418000湖南醫(yī)藥學(xué)院醫(yī)學(xué)院病理教研室，湖南醫(yī)藥學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科(懷化)

近年來，腫瘤的診斷水平不斷提高，但很多腫瘤細(xì)胞的形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)類似，僅依據(jù)形態(tài)學(xué)觀察無法保證診斷準(zhǔn)確率[1]。免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHC)簡稱免疫組化，是當(dāng)前病理學(xué)診斷的常用方法。本研究采用IHC對腫瘤患者組織標(biāo)本進(jìn)行診斷，以探討該技術(shù)用于腫瘤診斷的價值，為臨床治療提供依據(jù)，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

2015年11月-2017年6月收治腫瘤患者60例，男34例，女26例；年齡28～75歲，平均(47.20±2.59)歲；發(fā)病至入院1.2～8.4個月，平均(4.20±1.14)個月；包括轉(zhuǎn)移性腫瘤36例，肝癌16例，肺癌5例，血管瘤3例。用隨機(jī)數(shù)值法將患者分為觀察組和對照組，各30例。兩組性別、年齡、病程和腫瘤類型等臨床資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。患者均簽署知情同意書。

方法：①對照組：采用活檢穿刺法診斷：進(jìn)行針對性穿刺活檢，于超聲下完成活檢過程，并與標(biāo)準(zhǔn)組織比較。②觀察組采用免疫組化技術(shù)進(jìn)行診斷：取患者組織(大小1 cm×2 cm×0.2 cm)浸泡于甲醛溶液中，2 h后先后采用透明液、脫水液和浸蠟液進(jìn)行相應(yīng)處理1 h，將組織埋于石蠟內(nèi)，經(jīng)常規(guī)切片(厚度以2 μm為宜)后對組織進(jìn)行免疫組化染色，于37℃下孵育10 min，經(jīng)蒸餾水沖洗、高壓鍋修復(fù)和PBS洗滌，于常溫下孵育2h， 采 用 PBS洗 滌 ， 加 入UltrasenSitiveTM SP試劑，之后DBA顯色，后使用樹膠封固[2]。

觀察指標(biāo)：免疫組化染色呈棕黃色則為陽性[3]。采用我院自擬的問卷調(diào)查表調(diào)查滿意度，包括3項，至少2項≥70分為滿意。

統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS 18.0軟件對本次研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，相關(guān)指標(biāo)評分等計量資料以(x±s)表示，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

診斷結(jié)果：觀察組診斷陽性率較對照組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組診斷結(jié)果比較

滿意度調(diào)查結(jié)果：觀察組滿意度各項分值及滿意率均高于對照組(P＜0.05)，見表2。

討 論

IHC是組織化學(xué)的分支，是通過標(biāo)記特異性抗體或抗原檢測被檢組織內(nèi)抗原或抗體分布情況的技術(shù)，有較高的靈敏性、特異性和簡便性，能結(jié)合形態(tài)和功能代謝、定性、定位和定量、細(xì)胞水平和超微結(jié)構(gòu)以及基因水平和蛋白水平進(jìn)行檢測。近年來該技術(shù)日趨成熟，隨著抗原修復(fù)技術(shù)、敏感性更高的檢測系統(tǒng)的建立，自動免疫染色系統(tǒng)，尤其是即用型試劑盒抗體的商品化，IHC在病理診斷中的應(yīng)用日益廣泛，常用于各類型腫瘤的病理診斷。有報道顯示其診斷效果理想。與常規(guī)技術(shù)相比，免疫組化技術(shù)可在診斷過程中觀察組織切片中抗原的數(shù)量及分布情況，對其進(jìn)行定位、定性及定量研究[4]。該技術(shù)所用標(biāo)本主要分為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本，石蠟切片是制作組織標(biāo)本最常用方法，該方法能保存好組織形態(tài)，利于長時間保存和進(jìn)行染色對照觀察，并可對切片組織進(jìn)行修復(fù)。此外，研究指出，采用IHC技術(shù)對患者無傷害，因而易被其接受，診斷配合度較高。本研究結(jié)果顯示，采用免疫組化技術(shù)診斷的觀察組患者的陽性率高達(dá)83.33%，顯著高于對照組，且各相關(guān)指標(biāo)評分和滿意度高于對照組，表明其應(yīng)用于腫瘤病理診斷可提高病理診斷陽性率，對患者身心無負(fù)面影響，且檢查依從性和滿意度較高。該結(jié)論與既往報道一致。

表2 兩組患者滿意度比較(x±s，分)

IHC可用于鑒別腫瘤組織起源，判定未分化惡性腫瘤性質(zhì)，鑒別診斷各種小圓形細(xì)胞、卵圓形細(xì)胞、大細(xì)胞、上皮樣細(xì)胞與多行性細(xì)胞腫瘤，確定轉(zhuǎn)移性腫瘤的原發(fā)部位，及時發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移病灶，鑒別各類淋巴瘤、淋巴組織增生性疾病與淋巴瘤，并能對其他各系統(tǒng)腫瘤進(jìn)行診斷，尤其是近年來新型實用性抗體的不斷出現(xiàn)使該技術(shù)成為重要的病理診斷輔助工具，同時也是疾病診斷的重要依據(jù)和相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)的重要內(nèi)容，在病理學(xué)中的地位日益突出[5]。但當(dāng)前免疫組化技術(shù)仍存在局限性，主要表現(xiàn)為抗體解釋及其特異性方面，在具體操作中須以適當(dāng)陽性或陰性為對照，如對照組質(zhì)控不到位，可能對診斷結(jié)果產(chǎn)生影響。此外對技術(shù)操作流程的規(guī)范性有很高要求，并須考慮假陽性和假陰性的干擾[6]。因此，應(yīng)重視制定并實施相關(guān)質(zhì)控措施，確保試劑處于最佳濃度，進(jìn)一步規(guī)范操作，努力保持抗原修復(fù)的一致性和免疫染色質(zhì)量，并須熟悉抗體的陽性定位，以提高診斷效果。

綜上所述，IHC在腫瘤診斷中具有重要的應(yīng)用價值，臨床醫(yī)生和病理技術(shù)人員應(yīng)善于總結(jié)經(jīng)驗，確保操作流程的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化，提高診斷效果，以指導(dǎo)臨床診治工作。

[1]程曉菊.質(zhì)量控制對免疫組化制片技術(shù)質(zhì)量的影響[J].中國社區(qū)醫(yī)師,2017,33(7):5-8.

[2]Jinlai Dong,Lina Song,Jun-Jie Yin,et al.Co3O4 Nanoparticles with Multi-Enzyme Activities and Their Application in Immunohistochemical Assay[J].ACS applied materials& interfaces,2014,6(3):1959-1970.

[3]王學(xué)高.病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用探討[J].中國保健營養(yǎng),2017,27(9):431.

[4]魯波,任麗芳,李美平,等.雙拼對照法在免疫組織化學(xué)染色中應(yīng)用[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志,2014,30(3):337-338.

[5]李文龍.試論免疫組化技術(shù)在病理診斷工作中的應(yīng)用進(jìn)展[J].心理醫(yī)生,2015,21(10):75-76.

[6]姬國強(qiáng).免疫組化技術(shù)和常規(guī)技術(shù)在腫瘤病理診斷中的效果對比[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2015,22(23):46-48.