張 倩 堅 哲 劉 玲 李 凱

白癜風(fēng)是一種常見的由表皮黑素細(xì)胞破壞導(dǎo)致的色素脫失性疾病[1]。以往研究表明，遺傳易感、自身免疫、氧化應(yīng)激等多種因素協(xié)同作用導(dǎo)致其發(fā)病[2-5]。由于其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，缺乏針對該疾病關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行特異干預(yù)和阻斷，治療極為困難。近年來，越來越多的研究聚焦于自身免疫所介導(dǎo)的黑素細(xì)胞破壞，取得了一系列進(jìn)展。本文就白癜風(fēng)的細(xì)胞免疫發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 黑素細(xì)胞特異性T細(xì)胞

白癜風(fēng)的組織病理結(jié)果示：皮損及皮損周表皮基底層黑素細(xì)胞減少或消失，其下方真皮淺層可見淋巴細(xì)胞浸潤。進(jìn)一步確定浸潤的淋巴細(xì)胞以CD8+T細(xì)胞為主，少量為CD4+T細(xì)胞，且患者CD4+/CD8+T細(xì)胞比率較正常皮膚明顯降低，表明該浸潤是以Th1細(xì)胞為主的浸潤模式[6]。體內(nèi)外研究證實白癜風(fēng)黑素細(xì)胞損傷是由皮損浸潤的黑素細(xì)胞特異性CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)毒性殺傷作用所致[7,8]。

趨化因子是調(diào)控人體免疫細(xì)胞、組織、器官特異性遷移的關(guān)鍵信號源，可與其受體結(jié)合，共同趨化和激活靶細(xì)胞，參與細(xì)胞遷移；具有調(diào)節(jié)造血、參與固有及適應(yīng)性免疫應(yīng)答、促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移等作用。Th1細(xì)胞表面表達(dá)CCR5、CXCR3等趨化因子受體，介導(dǎo)Th1型免疫細(xì)胞組織定向遷移。2010年美國弗吉尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院白癜風(fēng)研究團(tuán)隊在過繼轉(zhuǎn)移黑素細(xì)胞特異性CD8+T細(xì)胞誘導(dǎo)的白癜風(fēng)小鼠模型，發(fā)現(xiàn)敲除CXCR3顯著改善白癜風(fēng)表型，證實白癜風(fēng)黑素細(xì)胞特異性CD8+T皮膚遷移依賴趨化因子受體CXCR3[8]。2012年，美國麻省大學(xué)醫(yī)學(xué)院Harris團(tuán)隊通過構(gòu)建表皮具有黑素細(xì)胞的小鼠模型，并在此基礎(chǔ)上過繼轉(zhuǎn)移黑素細(xì)胞特異性CD8+T細(xì)胞，得到了表型與人類白癜風(fēng)幾乎一致的小鼠，發(fā)現(xiàn)抗體阻斷IFN-γ顯著抑制白癜風(fēng)表型及CD8+T細(xì)胞皮膚遷移[9]。然而，由于IFN-γ具有清除病原體維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)這一重要功能，并不適合作為白癜風(fēng)靶向治療靶點。值得注意的是，IFN-γ是CXCR3的配體即趨化因子CXCL9、10、11表達(dá)的重要誘導(dǎo)因子，提示IFN-γ下游的趨化信號可能成為白癜風(fēng)靶向治療潛在靶點。該研究團(tuán)隊再次利用其白癜風(fēng)小鼠模型證實了靶向“IFN-γ-CXCL10-CXCR3”趨化信號軸顯著阻斷CD8+T細(xì)胞皮膚遷移，抑制白癜風(fēng)發(fā)展并復(fù)色[10]。

