張金鳳

肺結(jié)核是因感染結(jié)核分枝桿菌而引發(fā)的慢性傳染性疾病, 患者常在得到有效科學(xué)治療后, 獲得較好的治療效果。但是近年來隨著耐多藥肺結(jié)核的出現(xiàn), 其傳播及蔓延再次成為醫(yī)療界關(guān)注的重點(diǎn)。肺結(jié)核是以體內(nèi)變態(tài)反應(yīng)及細(xì)胞免疫為基礎(chǔ)的傳染病, 其以T細(xì)胞調(diào)節(jié)為主。肺結(jié)核患者往往免疫力低下, 耐多藥肺結(jié)核患者更為明顯［1］。在結(jié)核病的診斷方法中, 結(jié)核菌素試驗(yàn)是常規(guī)的檢查方法, 但是其假陽性率較高。相關(guān)研究顯示, 感染性T細(xì)胞檢測是一種特異性與敏感性均較高的新興檢查方法［2］。本研究圍繞感染性T細(xì)胞檢測在耐多藥肺結(jié)核中的應(yīng)用效果展開討論, 取得了較為滿意的結(jié)果, 現(xiàn)具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究行回顧性調(diào)查法, 隨機(jī)選取本院2016年1月～2018年1月收治的36例耐多藥肺結(jié)核患者為A組, 同期78例健康者作為B組。A組中男20例, 女16例；年齡23～73歲, 平均年齡(39.2±11.8)歲；結(jié)核分類：10例為原發(fā)性肺結(jié)核, 26例為繼發(fā)性肺結(jié)核。B組中男48例, 女40例, 年齡22～79歲, 平均年齡(40.1±13.5)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理會(huì)討論并通過, 所有研究對象知曉本次研究內(nèi)容, 并愿意參與。

1.2 方法 兩組研究對象分別進(jìn)行感染性T細(xì)胞檢測、結(jié)核菌素試驗(yàn)、血清抗結(jié)核抗體檢測、結(jié)核PCR試驗(yàn)、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及抗酸桿菌涂片。

1.2.1 感染性T細(xì)胞檢測 取兩組研究對象各5 ml的靜脈血, 添加枸櫞酸鈉抗凝, 分離單核細(xì)胞后將其放置于微孔板上［其內(nèi)含有干擾素(IFN)-7抗體、早期分泌抗原靶蛋白-6(ESAT-6)及培養(yǎng)濾液蛋白10(CFP-10)抗原］, 于37℃的環(huán)境中恒溫培養(yǎng)。24 h后, 洗脫抗原致敏效應(yīng)T細(xì)胞, 并加入二抗(由生物素標(biāo)記), 在酶聯(lián)顯色后, 于細(xì)胞因子處形成斑點(diǎn), 其斑點(diǎn)數(shù)即為T淋巴細(xì)胞的數(shù)量。當(dāng)陰性對照孔斑點(diǎn)數(shù)＜6時(shí)且測試孔斑點(diǎn)數(shù)減去陰性對照孔斑點(diǎn)數(shù)≥6, 為陽性；或當(dāng)陰性對照孔斑點(diǎn)數(shù)≥6且測試孔斑點(diǎn)數(shù)≥2倍陰性對照孔斑點(diǎn)數(shù) , 為陽性［3］。

