□ 李 莉 金銘特 浙江省杭州市余杭區(qū)食品藥品監(jiān)測(cè)中心

1 黃曲霉毒素的危害與影響

黃曲霉毒素（AFT）是一種化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，是二氫呋喃香豆素的衍生物。而黃曲霉毒素就是由黃曲霉、寄生曲霉產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，其主要出現(xiàn)在一些濕熱地區(qū)的食品以及飼料中。黃曲霉毒素在土壤、各種堅(jiān)果以及動(dòng)植物中廣泛存在，容易污染花生、玉米以及小麥等糧油產(chǎn)品，是一種對(duì)人體健康產(chǎn)生較大危害的霉菌毒素。2016年，歐盟對(duì)于黃曲霉毒素共發(fā)出原始通報(bào)2 993份，原始通報(bào)產(chǎn)生的后續(xù)跟蹤信息7 288條，總體2016年通報(bào)比2015年增長(zhǎng)11.1%。在歐盟報(bào)告中明確與中國(guó)有關(guān)信息主要包括中國(guó)堅(jiān)果、堅(jiān)果產(chǎn)品和籽類中黃曲霉毒素被通報(bào)數(shù)量排名第5，通報(bào)數(shù)量為50條；原產(chǎn)中國(guó)的花生被通報(bào)49條，其中48條采取邊境拒絕措施；我國(guó)產(chǎn)品被通報(bào)總數(shù)254條，同比下降35.53%?，F(xiàn)階段如何解決黃曲霉毒素問(wèn)題已經(jīng)是食品安全領(lǐng)域的重點(diǎn)問(wèn)題[1]。

2 高效液相色譜法（HPLC檢測(cè)法）

通過(guò)HPLC檢測(cè)法加強(qiáng)對(duì)黃曲霉毒素的檢測(cè)是現(xiàn)階段較為權(quán)威的方式。通過(guò)高效液相色譜以及熒光檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)在實(shí)踐中效果顯著。其中，HPLC檢測(cè)法就是一種色譜法，以甲醇等液體作為其流動(dòng)相，利用四元泵把一些緩沖液以及溶劑泵入色譜柱之中，這樣就會(huì)分離在樣品中的不同組分，其被分離的物質(zhì)在進(jìn)入檢測(cè)系統(tǒng)中就會(huì)被發(fā)現(xiàn)。高效液相色譜法在檢測(cè)黃曲霉毒素的過(guò)程中，首先要利用三氯甲烷、甲醇等溶液的提取溶劑對(duì)要監(jiān)測(cè)物質(zhì)進(jìn)行處理，提取黃曲霉素樣品，然后利用過(guò)濾膜過(guò)濾之后放置在反相色譜柱中，再通過(guò)熒光檢測(cè)器對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)的監(jiān)測(cè)分析，通過(guò)對(duì)獲得的峰高以及峰面積利用綜合外標(biāo)法進(jìn)行分析，就可以了解在被檢測(cè)物中黃曲霉毒素的具體含量[2]。

而在實(shí)踐中為了提升樣品的純度，避免各種雜質(zhì)的影響，可以將HPLC檢測(cè)技術(shù)與免疫親和層析技術(shù)相結(jié)合，進(jìn)而檢測(cè)黃曲霉毒素的特異性以及靈敏性。在黃曲霉毒素進(jìn)入免疫親和柱的時(shí)候，其產(chǎn)生的免疫親核反應(yīng)會(huì)吸附在柱內(nèi)的固體支持物中，而在提取融合劑流于親和柱的時(shí)候，存在的抗體就會(huì)與黃曲霉毒素進(jìn)行融合。通過(guò)清水沖洗就可以有效消除在免疫親和色譜柱中殘留的各種雜質(zhì)，再利用甲醇等洗脫劑就可以清除殘留的黃曲霉毒素[3]。

而為了獲得精準(zhǔn)的黃曲霉素B1以及黃曲霉毒素M1的靈敏度，可以應(yīng)用光化學(xué)衍生技術(shù)、

電化學(xué)衍生技術(shù)以及碘衍生技術(shù)、三氟乙酸柱前衍生化技術(shù)等。其中三氟乙酸柱前衍生化技術(shù)是現(xiàn)階段AOAC應(yīng)用中的重要技術(shù)，在實(shí)踐中靈敏度較高。

FLD檢測(cè)器方式應(yīng)用在液相色譜檢測(cè)中，具有分辨率高、靈敏度高且精準(zhǔn)性較強(qiáng)的特征。在實(shí)踐中可以對(duì)不同類型的黃曲霉素進(jìn)行科學(xué)的分析。但是因?yàn)槠鋺?yīng)用步驟流程相對(duì)較為復(fù)雜，黃曲霉素的種類繁多，各種結(jié)構(gòu)較為相似，在進(jìn)行分離處理的時(shí)候就會(huì)浪費(fèi)大量的人力、物力以及時(shí)間資源。同時(shí)，黃曲霉素的G1、B1檢測(cè)靈敏度相對(duì)較低，在實(shí)踐中必須要通過(guò)衍生化的方式對(duì)其進(jìn)行處理，對(duì)于HPLC檢測(cè)操作人員的要求較為嚴(yán)格，因此，主要在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用。

3 液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS）

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是通過(guò)色譜技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行分離，再通過(guò)聯(lián)合質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)樣品。在實(shí)踐中質(zhì)譜技術(shù)具有一定的檢測(cè)優(yōu)勢(shì)，且其選擇性良好，是今后檢測(cè)黃曲霉素的重要技術(shù)。在實(shí)踐中，通過(guò)溶液提取樣品中的黃曲霉素，然后進(jìn)行樣品稀釋以及純化處理，對(duì)其進(jìn)行免疫親和柱的純化吸附，通過(guò)霉菌毒素多功能凈化站對(duì)其進(jìn)行吸附純化處理，其提取液通過(guò)液相色譜柱對(duì)其進(jìn)行分離，通過(guò)電噴霧的方式對(duì)其進(jìn)行離子化處理。在監(jiān)測(cè)過(guò)程中主要采取反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)方式開(kāi)展工作，基于色譜技術(shù)保留時(shí)間以及質(zhì)譜產(chǎn)生的碎片技術(shù)、離子風(fēng)度的定性比，通過(guò)外標(biāo)方式對(duì)其進(jìn)行定量的分析處理。

4 結(jié)束語(yǔ)

黃曲霉毒素對(duì)動(dòng)物以及人類產(chǎn)生較為嚴(yán)重的危害，現(xiàn)階段人們對(duì)其較為關(guān)注。在自然界中存在大量的黃曲霉毒素，而這些黃曲霉毒素會(huì)給人們的生活以及生產(chǎn)帶來(lái)較為嚴(yán)重的影響。對(duì)此必須要加強(qiáng)對(duì)黃曲霉毒素的檢測(cè)。通過(guò)高效液相色譜技術(shù)對(duì)黃曲霉毒素進(jìn)行檢測(cè)可以有效了解具體含量，進(jìn)而在根本上保障食品安全性。

[1]宋月,陳穎,白欣.光化學(xué)衍生-高效液相色譜法檢測(cè)食品中的黃曲霉毒素[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2016,23(7):882-884.

[2]趙霞.光化學(xué)衍生-高效液相色譜法檢測(cè)食品中的黃曲霉毒素[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng),2017,27(13).

[3]何翠霞.高效液相色譜在黃曲霉素檢測(cè)中的應(yīng)用[J].食品安全導(dǎo)刊,2016(18):116.