曹玉紅 張立毅 張光運(yùn) 曹開(kāi)方 曹艷華

(1.第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院兒科，陜西 西安 710032；2.北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京100191； 3.第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，陜西 西安 710032； 4.第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院口腔頜面醫(yī)學(xué)影像科，陜西 西安 710032； 5．濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院兒科，山東 濟(jì)南250031)

病毒性腦炎是兒童時(shí)期常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，不同的患者病情輕重不等，輕者可自行緩解，預(yù)后良好，重者可遺留神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，甚至死亡[1,2]。尋找能反映該病腦損傷的特異性標(biāo)志物，用以早期判斷患者病情的嚴(yán)重程度、評(píng)估預(yù)后、指導(dǎo)治療有重要臨床意義，也是廣大學(xué)者研究的熱點(diǎn)[3,4]。國(guó)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，病毒性腦炎患者膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)水平升高，與患者病情輕重及預(yù)后密切相關(guān)[5-7]，國(guó)內(nèi)罕見(jiàn)此方面的研究報(bào)道。我們應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)雙抗體夾心法對(duì)38例病毒性腦炎患兒急性期腦脊液和血清GFAP含量進(jìn)行了檢測(cè)及分析，探討其與疾病嚴(yán)重程度以及預(yù)后之間的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 一般資料 本組病例為2013年1月～2016年12月我院神經(jīng)內(nèi)科及兒科住院的病毒性腦炎患兒38例(病例組)，其中男22例，女16例，年齡2.2～13.0歲。均符合第八版《兒科學(xué)》病毒性腦炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]。病情等級(jí)劃分采用中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染嚴(yán)重程度評(píng)分量表[9]，根據(jù)患兒臨床癥狀體征和腦脊液壓力、常規(guī)、生化以及頭部影像學(xué)、腦電圖等情況，將38例患兒又分為輕度組(0～l3分)15例、中度組(14～26分)13例和重度組(27～39分)10例等三個(gè)亞組。對(duì)所有患兒電話或門(mén)診隨訪1～2年，有后遺癥8例(后遺癥組)，其中智力障礙2例，智力障礙伴癲癇2例，癲癇2例，運(yùn)動(dòng)障礙1例、精神異常1例；無(wú)后遺癥30例(無(wú)后遺癥組)。另選無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)疾病而需外科手術(shù)的腰麻患兒30例作為對(duì)照組。兩組患兒性別、年齡無(wú)顯著差異(P<0.05)。

1.2 方法 腦脊液及血清GFAP檢測(cè) 病例組及對(duì)照組患者均于入院1周內(nèi)腰穿留取腦脊液2 mL，同時(shí)抽取肘靜脈血2 mL，腦脊液和靜脈血均低溫離心機(jī)(4℃)2OOO r/min離心10 min，留取上清，置-80℃冰箱中保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法定量檢測(cè)GFAP，試劑盒為Abnova公司產(chǎn)品，操作方法嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 病例組與對(duì)照組腦脊液和血清GFAP水平比較 病例組和對(duì)照組腦脊液GFAP含量分別為(1.767±1.132)μg/L和(0.234±0.091)μg/L，血清GFAP含量分別為(0.489±0.239)μg/L和(0.197±0.070)μg/L。病例組腦脊液和血清GFAP含量高于對(duì)照組(P<0.01)，病例組腦脊液GFAP含量高于血清(P<0.01), 見(jiàn)表1。

表1病例組和對(duì)照組腦脊液和血清GFAP含量比較(μg/L)

Table1GFAPofcerebrospinalfluidandseruminthecasegroupandcontrolgroup

分組n腦脊液GFAP血清GFAP病例組381767±11320489±0239對(duì)照組300234±00910197±0070t83147146

2.2 38例不同程度病毒性腦炎患兒腦脊液和血清GFAP水平比較 重度組、中度組、輕度組三個(gè)亞組腦脊液GFAP含量分別為(3.440±0.597)μg/L、(1.638±0.260)μg/L和(0.764±0.088)μg/L；重度組腦脊液GFAP含量高于中度組 (P<0.01)，中度組高于輕度組(P<0.01)。重度組、中度組、輕度組血清GFAP含量分別為(0.829±0.169)μg/L、(0.414±0.101)μg/L和(0.328±0.092)μg/L，重度組血清GFAP含量高于中度組和輕度組(P<0.01)，中度組和輕度組比較無(wú)差異(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2病例組各亞組患兒腦脊液和血清GFAP蛋白含量比較(μg/L)

Table2GFAPofcerebrospinalfluidandseruminpatientswithdifferentseverity

分組n腦脊液GFAP血清GFAP重度組103440±05970829±0169中度組131638±02600414±0101輕度組150764±00880328±0092F18369356953

