林銘軒,陳 陽(yáng), 王東霞,溫得中,王宇聲*

(1.吉林大學(xué)第一醫(yī)院 耳鼻咽喉-頭頸外科,吉林 長(zhǎng)春130021;2.吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 遺傳學(xué)系)

喉癌(LC)作為耳鼻喉科常見(jiàn)的惡性腫瘤，對(duì)人類(lèi)的健康存在嚴(yán)重的危害。其發(fā)病率僅次于鼻咽癌和鼻腔癌的發(fā)病率成為第三高的頭頸部腫瘤，近年來(lái)的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)[1]，全世界發(fā)達(dá)地區(qū)所有腫瘤的約5.1%，欠發(fā)達(dá)地區(qū)的發(fā)病率約3.5%。喉癌的發(fā)生通常為不同因素共同作用的結(jié)果，除吸煙、飲酒、HPV病毒感染、環(huán)境因素、放射線(xiàn)暴露等病因之外，眾多研究也表明其發(fā)生與細(xì)胞凋亡、調(diào)控存在關(guān)聯(lián)。而機(jī)體的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)能夠得以維持的一個(gè)重要因素就是細(xì)胞的正常凋亡，由細(xì)胞凋亡的抑制引發(fā)的細(xì)胞周期延長(zhǎng)是腫瘤發(fā)生的因素之一[2]。細(xì)胞凋亡抑制家族(IAP)是一系列細(xì)胞內(nèi)蛋白，可通過(guò)多種刺激誘導(dǎo)抑制細(xì)胞凋亡，而Survivin基因是近期發(fā)現(xiàn)的抑制活性最強(qiáng)的蛋白。本文將對(duì)Survivin基因及其免疫產(chǎn)物抗Survivin抗體在喉癌診斷中的作用作一簡(jiǎn)要綜述。

1 Survivin基因簡(jiǎn)介

人類(lèi)Survivin基因的全長(zhǎng)約為14.7 kb，位于染色體17q25，是一個(gè)具有4個(gè)外顯子及三個(gè)內(nèi)含子并含有多個(gè)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的IAP蛋白[3]，是IAP家族分子量最小但抗凋亡活性最強(qiáng)的成員[4]。位于正常成人組織，包括結(jié)腸黏膜、胎盤(pán)、骨髓和角質(zhì)形成細(xì)胞的基底層皮膚，在胚胎組織也有Survivin的存在[5]。該基因具有多種生物學(xué)功能，可以抑制凋亡，促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞耐藥[6]。Survivin基因的高表達(dá)與細(xì)胞周期中DNA合成后期/有絲分裂期(G2/M期)有關(guān)聯(lián)。有研究發(fā)現(xiàn)[7]，當(dāng)Survivin在體外和體內(nèi)抑制凋亡時(shí)，與其他幾種IAP介導(dǎo)的細(xì)胞保護(hù)相比，該途徑可能更具選擇性。

2 Survivin基因與抗Survivin基因的相關(guān)性

通過(guò)研究腫瘤相關(guān)抗原(TAA)及其自身抗體發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞可以誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)[8]。同時(shí)免疫系統(tǒng)通過(guò)放大效應(yīng)能夠使血清中出現(xiàn)的相關(guān)抗體，使得血清抗體檢測(cè)在臨床治療決策中起到重要的作用[9]。研究發(fā)現(xiàn)Survivin基因能夠促使腫瘤患者出現(xiàn)免疫抗體反應(yīng)[10]，機(jī)體進(jìn)一步出現(xiàn)由T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，并產(chǎn)生抗survivin抗體[11]。Naoki[12]等人應(yīng)用定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)頭頸部腫瘤中Survivin基因的表達(dá)，同時(shí)通過(guò)ELISA法檢驗(yàn)相關(guān)頭頸腫瘤患者中血清中抗Survivin抗體表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)有76.4%的患者血清中抗survivin抗體為陽(yáng)性，同時(shí)大多數(shù)的腫瘤組織的Survivin基因表達(dá)也為陽(yáng)性。同時(shí)相關(guān)研究認(rèn)為Survivin基因與抗Survivin基因抗體之間存在較強(qiáng)的相關(guān)性[11],陽(yáng)性Survivin基因表達(dá)是產(chǎn)生其抗體的條件之一。而人類(lèi)腫瘤細(xì)胞中Survivin基因的高表達(dá)，也使得其血清抗體檢測(cè)能夠廣泛的應(yīng)用于臨床實(shí)踐中。

