夏春芳，高 亮，魏 斌，田 甜

(1.伊犁職業(yè)技術(shù)學(xué)院，新疆伊寧 835000；2.伊犁州動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，新疆伊寧 835000)

弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起的一種人獸共患寄生蟲病。弓形蟲的生活史可以分為腸內(nèi)階段和腸外階段，腸內(nèi)階段只出現(xiàn)于終末宿主體內(nèi)，腸外階段可出現(xiàn)于終末宿主和中間宿主體內(nèi)。目前，其終末宿主已證明的有貓及一些野生貓科動(dòng)物，而其中間宿主種類很多，已報(bào)道的有200多種，包括人、犬以及其他哺乳動(dòng)物和鳥類[1-2]。弓形蟲病可使孕畜流產(chǎn)死胎，人感染后可侵害其神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心臟、淋巴內(nèi)皮系統(tǒng)等多種器官或系統(tǒng)，并造成損傷，甚至造成死亡。孕婦感染后可引起流產(chǎn)，胎兒畸形或產(chǎn)出弱智兒。有報(bào)道表明，有犬貓接觸史的孕婦弓形蟲感染率明顯高于無犬貓接觸史的孕婦[3]。隨著伊寧市經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展和人們生活水平不斷提高，寵物犬貓以及流浪犬貓的數(shù)量激增，與寵物相關(guān)的人畜共患傳染病越來越受到人們的重視，前來寵物醫(yī)院咨詢以及給犬貓做相關(guān)疾病檢測(cè)的主人絡(luò)繹不絕。為探明伊寧市寵物犬貓及流浪犬貓剛地弓形蟲的感染情況，為伊寧市弓形蟲的防控提供參考依據(jù)，筆者于2016年對(duì)伊寧市3家寵物醫(yī)院收治病例及某流浪動(dòng)物收容所隨機(jī)抽取的440份犬、貓血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)將檢測(cè)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1血清在伊寧市3家寵物醫(yī)院收治病例中隨機(jī)抽取犬貓血清樣本240份，其中寵物犬血清樣本200份，每季度抽取50份，4個(gè)季度4個(gè)不同年齡段各50份；寵物貓血清樣本20份，散養(yǎng)貓血清樣本20份；在伊寧市某流浪動(dòng)物收容所隨機(jī)抽取流浪犬血清樣本200份，每季度抽取50份新接收的流浪犬(表1)。

表1伊寧市犬貓弓形蟲病流行病學(xué)調(diào)查血清樣品采集情況

Table1SerumsamplecollectionoftoxoplasmosisofdogsandcatsinYiningCityforepidemiologicalinvestigation

診療機(jī)構(gòu)Medicalinstitutions寵物犬Petdog寵物貓Petcat流浪犬Straydog散養(yǎng)貓F(tuán)ree-rangecat小計(jì)Subtotal寵物醫(yī)院APethospitalA6850679寵物醫(yī)院BPethospitalB102807117寵物醫(yī)院CPethospitalC3070744流浪動(dòng)物收容所Thestrayanimalshelter002000200合計(jì)(平均)Total(Mean)2002020020440

1.2試劑動(dòng)物弓形蟲IgG抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))，珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)海泰生物制藥有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：20150506；弓形蟲抗體快速診斷試紙(免疫色譜分析法)，韓國(guó)安捷公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：2206DD006。

1.3儀器小型高速冷凍離心機(jī)(Beckman Allegra 64)，酶標(biāo)儀(318MC型)，電熱恒溫培養(yǎng)箱(DHP-9272B)。以上儀器設(shè)備均由伊犁職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系動(dòng)物疫病檢測(cè)中心實(shí)驗(yàn)室提供。

1.4方法使用普通真空采血管于待檢動(dòng)物前臂頭靜脈或后肢陰靜脈無菌采血1～3 mL，分離血清，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?檢測(cè)分別按照珠海海泰生物制藥有限公司和韓國(guó)安捷公司提供的生產(chǎn)說明書進(jìn)行操作。

