蛋白（MUC）是一種分子量＞200 kD的糖蛋白，廣泛分布于機(jī)體正常黏膜表面，由肽核心和糖鏈組成。正常情況下，MUC1粘蛋白存在于胃腸道、泌尿生殖道及肺等組織器官中，頂端表達(dá)，極性分布，潤(rùn)滑和保護(hù)正常上皮，還可介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞黏附。在腫瘤細(xì)胞中異常表達(dá)，主要見(jiàn)于上述器官組織上皮細(xì)胞來(lái)源的惡性腫瘤，故而認(rèn)為可將其作為一種潛在的腫瘤標(biāo)志物[2-4]。但目前關(guān)于MUC1粘蛋白在肺癌中表達(dá)情況的研究較少，故而筆者對(duì)此進(jìn)行了研究，以便為肺癌的診療及預(yù)后提供參考。

本實(shí)驗(yàn)中，對(duì)肺癌及肺正常組織中MUC1表達(dá)進(jìn)行了研究，結(jié)果表明MUC1在肺癌組織中為高表達(dá)，染色陽(yáng)性顆粒為胞膜或胞漿內(nèi)的深棕色或棕黃色顆粒。肺癌組織MUC1的陽(yáng)性表達(dá)率高于周?chē)５姆谓M織。有研究表明[5-7]MUC1可使E-鈣粘蛋白下調(diào)表達(dá)，可能增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞侵襲性，影響預(yù)后。還有研究顯示[8]：腸腺癌細(xì)胞上表達(dá)的MUC1與其侵襲轉(zhuǎn)移程度呈正相關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：肺癌組織中伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的MUC1基因的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，說(shuō)明MUC1有利于腫瘤細(xì)胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，可作為預(yù)測(cè)腫瘤患者發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要指標(biāo)。

綜上所知，MUC1在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中扮演了重要的角色。