3 抗Survivin抗體作為腫瘤標(biāo)記物

理想的腫瘤標(biāo)記物是指在惡性腫瘤中高表達(dá)，在良性或正常組織中不表達(dá)或低表達(dá)的一類(lèi)活性物質(zhì)。在臨床上主要應(yīng)用于原發(fā)腫瘤的發(fā)現(xiàn)、腫瘤高危人群的篩查、良惡性腫瘤的鑒別、腫瘤發(fā)展程度的判斷、腫瘤治療效果的觀(guān)察和評(píng)價(jià)以及腫瘤復(fù)發(fā)和預(yù)后的預(yù)測(cè)等方面。在100多種腫瘤特異性表達(dá)基因中，Survivin基因的表達(dá)特異性位列前四[13]。通過(guò)免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHC)能夠研究Survivin基因在惡性腫瘤早期作為預(yù)測(cè)因子在癌前病變和腫瘤組織中的潛在作用[14]。此外，當(dāng)機(jī)體內(nèi)腫瘤抗原數(shù)量較少無(wú)法有效檢測(cè)時(shí)，機(jī)體內(nèi)血清中的癌細(xì)胞抗原能夠被人體免疫系統(tǒng)識(shí)別，進(jìn)而誘發(fā)免疫反應(yīng)，增加抗體數(shù)量，使得通過(guò)血液檢測(cè)能夠早期發(fā)現(xiàn)抗體量的變化，也為早期發(fā)現(xiàn)腫瘤提供了一定的依據(jù)。

4 Survivin基因與抗Survivin抗體在喉癌診斷中的意義

4.1 Survivin在喉癌診斷中的意義

很多研究證實(shí)Survivin基因與喉惡性腫瘤的發(fā)生有一定的內(nèi)在聯(lián)系。Wang[15]等人選擇的64例喉癌患者，26例癌前病變患者和34例聲帶息肉患者中，其免疫組織化學(xué)染色結(jié)果提示喉癌組中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌前組及聲帶息肉組。喉癌組織中Survivin的表達(dá)在臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明Survivin在喉癌的發(fā)生和發(fā)展中可能有著重要作用；文連姬[16]等通過(guò)實(shí)驗(yàn)顯示Survivin在喉癌中的陽(yáng)性率高達(dá)66.6%；該研究還發(fā)現(xiàn)，Survivin在癌旁組織及喉癌前病變中有均有輕度表達(dá)，提示了Survivin基因可能于喉癌惡化的早期表達(dá)。Pizem[17]等人的研究發(fā)現(xiàn)，Survivin基因表達(dá)程度增高與野生p53的缺乏之間可能存在關(guān)聯(lián)。Survivin基因在喉癌的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要的作用，此外其表達(dá)程度與喉癌的預(yù)后正相關(guān)[18]。