2.3 38例不同預(yù)后患者腦脊液和血清GFAP水平比較 后遺癥組和無(wú)后遺癥組三個(gè)亞組腦脊液和血清GFAP含量比較差異均顯著(P<0.01) ，見(jiàn)表3。

表3病例組不同預(yù)后患兒腦脊液和血清GFAP水平比較(μg/L)

Table3GFAPofcerebrospinalfluidandseruminpatientswithandwithoutsequelae

分組n腦脊液GFAP血清GFAP后遺癥組83675±03730875±0155無(wú)后遺癥組301258±05740386±0123t143369455

3 討論

近年來(lái)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染腦損傷的特異性生化標(biāo)志物的研究得到了臨床醫(yī)生和研究人員越來(lái)越多的關(guān)注。目前發(fā)現(xiàn)的腦損傷相關(guān)標(biāo)記物較多，如S100β、神經(jīng)元特異性烯醇化酶、白細(xì)胞介素6、基質(zhì)金屬蛋白酶9等，但這些標(biāo)記物不僅僅存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，心臟損傷、軟組織損傷、乳腺癌、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、小細(xì)胞肺癌、結(jié)直腸癌等疾病亦可引起上述指標(biāo)升高，這些均影響到治療決策和預(yù)后評(píng)估[10,11]。

GFAP是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中星形膠質(zhì)細(xì)胞的主要中間絲蛋白，是星形膠質(zhì)細(xì)胞的特異性標(biāo)記物。高等脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后，星形膠質(zhì)細(xì)胞變得活躍，并以典型方式反應(yīng)，稱為星形膠質(zhì)細(xì)胞增多癥，特征是GFAP快速合成和含量增加，GFAP體液水平是評(píng)估星形膠質(zhì)細(xì)胞增多和激活的重要手段，間接反饋神經(jīng)損傷的程度[12]。國(guó)內(nèi)外學(xué)者報(bào)道，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病如腦外傷、腦出血、腦梗死、早產(chǎn)兒腦損傷等患者腦脊液和(或)血清GFAP含量增高，有望成為評(píng)估腦損傷患者病情和預(yù)后的指標(biāo)[13-20]。

國(guó)外研究表明，中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者GFAP等水平可升高，GFAP有望成為中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染后腦損傷的標(biāo)志物。體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，辛德畢斯病毒神經(jīng)毒細(xì)胞株SVNI導(dǎo)致星形細(xì)胞數(shù)目減少，GFAP明顯升高，揭示星形細(xì)胞與神經(jīng)元類似，也是病毒侵犯的靶細(xì)胞[7]。Petzold 等對(duì)24例急性西尼羅河病毒腦炎患者進(jìn)行了腦脊液GFAP和神經(jīng)絲蛋白的檢測(cè)，58%的病人兩種標(biāo)志物均升高，與尸檢報(bào)告神經(jīng)元和膠質(zhì)破壞一致，揭示西尼羅河病包括西尼羅河熱的神經(jīng)侵犯作用[5]。Studahl 等檢測(cè)了13例Ⅰ型單純皰疹病毒腦炎患者腦脊液GFAP水平，發(fā)現(xiàn)急性期GFAP明顯升高，GFAP水平在45天內(nèi)下降，揭示在患病一個(gè)月內(nèi)病毒對(duì)神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的損害[6]。

本研究顯示，病毒性腦炎患者急性期腦脊液和血清GFAP水平顯著升高，腦脊液GFAP水平高于血清。我們推測(cè)病毒性腦炎后發(fā)生腦實(shí)質(zhì)充血、水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死等病理改變，引起血腦屏障通透性增加，星形膠質(zhì)細(xì)胞壞死、活化增生，從而導(dǎo)致血漿GFAP水平升高。另外，我們也發(fā)現(xiàn)病毒性腦炎重度組腦脊液GFAP高于中度組，中度組高于輕度組，重度組血清GFAP高于中度組和輕度組，而且后遺癥組GFAP的含量明顯高于無(wú)后遺癥組，說(shuō)明病毒性腦炎患兒急性期GFAP含量增加與疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后相關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[5,6]。因此檢測(cè)病毒性腦炎患兒的腦脊液和血清GFAP含量的變化，對(duì)于判斷急性期腦損傷的嚴(yán)重程度、評(píng)估預(yù)后、尋找更佳的治療方法及調(diào)整治療方案等方面有著重要臨床意義。

4 結(jié)論

病毒性腦炎患兒急性期腦脊液和血清GFAP檢測(cè)含量增加與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，故檢測(cè)病毒性腦炎患兒GFAP含量的變化，有助于判定腦組織受損的嚴(yán)重程度及評(píng)估患兒的臨床預(yù)后。

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