(青海省海南藏族自治州農(nóng)牧局,青海海南 813000)
棘球蚴病,也可以稱為棘球蚴病,是一種非常嚴(yán)重的人畜共患病,而我國又是這種疾病的高發(fā)國家之一。尤其需要注意的是,近幾年以來,藏系羊的疾病感染率急劇上升,帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此,如何切實(shí)做好檢測,進(jìn)而為做好綜合防控提供一定的依據(jù)和參考尤為重要。間接血凝法憑借其自身的特點(diǎn),在疾病的檢測方面有著獨(dú)到之處。
在材料的準(zhǔn)備方面,主要就是需要包囊液、血清、試劑以及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)儀器。
首先,包囊液的來源主要就是屠宰場中已經(jīng)遭受感染的、呈現(xiàn)陽性羊的肝臟包囊,將包囊液抽取出來,在零下20攝氏度的條件下放置,留以備用。
其次,關(guān)于血清,血清的準(zhǔn)備主要就是陽性的血清、陰性的血清以及待檢測的血清三種。
陽性血清的主要來源就是剖檢呈現(xiàn)陽性、已經(jīng)感染了的藏系羊的血清;而陰性血清則是健康藏系羊的血清;待檢測的血清就是在無菌條件下進(jìn)行靜脈采血,采血的劑量大約在10ml左右,等到在自然條件下凝固了以后,再對血清樣本進(jìn)行離心和分離處理。
第三,關(guān)于實(shí)驗(yàn)所用的試劑,主要就是阿氏液、濃度為0.01mol/L、pH值是7.2的磷酸緩沖液以及戊二醛等。
第四,關(guān)于實(shí)驗(yàn)所用的儀器,主要就是高速的離心機(jī)、紫外檢測儀、蠕動泵以及電子天平等。
第五,關(guān)于實(shí)驗(yàn)的方法
實(shí)驗(yàn)的第一步就是要制備棘球蚴抗原,具體的方法就是從有棘球蚴包囊的肝臟中,通過注射器進(jìn)行包囊液的抽取,然后將其放置在零下20攝氏度的條件下進(jìn)行冰凍與融化,最好是能夠反反復(fù)復(fù)進(jìn)行,五次為最為合適,然后再用超聲波進(jìn)行處理,處理的時間在十分鐘左右,之后進(jìn)行離心處理,處理的時間半小時,最好是能夠在15000轉(zhuǎn)/min的離心速度下進(jìn)行,將上清液取出來,就是包囊的粗抗原,再將其放置在-20℃的條件下進(jìn)行保存。
實(shí)驗(yàn)的第二步就是要完成致敏血球的制備,主要包括收集紅細(xì)胞、對紅細(xì)胞進(jìn)行醛化處理、之后再對經(jīng)過醛化處理的紅細(xì)胞進(jìn)行鞣化處理,然后經(jīng)過紅細(xì)胞的致敏處理之后,這個步驟就算完成了。
實(shí)驗(yàn)的第三步就是制備非致敏紅細(xì)胞懸液,相對于其他過程,就是需要用生理鹽水代替包囊抗原,將其放置在4℃的條件下進(jìn)行保存,留以備用。
第六就是對抗原蛋白進(jìn)行測定,將包囊粗抗原取出來,大約5ml,進(jìn)行過柱之后,等到包囊粗抗原的液面和層析柱的膠液面持平的時候,加入pH值是7.2的PBS,進(jìn)行洗脫處理,用紫外檢測儀器進(jìn)行檢測,等到峰值出現(xiàn)的時候,就是可以進(jìn)行收集的標(biāo)志,把第一峰的抗原洗脫液和第二峰的抗原洗脫液進(jìn)行混合,進(jìn)行測定,獲取蛋白質(zhì)的準(zhǔn)確含量。
第七就是關(guān)于IHA實(shí)驗(yàn),主要包括以下幾個步驟,分別是對抗體的效價進(jìn)行測定、明確判定的具體標(biāo)準(zhǔn)。
首先,關(guān)于IHA抗原的效價,對于被檢測的血清,如果其IHA的抗體效價大于或者是等于1:16的時候,就可以將其判定為陽性。
其次,在IHA棘球蚴病的檢測結(jié)果方面,在這個實(shí)驗(yàn)中,被檢測藏系羊的血清樣本共有51份,分別來自不同的地區(qū),在檢測的結(jié)果方面,是存在一定的差異的,最高的陽性率超過了40%,將近50%,最低的則是沒有。
不同地區(qū)之間棘球蚴病的感染了是表現(xiàn)出了一定程度差異的,其主要的原因在于不同地區(qū)藏系羊棘球蚴病的感染程度有所不同。
另外寄一個就是關(guān)于屠宰場的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其他地區(qū)的結(jié)果表明,育肥感染棘球蚴病的感染率更低一些,這樣的話就表明,如果藏系羊是自然放羊的話,那么在棘球蚴病的感染率方面,相對于育肥羊來說,是要更高一些的。究其原因的話,藏系羊棘球蚴病的感染和狼犬等肉食類的動物有著直接性的關(guān)系,由于狼狗污染管理,排出來的糞便中的蟲卵等就很容易對草場造成污染,藏系羊在采食的時候就會將蟲卵吞入,進(jìn)而遭受感染,而如果藏系羊是育肥的話,就在某種程度上將棘球蚴病的傳染途徑切斷了,進(jìn)而減少了棘球蚴病的感染。
總的來說,在青海很多地區(qū),藏系羊棘球蚴病的感染率是非常高,相關(guān)部門也一定要給予高度的重視,要進(jìn)一步加大宣傳工作的力度,讓眾多的牧民意識到這種疾病的嚴(yán)重危害性以及日常的預(yù)防方法。讓大家意識到對于藏系羊最好是采用拴養(yǎng)的方式,定期進(jìn)行驅(qū)蟲工作,同時做好糞便的無害化處理工作。
通過這次的實(shí)驗(yàn),說明間接血凝法是一種簡單、快捷、經(jīng)濟(jì)性高而且重復(fù)性良好的檢測方法,為藏系羊棘球蚴病的診斷和綜合防治提供了有效的手段,也是可以應(yīng)用于大范圍藏系羊棘球蚴病的血清學(xué)調(diào)查。
從上文的論述中,我們對于棘球蚴病有了進(jìn)一步了解和認(rèn)識,同時也更加明確在青海地區(qū)做好這種疾病的檢測與診斷和防治具有極為重要的作用和意義。對于當(dāng)?shù)卣拖嚓P(guān)部門來說,一定要充分意識到這一點(diǎn),進(jìn)而在立足實(shí)際的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步加大宣傳力度,讓廣大牧民充分意識到這種疾病可能導(dǎo)致的危害性,進(jìn)而給予足夠重視,切實(shí)做好這種疾病的綜合防控。
[1]張軍.棘球蚴病的研究概況[J].中國獸醫(yī)科學(xué),2000,30(12):119.
[2]史大中.中國囊性棘球蚴病的地理分布[J].疾病預(yù)防控制通報,2000,(1):74-75.
[3]許隆祺,蔣則孝,余森海,等.當(dāng)前我國人體寄生蟲病流行的趨勢和特點(diǎn)[J].中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志,1995,13(3):214-217.