1.2.2 其他檢測方法 ①結(jié)核菌素試驗(yàn)：取0.1 ml 結(jié)核菌素純蛋白衍生物(PPD), 即包括5單位結(jié)核菌素, 進(jìn)行前臂尺側(cè)皮內(nèi)實(shí)驗(yàn), 2～3 d后觀察結(jié)果, 試驗(yàn)的硬結(jié)若≥10 mm即視為陽性；②血清抗結(jié)核抗體檢測：通過酶標(biāo)儀檢測光密度值(OD值), 對照標(biāo)準(zhǔn)滴度曲線查詢相應(yīng)的抗結(jié)核抗體滴度, 其值＞400 U/ml即視為陽性；③結(jié)核PCR試驗(yàn)：對結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行DNA檢測；④抗酸桿菌涂片；⑤結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 比較兩組檢測結(jié)果、A組患者不同檢測方法檢測結(jié)果, 分析不同檢測方法敏感性、特異性與準(zhǔn)確性。計(jì)算公式如下：①特異性=真陰性數(shù)/(真陰性數(shù)+假陽性數(shù))×100%；②敏感性=真陽性數(shù)/(真陽性數(shù)+假陰性數(shù))×100%；③準(zhǔn)確性=(真陽性數(shù)+真陰性數(shù))/總數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對象檢測結(jié)果、A組患者不同檢測方法檢測結(jié)果比較 A組患者感染性T細(xì)胞檢測、血清抗結(jié)核抗體檢測、結(jié)核PCR試驗(yàn)、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、抗酸桿菌涂片、結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果陽性率分別為94.4%(34/36)、13.9%(5/36)、16.7%(6/36)、27.8%(10/36)、2.78%(1/36)、55.6%(20/36),B 組分別為 2.56%(2/78)、23.1%(18/78)、5.13%(4/78)、0、0、25.6%(20/78)。A組患者感染性T細(xì)胞檢測陽性率高于其他檢測方法, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；A組患者感染性T細(xì)胞檢測、結(jié)核PCR試驗(yàn)、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果陽性率均高于B組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 不同檢測方法敏感性、特異性與準(zhǔn)確性分析 感染性T細(xì)胞檢測敏感性、特異性、準(zhǔn)確性分別為94.4%(34/36)、97.4%(76/78)、96.5%(110/114), 血清抗結(jié)核抗體檢測分別為13.9%(5/36)、76.9%(60/78)、57.0%(65/114), 結(jié)核 PCR 試驗(yàn)分別為16.7%(6/36)、94.9%(74/78)、70.2%(80/114), 結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)分別為27.8%(10/36)、100.0%(78/78)、77.2%(88/114),抗酸桿菌涂片分別為2.8%(1/36)、100.0%(78/78)、69.3%(79/114), 結(jié)核菌素試驗(yàn)分別為55.6%(20/36)、74.4%(58/78)、68.4%(78/114)。綜合對比, 感染性T細(xì)胞檢測是最理想的檢查方式。

3 討論

由WHO粗略統(tǒng)計(jì), 每年全球大約有20億人感染結(jié)核桿菌, 200萬人因感染而導(dǎo)致死亡。我國是結(jié)核的高發(fā)地區(qū),且近年來其發(fā)病率有上升的趨勢, 因此如何有效控制結(jié)核桿菌的蔓延及預(yù)防耐藥菌的產(chǎn)生是臨床工作的重點(diǎn)［4-6］。

目前臨床常用的篩查結(jié)核桿菌的方法是結(jié)核桿菌試驗(yàn),但其假陽性率較高；結(jié)核PCR技術(shù)是一種較為新型的檢測方法, 但其過程較為繁瑣且結(jié)果并未呈現(xiàn)一個(gè)較為滿意的可靠性而限制了其應(yīng)用。血清結(jié)核桿菌抗體試驗(yàn)的敏感度較低,因檢查費(fèi)用昂貴而應(yīng)用不廣。相關(guān)研究報(bào)道, 近年來興起的感染性T細(xì)胞檢測具有較為理想的敏感性與特異性, 其應(yīng)用原理是通過斑點(diǎn)數(shù)來推斷患者體內(nèi)的結(jié)核菌群數(shù), 檢測效應(yīng)T細(xì)胞來診斷是否受到結(jié)核桿菌的感染［7,8］。當(dāng)機(jī)體長期暴露于結(jié)核桿菌的感染下時(shí), 當(dāng)抗原再次侵犯能迅速激發(fā)體內(nèi)的免疫反應(yīng), 從而分泌γ-干擾素, 對結(jié)核桿菌的判斷及是否處于活動(dòng)狀態(tài)有較高的臨床意義［9,10］。同時(shí), 該檢測方法簡單易行, 價(jià)格便宜, 且屬于體外試驗(yàn), 患者更容易接受。綜上所述, 對于耐多藥肺結(jié)核而言, 感染性T細(xì)胞檢測具有較為理想的特異性與敏感性, 對耐多藥肺結(jié)核的檢出更具優(yōu)勢, 值得在臨床中進(jìn)一步推廣。