4.2 抗Survivin抗體在喉癌診斷中的意義

雖然目前尚未發(fā)現(xiàn)可用于喉癌早期診斷和跟蹤的特異性敏感標(biāo)記物[19]，但因腫瘤細(xì)胞具有免疫原性，因此可利用其生長(zhǎng)引發(fā)的免疫應(yīng)答作為潛在的診斷工具。通過(guò)體液免疫自身抗體的形成可用作腫瘤暴露的標(biāo)志物[20]。即使抗原表達(dá)量較少，利用自身形成的抗體，在血清中也是可檢測(cè)的。Survivin被自身T 細(xì)胞識(shí)別后，血清中會(huì)發(fā)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的抗Survivin抗體，該抗體可能成為喉癌在早期診斷、預(yù)后判斷及觀(guān)察術(shù)后復(fù)發(fā)情況的標(biāo)記[21]。這些也都提示抗Survivin抗體可以在機(jī)體中更早的被檢測(cè)出來(lái)，為疾病的早期診斷提供幫助。楊旋[22]使用ELISA法檢測(cè)喉癌患者外周血清中抗Survivin抗體，通過(guò)對(duì)手術(shù)前喉癌患者與正常對(duì)照組患者的抗Survivin抗體陽(yáng)性率比較，發(fā)現(xiàn)術(shù)前喉癌患者的外周血血清中抗Survivin抗體的陽(yáng)性率明顯高于正常對(duì)照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該研究顯示臨床分期晚(III+Ⅳ期)的喉癌患者血清中的抗Survivin抗體陽(yáng)性率高于臨床分期早(I+II期)的患者；而臨床分期早的患者預(yù)后較分期晚的患者更好。?同時(shí)Chang[23]等人認(rèn)為抗survivin抗體的表達(dá)與是否伴隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在顯著相關(guān)性，抗Survivin抗體也與腫瘤的侵襲性相關(guān)，血清中自身抗體能夠提示細(xì)胞狀態(tài)，通過(guò)無(wú)創(chuàng)的方式檢測(cè)頭頸部腫瘤患者外周血中的抗Survivin抗體數(shù)量。此外，Eto[24]等人對(duì)進(jìn)行不同方式治療前后的喉癌患者血清及抗Survivin抗體水平的檢測(cè)，結(jié)果顯示治療前均出現(xiàn)抗Survivin抗體升高現(xiàn)象；而經(jīng)過(guò)手術(shù)加放射治療或單純手術(shù)治療后的所有患者，即使分期不同的患者治療后抗Survivin抗體水均有平明顯下降。因而推測(cè)抗Survivin抗體作為相關(guān)腫瘤標(biāo)記物在喉癌患者預(yù)后評(píng)估中具有一定的診斷意義。綜上所屬，抗Survivin 抗體可能成為一種新喉癌標(biāo)記分子，能夠提示腫瘤細(xì)胞狀態(tài)，或許可以作為喉癌早期診斷的依據(jù)，并可以通過(guò)對(duì)抗Survivin抗體的檢測(cè)判斷患者手術(shù)預(yù)后情況。

5 小結(jié)

血清是一種取材方便，易獲得的檢測(cè)樣本，而血清檢測(cè)疾病也具有敏感性高、特異性強(qiáng)、微創(chuàng)、可重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)易被患者所接受[22]。因此，外周血的相關(guān)基因檢測(cè)也是一種可應(yīng)用于無(wú)瘤人群與患癌人群間、應(yīng)用不同的治療方式以及腫瘤治療效果等諸多方面的評(píng)估。Survivin基因作為IAP家族的新成員，存在與其他凋亡抑制蛋白不同的性質(zhì)與結(jié)構(gòu)。此外Survivin基因普遍存在于多種腫瘤內(nèi)，大量實(shí)驗(yàn)證明抗Survivin抗體量對(duì)喉癌的早期診斷具有一定意義。而Survivin基因與抗Survivin抗體也具有顯著的相關(guān)性。其抗體不同的表達(dá)程度與喉癌的臨床分期、腫瘤分化存在相關(guān)性，即臨床分期晚、腫瘤分化程度差，其在喉癌組織中表達(dá)量高。Survivin在喉癌組織中的高表達(dá)與組織細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制相關(guān)，該基因能夠使腫瘤細(xì)胞繞開(kāi)正常凋亡過(guò)程，使細(xì)胞異常增生，不斷增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)展速度加快，同時(shí)也為腫瘤的靶向治療提供了新的方向。大量研究也證實(shí)抗Survivin抗體數(shù)量與喉癌的發(fā)病程度以及預(yù)后情況存在關(guān)聯(lián)，通過(guò)不同方式治療(如手術(shù)、放療等)前后的抗體數(shù)量檢測(cè)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，其表達(dá)量也有著顯著的差異，也為腫瘤患者的預(yù)后判斷提供了一定的依據(jù)。綜上所述，抗Survivin抗體無(wú)論在喉癌的早期診斷抑或?qū)κ中g(shù)預(yù)后效果、復(fù)發(fā)情況判斷等方面存在積極的效果，且外周血采集簡(jiǎn)單方便，臨床容易操作。但抗Survivin抗體作為腫瘤標(biāo)記物的價(jià)值仍然存在在爭(zhēng)議，需要更多樣本、更長(zhǎng)期的臨床觀(guān)察應(yīng)用來(lái)進(jìn)一步證實(shí)。

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