1.5數(shù)據(jù)分析所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1不同生活狀態(tài)犬貓弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)通過對(duì)3家寵物醫(yī)院收治病例的240份犬貓血清樣本及流浪動(dòng)物收容所采集的200份犬血清樣本進(jìn)行弓形蟲IgG抗體檢測(cè)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))，440份血清樣本中，陽性數(shù)89例，陽性率20.23%，寵物犬、流浪犬、寵物貓、散養(yǎng)貓陽性率分別為15.50%、24.00%、10.00%、40.00%(表2)。通過配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，寵物犬組與流浪犬組之間差異顯著(P<0.05)，寵物貓組與散養(yǎng)貓組之間差異顯著(P<0.05)，寵物犬組與寵物貓組、流浪犬組與散養(yǎng)貓組之間差異均不顯著(P>0.05)。

表2不同生活狀態(tài)犬貓弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果

Table2Theenzyme-linkedimmunosorbentassayresultsoftoxoplasmosisofdogsandcatsindifferentlifestatus

生活狀態(tài)Stateoflife數(shù)量Quantity陽性數(shù)Positivenumber陰性數(shù)Negativenumber陽性率Positiverate∥%寵物犬Petdog2003116915.50流浪犬Straydog2004815224.00寵物貓Petcat2021810.00散養(yǎng)貓F(tuán)ree-rangecat2081240.00合計(jì)(平均)Total(Mean)4408935120.23

2.2不同季度犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果400份犬血清樣本中，每季度抽取樣本各100份(寵物犬與流浪犬各50份)，對(duì)弓形蟲IgG抗體檢測(cè)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))結(jié)果按季度統(tǒng)計(jì)分析得出，第一季度、第二季度、第三季度、第四季度的陽性率分別為14.00%、27.00%、20.00%、18.00%(表3)，再通過配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，陽性率最低的第一季度與陽性率最高的第二季度差異顯著(P<0.05)，其余各組之間差異均不顯著(P>0.05)。

表3 不同季度犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果

2.3不同年齡段寵物犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)200份寵物犬血清樣本的弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果按4個(gè)不同的年齡段分組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析得出，隨著年齡增長(zhǎng)，陽性率呈逐步升高趨勢(shì)，<1歲組、1～3歲組、3～6歲組、>6歲組的陽性率分別為8.00%、10.00%、16.00%、28.00%(表4)，再通過配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，陽性率最低的<1歲組與陽性率最高的>6歲組之間差異極顯著(P<0.01)，1～3歲組與>6歲組之間差異顯著(P<0.05)，其余各組之間差異均不顯著(P>0.05)。

表4不同年齡段寵物犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果

Table4Theenzyme-linkedimmunosorbentassayresultsoftoxoplasmosisofpetdogindifferentagegroups

年齡段Agegroups數(shù)量Quantity陽性數(shù)Positivenumber陰性數(shù)Negativenumber陽性率Positiverate∥%<1歲Lessthan1yearold504468.001～3歲1-3yearsold5054510.003～6歲3-6yearsold5084216.00>6歲Morethan6yearsold50143628.00合計(jì)(平均)Total(Mean)2003116915.50

2.4不同檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果對(duì)比對(duì)440份犬貓血清樣品進(jìn)行弓形蟲IgG抗體檢測(cè)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))的同時(shí)，采用目前伊寧市寵物診療機(jī)構(gòu)普遍使用的弓形蟲抗體快速診斷試紙(免疫色譜分析法)進(jìn)行同步檢測(cè)，快速診斷試紙檢出陽性為93例，陽性率21.14%(表5)，但通過配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，2種檢測(cè)方法之間差異性不顯著(P>0.05)。