辛伐他汀是3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶的抑制劑，可通過甲羥戊酸途徑抑制膽固醇的生物合成，是FDA批準(zhǔn)治療高膽固醇血癥藥物。2004年有個案報道予以高劑量辛伐他汀(80 mg)治療高膽固醇血癥患者，患者白癜風(fēng)皮損顯著復(fù)色[11]。研究證實，辛伐他汀通過抑制IFNr-STAT1通路調(diào)控下游基因表達(dá)，具有重要的抗炎作用。基于此，該研究團(tuán)隊推測，辛伐他汀可能通過抑制IFN-γ-STAT1-CXCL10-CXCR3趨化信號治療白癜風(fēng)。通過在體研究證實，辛伐他汀可直接抑制黑素細(xì)胞特異性CD8+T細(xì)胞增殖、皮膚遷移及效應(yīng)因子IFN-γ分泌，具有顯著的白癜風(fēng)治療作用[12]。以上研究進(jìn)展強烈提示靶向抑制黑素細(xì)胞特異性CD8+T細(xì)胞皮膚遷移信號，是白癜風(fēng)治療的新策略。

2 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)作為維持免疫穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵調(diào)控者，其數(shù)目和(或)功能異常均可打亂機(jī)體免疫平衡，導(dǎo)致多種自身免疫性疾病的發(fā)生，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、斑禿等。

Treg細(xì)胞功能喪失與白癜風(fēng)的發(fā)病相關(guān)，這一概念最早來源于黑素瘤免疫治療研究中，研究者發(fā)現(xiàn)在小鼠黑素瘤模型中去除Treg細(xì)胞，不僅可引發(fā)黑素瘤細(xì)胞特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞的活化，進(jìn)而殺傷黑素瘤細(xì)胞，而且產(chǎn)生白癜風(fēng)樣的“副作用”[13]，初步認(rèn)識到Treg細(xì)胞可能參與白癜風(fēng)的發(fā)生。隨后較多臨床研究發(fā)現(xiàn)，在白癜風(fēng)發(fā)病早期或進(jìn)展期白癜風(fēng)患者外周血中Treg細(xì)胞比率顯著低于正常對照，皮損周邊Treg細(xì)胞比率也明顯降低[14]。但也有部分研究表明白癜風(fēng)患者外周血及皮損周Treg細(xì)胞比率未見明顯改變，甚至比例增高[15,16]。這可能由于不同的研究小組納入的患者臨床分期和疾病進(jìn)展情況存在差異，因此結(jié)論也不盡相同。遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)oxp3、IL-10、TGF-β、CTLA-4等調(diào)控Treg細(xì)胞的關(guān)鍵基因的多態(tài)性顯著增加白癜風(fēng)發(fā)病風(fēng)險[17-20]，提示Treg細(xì)胞功能異常參與白癜風(fēng)發(fā)病。有學(xué)者通過Treg細(xì)胞與效應(yīng)細(xì)胞共培養(yǎng)方式，發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)患者Treg細(xì)胞抑制功能相關(guān)的分子如Foxp3、TGF-β1、IL-10等的表達(dá)均降低，導(dǎo)致Treg抑制功能減弱，可能是導(dǎo)致白癜風(fēng)發(fā)生及進(jìn)展的原因[21]。

越來越多的證據(jù)表明Treg細(xì)胞參與白癜風(fēng)發(fā)病，因此有不少學(xué)者開始嘗試靶向調(diào)控Treg細(xì)胞數(shù)目和(或)功能是來治療白癜風(fēng)。Chatterjee等[15]發(fā)現(xiàn)，過繼轉(zhuǎn)移Treg細(xì)胞可使白癜風(fēng)小鼠模型脫色的毛發(fā)復(fù)色，提示Treg細(xì)胞在阻止白癜風(fēng)發(fā)展中具重要作用。研究發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)患者皮損處募集Treg細(xì)胞至皮損局部的趨化因子CCL22的表達(dá)明顯降低，Eby等[22]在白癜風(fēng)小鼠模型中給予CCL22基因治療可增加Treg細(xì)胞向皮膚遷移，抑制CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的的黑素細(xì)胞殺傷效應(yīng)。此外，Chatterjee等[15]發(fā)現(xiàn)雷帕霉素通過誘導(dǎo)h3TA2白癜風(fēng)小鼠Treg細(xì)胞擴(kuò)增，促進(jìn)小鼠毛發(fā)及白斑復(fù)色，黑素細(xì)胞再生。以上研究均證實靶向調(diào)控Treg細(xì)胞數(shù)目，誘導(dǎo)Treg細(xì)胞皮膚遷移并促進(jìn)其增值分化，可有效減少CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的黑素細(xì)胞殺傷效應(yīng)，起到治療白癜風(fēng)的作用。

