李佳榮 李 軍 吳達(dá)勇 吳翠蘭 潘 艷

（1.廣西百色農(nóng)業(yè)學(xué)校，廣西百色 533000；2.廣西獸醫(yī)研究所，廣西南寧 530001；3.廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西南寧 530001）

牛肺炎克雷伯氏菌病是由腸桿菌科克雷伯氏菌屬成員肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）引起牛重癥肺炎、敗血癥、腦膜炎、乳腺炎等疾病，具有較高的發(fā)病率和死亡率[1，2]。肺炎克雷伯氏菌為無鞭毛、無芽孢、有莢膜的革蘭氏陰性短桿菌，常成單個(gè)、成雙或短鏈狀排列。該病原自1893年由Friediander首次分離以來，現(xiàn)已廣泛分布于世界各地。由于該菌易與其他病毒、細(xì)菌發(fā)生混合感染，導(dǎo)致疾病的嚴(yán)重性，且該菌具有嚴(yán)重的耐藥性，從而給本病的治療加大了難度，給養(yǎng)殖行業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，已引起全世界關(guān)注[3]。本文從肺炎克雷伯氏菌病的診斷方法和防控措施等進(jìn)行概述，旨在為該病的防控提供理論依據(jù)。

1 診斷

根據(jù)臨床癥狀、病理變化、微生物學(xué)診斷以及分子生物學(xué)手段可對(duì)本病做出診斷。該病冬末、春初發(fā)生較嚴(yán)重，天氣轉(zhuǎn)暖也逐漸減少，多為散發(fā)。多數(shù)病牛呈現(xiàn)急性發(fā)病死亡，死前表現(xiàn)精神不安、呼吸急促、食欲減退。其病理變化表現(xiàn)為肺臟瘀血、表面有出血點(diǎn)，肝臟腫大、有出血點(diǎn)，腎臟腫大出血，腦膜有出血斑，大小腸均有出血斑等病變。但發(fā)病牛群中肺炎克雷伯氏菌病常與大腸桿菌病、牛支原體病、?；撾[秘桿菌病、牛溶血性曼氏桿菌病等混合感染或繼發(fā)感染在臨床癥狀上表現(xiàn)為多樣性與復(fù)雜性。因此，對(duì)本病的確癥需要采取多種方法。

1.1 細(xì)菌分離鑒定

對(duì)于本病，可采取病變組織接種于麥康凱平板上或普通培養(yǎng)基平板上，置于37 ℃培養(yǎng)24 h后，麥康凱平板可觀察到菌落顏色為奶油狀的紅色，且菌落有點(diǎn)黏稠，挑取單個(gè)菌落時(shí)具有拉絲現(xiàn)象；普通培養(yǎng)基平板上成灰白色、濃厚、黏稠狀凸圓大菌落。革蘭氏染色液染色后，用鏡檢觀察為革蘭氏陰性短桿菌。

1.2 生化鑒定

根據(jù)陳瑜《臨床常見細(xì)菌、真菌鑒定手冊(cè)》[4]的克雷伯氏菌屬肺炎克雷伯氏菌可知，其生化特性葡萄糖試驗(yàn)、枸櫞酸鹽試驗(yàn)、甘露醇試驗(yàn)、麥芽糖試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)為陽性；硫化氫試驗(yàn)、明膠水解試驗(yàn)、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)和甲基紅試驗(yàn)為陰性。

1.3 血清型鑒定

肺炎克雷伯氏菌還有O和K抗原，而K抗原是菌型鑒定的依據(jù)。據(jù)報(bào)道，肺炎克雷伯氏菌K1和K2型其他型的毒性較強(qiáng)、流行率較高。

1.4 分子生物學(xué)診斷

運(yùn)用傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)鑒定方法比較費(fèi)時(shí)費(fèi)力、易受各種外面因素的影響，因此，借助分子生物學(xué)手段進(jìn)行診斷是非常有必要的。馮娜等[5]采用傳統(tǒng)的細(xì)菌鑒定手段以及16S rRNA和肺炎克雷伯氏菌的特異性基因khe進(jìn)行PCR擴(kuò)增、擴(kuò)增、測(cè)序，結(jié)果表明這三種鑒定手段的鑒定結(jié)果相一致。

2 防控措施

2.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

飼喂優(yōu)質(zhì)飼料，在飼料中加拌多維、礦物質(zhì)，飲水中加拌電解鹽，可增強(qiáng)牛的體質(zhì)和提高牛的抗病力。此外，還要定期清掃、消毒飼養(yǎng)工具。要嚴(yán)格控制人員的進(jìn)出，這是為了減少牛群的應(yīng)激反應(yīng)以及帶菌感染。對(duì)于在冬季初生犢牛應(yīng)做好保暖工作。

2.2 搞好飼舍衛(wèi)生

牛飼舍應(yīng)保持通風(fēng)環(huán)境，且要保持清潔。飼舍管理人員應(yīng)定期清理消毒飼舍，做好牛場(chǎng)的滅鼠、滅蠅、滅蚊、滅蟲等工作。飼舍的飼養(yǎng)密度不宜過高，這樣才能為牛群提供良好的生活環(huán)境。

2.3 堅(jiān)持自繁自養(yǎng)原則

對(duì)于該病的防控，應(yīng)采取自繁自養(yǎng)的原則。若要引進(jìn)牛種，應(yīng)先經(jīng)過嚴(yán)格檢疫，切勿從感染肺炎克雷伯氏菌的地區(qū)引牛。

2.4 普查牛群感染情況

對(duì)于已有發(fā)病的牛，應(yīng)進(jìn)行隔離飼養(yǎng)、消毒污染源，同時(shí)用合理的藥物進(jìn)行治療。

2.5 合理用藥

肺炎克雷伯氏菌對(duì)多種藥物已產(chǎn)生耐藥性，且耐藥的種類不斷增多，耐藥的程度也呈上升趨勢(shì)[5]。因此，臨床上指導(dǎo)用藥時(shí)，應(yīng)先做藥敏試驗(yàn)，選出敏感性藥物，不可盲目用藥、濫用藥物，以減少肺炎克雷伯氏菌的耐藥性，從而達(dá)到有效的治療效果。

3 結(jié)語

牛肺炎克雷伯氏菌病是危害牛的一種重要疫病，盡早發(fā)現(xiàn)盡早治療是防治本病發(fā)生的關(guān)鍵。本病暫無特效療法，以藥物敏感性的方法篩選本菌敏感藥物進(jìn)行臨床指導(dǎo)用藥。

[1]許惠.肉牛肺炎克雷伯氏菌病的診治報(bào)告[J].中國(guó)奶牛，2012，（12）：42-43.

[2]黃敬斌，吳翠蘭，李軍，等.一例牛肺炎克雷伯氏菌和大腸桿菌混合感染的診斷報(bào)告[J].廣西畜牧獸醫(yī)，2017，33（6）：307-308.

[3]蒙正群，冷依伊，任梅滲，等.一株牛源肺炎克雷伯氏菌的分離鑒定與耐藥基因型檢測(cè)[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017，29（4）：534-541.

[4]陳瑜.臨床常見細(xì)菌、真菌鑒定手冊(cè)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：68-69.

[5]馮娜，高翔，肖敏，等.牛源肺炎克雷伯氏菌的分離鑒定及遺傳進(jìn)化樹分析[J].中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)，2016，46（11）：1358-1364.