表5 不同檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果

3 討論與結(jié)論

(1)通過此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，伊寧市犬貓弓形蟲抗體陽性率處于較高水平，440份血清樣品中陽性89例，陽性率高達(dá)20.23%，明顯高于張紅超等[4]、鄧波等[5]、謝桂萍等[6]、鄭世英等[7]的相關(guān)報(bào)道，而與馬依蘭·阿布來提等[8]的報(bào)道相近。出現(xiàn)這種情況的原因，一是與新疆獨(dú)特的地理因素和氣候環(huán)境有關(guān)，二是與飼主科學(xué)飼養(yǎng)的觀念意識(shí)及犬貓的生活狀態(tài)有關(guān)，通過對(duì)陽性犬貓的飼主走訪調(diào)查了解到，高達(dá)20%走訪飼主認(rèn)為犬應(yīng)該吃生肉，大多數(shù)飼主對(duì)犬貓的科學(xué)飼養(yǎng)常識(shí)知之甚少，對(duì)犬貓等人畜共患病的認(rèn)識(shí)欠缺，這一點(diǎn)尤其值得相關(guān)部門重視。

(2)犬貓弓形蟲感染與其生活狀態(tài)及流動(dòng)性密切相關(guān)，流浪犬、散養(yǎng)貓的陽性率顯著高于寵物犬和寵物貓(P<0.05)，這與盧愛桃等[9]、禹海杰等[10]的報(bào)道一致。伊犁作為一個(gè)牧業(yè)地區(qū)，流浪動(dòng)物與各種家畜接觸機(jī)會(huì)更多，為弓形蟲的傳播提供了便利，家畜中，豬弓形蟲病例較多，牛、羊和馬對(duì)弓形蟲易感而不易發(fā)病，后三者是弓形蟲在動(dòng)物和人間傳播的重要儲(chǔ)存庫[11]。而寵物犬貓一般生活在樓內(nèi)，飲食及環(huán)境相對(duì)衛(wèi)生，空間封閉，感染率相對(duì)較低。由此可見，相關(guān)部門非常有必要制定相關(guān)制度，加強(qiáng)寵物市場(chǎng)管理，控制流浪動(dòng)物數(shù)量。

(3)調(diào)查顯示，隨著犬貓年齡增長(zhǎng)，弓形蟲IgG抗體陽性率越高，陽性率最低的<1歲組與陽性率最高的>6歲組之間差異極顯著(P<0.01)，1～3歲組與>6歲組之間差異顯著(P<0.05)。這是由于動(dòng)物體一旦產(chǎn)生弓形蟲IgG抗體之后，可以終生存在于其體內(nèi)，另一方面也驗(yàn)證了隨著動(dòng)物年齡增長(zhǎng)，感染弓形蟲的概率提高這一結(jié)論[12]。在季節(jié)性因素方面，第二季度的陽性率最高，與陽性率最低的第一季度度差異顯著(P<0.05)，這與鄧波等[5]的報(bào)道不符，可能與新疆獨(dú)特的地理環(huán)境有關(guān)，新疆冬季較長(zhǎng)，積雪覆蓋，動(dòng)物外出機(jī)會(huì)及外出停留時(shí)間短，而第二、第三季度氣候宜人，遛狗頻率和遛狗時(shí)間都有所增加。

(4)2種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果并無明顯差異，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)雖然具有特異性和敏感性較好，易于定量，結(jié)果客觀等優(yōu)點(diǎn)[5]，但是需要更多的儀器設(shè)備，不能滿足寵物診療市場(chǎng)尤其是西部欠發(fā)達(dá)地區(qū)市場(chǎng)對(duì)價(jià)格低廉、操作簡(jiǎn)單、快捷方便的需求。目前伊寧市多數(shù)寵物診療機(jī)構(gòu)選擇使用的弓形蟲抗體快速診斷試紙(免疫色譜分析法)更適合寵物診療機(jī)構(gòu)作為臨床檢驗(yàn)使用。

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