3 Th17細(xì)胞

輔助性T細(xì)胞17(T helper cell 17, Th17)是一種新發(fā)現(xiàn)的能夠分泌白介素17(IL-17)的T細(xì)胞亞群，在自身免疫性疾病和機(jī)體防御反應(yīng)中具有重要的意義。IL-17是T細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的早期啟動因子，可以通過促進(jìn)釋放前炎性細(xì)胞因子來放大炎癥反應(yīng)。靶向細(xì)胞因子IL-17治療可有效阻斷RA、MS等的疾病進(jìn)展。

免疫組化發(fā)現(xiàn)，相較于正常人皮膚，白癜風(fēng)患者皮損Th17細(xì)胞數(shù)量增多[23]；白癜風(fēng)患者外周循環(huán)中Th17細(xì)胞數(shù)目增多，且血清中IL-17水平升高與白癜風(fēng)的發(fā)病時間、程度及活動性密切相關(guān)[24]；研究發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)小鼠模型中Th17細(xì)胞比例增高，抗原特異性TCR刺激后可引起IL-17A分泌增多[25]；此外，UVB照射可明顯減少IL-17的分泌[26]，提示靶向Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子可有效改善白癜風(fēng)皮損。

4 DC細(xì)胞

DC細(xì)胞是機(jī)體功能最強的專職抗原遞呈細(xì)胞，能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原，有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。白癜風(fēng)患者皮損周及外周循環(huán)中CD11b+CD11c+DC細(xì)胞均明顯增高，可增強抗原提呈激活適應(yīng)性免疫，參與白癜風(fēng)發(fā)病[27]。

誘導(dǎo)型熱休克蛋白70(HSP70i)是生物體細(xì)胞在壓力誘導(dǎo)下合成的一組具有高度保守性的蛋白質(zhì)，可激活DC的活化，增強抗原提呈。Mosenson等[28]研究發(fā)現(xiàn)HSP70i可顯著誘導(dǎo)白癜風(fēng)小鼠色素脫失；而突變型HSP70i可通過阻斷DC細(xì)胞的活化與遷移起到治療白癜風(fēng)的作用；并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)相較于正常人黑素細(xì)胞，白癜風(fēng)來源的黑素細(xì)胞在應(yīng)激狀態(tài)釋放出更多的HSP70i，而白癜風(fēng)患者皮損處同樣發(fā)現(xiàn)存在大量的HSP70i，且主要定位于黑素小體[29]，這表明應(yīng)激狀態(tài)下黑素細(xì)胞產(chǎn)生大量的HSP70i，通過活化DC增強抗原提呈，進(jìn)而誘導(dǎo)過度免疫活化。上述研究均支持DC細(xì)胞在白癜風(fēng)發(fā)病中發(fā)揮重要作用，同時提示靶向HSP70i阻斷DC的抗原提呈可有效抑制白癜風(fēng)的進(jìn)展。

5 結(jié)論

目前，白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明?，F(xiàn)有研究證實，氧化應(yīng)激條件下，黑素細(xì)胞產(chǎn)生大量HSP70i，增強DC抗原提呈作用，一方面通過產(chǎn)生自身抗體破壞黑素細(xì)胞，另一方面過度活化淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生黑素細(xì)胞特異性CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)黑素細(xì)胞損傷，并紊亂Treg/Th17細(xì)胞的免疫狀態(tài)，最終導(dǎo)致皮膚白斑形成。因此，針對白癜風(fēng)的關(guān)鍵免疫發(fā)病環(huán)節(jié)進(jìn)行特異干預(yù)和阻斷，具有極大的治療前景。

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