李林臣 劉 婷 牛艷芬 張懿暉 李林軍 李少峰 李秀麗 張 禎

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)屬乳多空病毒科的乳頭空泡病毒A屬，是一種球形、雙鏈閉環(huán)的小DNA病毒，無包膜。該病毒只侵犯人類，對其他動物無致病性，且HPV對人體皮膚和組織具有親嗜性[1]。

HPV的感染與多種宮頸癌的發(fā)生發(fā)展具有相關(guān)性，其持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生及發(fā)展的重要危險因素之一[2-3]。根據(jù)HPV致病性強度的不同，將其分為低危型HPV(low-risk human papilloma virus，LR-HPV)和高危型HPV(high-risk human papilloma virus，HR-HPV)。LR-HPV6、11、42等的感染與人類尋常疣及尖銳濕疣等性傳播疾病有關(guān)。HR-HPV16、18、31、35等的感染與宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。不同職業(yè)、不同年齡段的女性對HPV的感染情況不同，而醫(yī)務(wù)人員因其工作性質(zhì)的特殊性，是感染HPV的高發(fā)人群。因此，本研究通過調(diào)查張家口市第一醫(yī)院不同年齡段的女性醫(yī)務(wù)人員對HR-HPV的感染情況及年齡分布特點，探討有針對性地實施HPV防治策略，為醫(yī)院制定女性醫(yī)務(wù)人員HPV體檢方案提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3-8月張家口市第一醫(yī)院不同年齡段的182名女性醫(yī)務(wù)人員的體檢陰道分泌物標本，年齡25～62歲，平均年齡37.94歲；將其按照不同年齡段分為6組，即25～30歲組、31～35歲組、36～40歲組、41～45歲組、46～50歲組和≥51歲組。采用回顧性分析統(tǒng)計6組中不同年齡段HPV感染特征。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審查通過并批準，參與研究者均已簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：①月經(jīng)正常女性，在月經(jīng)來潮后10～18 d進行檢測；②檢查前3 d內(nèi)不使用陰道內(nèi)藥物或做陰道沖洗；③檢查前24 h內(nèi)無性行為；④自愿參加本研究。

(2)排除標準：①不同意簽署知情同意書；②檢查前做過陰道藥物治療或沖洗；③檢查前24 h內(nèi)有過性行為。

1.3 儀器與試劑

使用ABI7500型核酸擴增儀(美國ABI)；使用試劑分別為中山大學(xué)達安基因股份有限公司和廣州和實生物技術(shù)有限公司。

1.4 檢測方法

(1)標本采集。取材使用無菌生理鹽水棉球洗凈尿道口，用棉拭子插入尿道約2 cm處采樣后將棉拭子放入細胞保存液中，標明檢查者信息后密封送檢。采集樣本時，受檢者必須在采集前2 h內(nèi)禁止小便。

(2)HPV檢測。利用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)實時熒光探針法檢測18種HRHPV型和兩種LR-HPV型。標本提取采用快速核酸提取方法，提取的病毒核酸加入配制好的核酸擴增反應(yīng)體系中，使用熒光PCR儀進行快速PCR擴增，并檢測熒光信號，儀器軟件系統(tǒng)自動繪制出實時擴增曲線，實現(xiàn)對標本的檢測。

1.5 觀察與評價指標

檢測有效性判斷標準：①陽性對照孔的Ct值＜40，且陰性對照孔的Ct值＞40或無Ct值為檢測有效，陽性病例檢測孔Ct值＜40，陰性病例檢測孔Ct值＞40；②質(zhì)控品，HPV陰性質(zhì)控品參與提取，用于對環(huán)境進行監(jiān)測；③HPV陽性質(zhì)控品參與提取用于PCR檢測試劑的質(zhì)量控制。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對資料進行統(tǒng)計。不同年齡組間比較采用Fisher確切概率法，采用x2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV陽性檢測結(jié)果

在6組182例樣本中共檢出HR-HPV陽性28例，陽性檢出率為15.38%；LR-HPV陽性1例，陽性檢出率為0.55%。兩種類型檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=27.314，P＜0.01)。

2.2 不同年齡段HR-HPV檢測結(jié)果

(1)按照年齡段統(tǒng)計181例HR-HPV陽性率，不同年齡組間HR-HPV分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=8.812，P＞0.05)，見表1。

表1 181名不同年齡組女性醫(yī)務(wù)人員HR-HPV感染統(tǒng)計表(例)

(2)不同年齡組HPV感染曲線發(fā)現(xiàn)HR—HPV感染有兩個年齡高峰，第1個為46～50歲(占35.0%)，第2個為36～40歲(占24.00%)，如圖1所示。

3 討論

HPV是一種誘發(fā)外生殖器良性病變和女性子宮頸癌的主要病原體，人乳頭瘤病毒依據(jù)不同亞型與宮頸癌發(fā)生危險性的高低將其分為LR-HPV和HRHPV，男性和女性均易感。

圖1 不同年齡組體檢女性醫(yī)務(wù)人員HR-HPV感染曲線圖

LR-HPV主要引起肛門皮膚及男性外生殖器、女性大小陰唇、尿道口、陰道下段的良性外生性疣類病變及低度子宮頸上皮內(nèi)瘤[4]；而HR-HPV主要誘發(fā)生殖器癌、宮頸癌及癌前病變[5]。本研究通過對醫(yī)院所有女性醫(yī)務(wù)人員的體檢結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LR-HPV的感染率遠遠低于HR-HPV的感染率且有統(tǒng)計學(xué)意義，這點與Syrj?nen等[6]報道的結(jié)果相符，因此對于女性體檢可以重點關(guān)注HR-HPV的檢測。有研究表明，持續(xù)性HR-HPV感染和多重感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件[7-9]。宮頸癌從癌前病變發(fā)展到癌是一個相對較長的過程，即宮頸感染HPV→子宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)→原位癌→早期浸潤癌→浸潤癌，研究顯示這一過程需要經(jīng)歷10年左右的時間[10]。

3.1 年齡因素

年齡是影響HPV感染的一個重要因素[11]。因此，本研究根據(jù)25～62歲不同年齡進行分組，年齡覆蓋了成年女性，范圍較廣[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，在不同年齡階段雖然感染率不同，但無統(tǒng)計學(xué)意義，這與其他學(xué)者[13-14]的研究結(jié)果可能不相符，分析其原因可能是由選擇研究人群的文化程度較高且工作性質(zhì)不同所致。不同年齡組進行體檢的女性醫(yī)務(wù)人員HR-HPV感染統(tǒng)計表顯示，在36～40歲和46～50歲兩個年齡段有明顯的峰值。

3.2 高感染率原因

分析高感染率的原因：①51歲以上年齡段受檢人數(shù)只有18人，樣本量過少，不具有代表意義；②36～40歲年齡段是HR-HPV感染的高峰期，這正與宮頸癌發(fā)病高峰年齡(50歲左右)相吻合[15]；③46～50歲的婦女多處于更年期雌激素偏低，宮頸鱗狀上皮變薄令局部免疫功能下降，致使陰道感染的清除能力及對潛伏期的抑制能力均隨著年齡的增加而呈現(xiàn)下降趨勢[16]。因此，在對女性醫(yī)務(wù)人員關(guān)于HPV感染的監(jiān)測及控制的過程中不能忽視任何一個年齡段的人員，應(yīng)對全體女性醫(yī)務(wù)工作者進行監(jiān)測和控制。

宮頸癌是女性最常見的一種惡性腫瘤，其發(fā)病率居我國女性惡性腫瘤第一位[17]。目前，HPV疫苗的研究與應(yīng)用也取得了可觀的進展，尤其在西方國家HPV疫苗的接種帶來了巨大的社會效益，對于我國乃至全世界的疾病防控和公共衛(wèi)生安全等工作具有重要意義[18-20]。

醫(yī)務(wù)人員由于其工作性質(zhì)的特殊性，是感染HPV的高發(fā)人群。針對醫(yī)務(wù)人員尤其是女性醫(yī)務(wù)人員關(guān)于HPV感染的監(jiān)測及控制，對保證女性醫(yī)務(wù)人員人體健康有重要意義。本研究結(jié)果可為醫(yī)院管理者制定本單位女性職工HPV體檢方案提供主要依據(jù)。同時，HR-HPV感染女性的配偶也是該病毒感染的高危人群，女性一旦檢測出HR-HPV感染，對其配偶進行HPV篩查就成為HPV相關(guān)癌癥預(yù)防中的重要一環(huán)。應(yīng)將HR-HPV感染女性的配偶納入HPV感染的管理、治療和跟蹤檢測范圍，在宮頸癌的一二級防治體系中給予更多的關(guān)注[17]。

為了更好地對女性醫(yī)務(wù)工作者進行宮頸癌的防控，在制定最佳宮頸癌防控方案時需將醫(yī)院所有HPV感染的型別分布特征、各年齡段感染特征、配偶檢查方法及預(yù)防措施等因素納入其中。

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