麻鴻飛，季生吉

（遼寧撫順礦務(wù)局總醫(yī)院，遼寧 撫順 113008）

再生障礙性貧血患者外周血T細(xì)胞亞群的變化

麻鴻飛，季生吉

（遼寧撫順礦務(wù)局總醫(yī)院，遼寧 撫順 113008）

目的 探討再生障礙性貧血患者外周血T細(xì)胞亞群變化，旨在分析再生障礙性貧血患者與健康人群T細(xì)胞亞群的變化規(guī)律，為臨床診斷、治療提供理論依據(jù)。方法 選取本院接診再生障礙性貧血患者32例，與同期健康體檢人群32例作為對照組，于晨起重復(fù)空腹靜脈血，經(jīng)處理后，采用流式細(xì)胞儀檢測CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、Th/Ts。結(jié)果 再障組CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts胞測定結(jié)果低于健康對照組，CD3+CD8+測定結(jié)果高于健康對照組（P＜0.05）；治療后，再生組CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結(jié)果顯著升高，CD3+CD8+測定結(jié)果顯著下降（P＜0.05）。結(jié)論 再生障礙性貧血患者外周血T細(xì)胞亞群表達(dá)失衡，通過測定T細(xì)胞亞群可由于再生障礙性貧血診斷和治療效果判定。

再生障礙性貧血；外周血T細(xì)胞亞群；變化

再生障礙性貧血是一種非常多見的造血系統(tǒng)疾病，關(guān)于該病的發(fā)生機(jī)制目前學(xué)界尚不明確，患者多表現(xiàn)為出血、貧血、低燒或者高燒等，同時伴隨有頭昏、走路乏力等。目前，學(xué)界公認(rèn)免疫介導(dǎo)在造血功能抑制在再障發(fā)病中占據(jù)著非常重要的作用。T淋巴細(xì)胞及所產(chǎn)生的相關(guān)細(xì)胞因子作為免疫調(diào)節(jié)和造血過程中非常重要的部分，其能夠直接迅速地反應(yīng)出機(jī)體變化[1]。為此，通過檢測T淋巴細(xì)胞亞群，觀察其變化規(guī)律，對再生障礙性貧血診斷有著非常重要的作用。鑒于此，本文選取再生障礙性貧血與健康人群，對其外周血T細(xì)胞亞群進(jìn)行測定，分析兩組T細(xì)胞亞群變化，旨在為再生障礙性貧血的診斷、治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 自本院2013年1月～2015年12月接診再生障礙性貧血患者中選取32例，所有患者均符合《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)（第三版）》[2]中再生障礙性貧血診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中女11例，男21例，年齡15～62歲，平均年齡為（34.52±12.43）歲；其中19例慢性再生障礙性貧血，13例急性再生障礙性評學(xué)。另從同期體檢人群中選取32名健康人群作為對照組，其中女13名，男19名，年齡16～61歲，平均年齡（33.21±11.73）歲。兩組患者一般資料逐項(xiàng)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法 兩組患者均于晨起，空腹行靜脈血抽取2 ml，置入5 ml乙二胺四乙酸（EDTA）與肝素鈉抗凝試管內(nèi)，充分搖勻，取材1 h內(nèi)完成樣本處理。采用流式細(xì)胞儀行外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平測定，主要測定CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、Th/Ts。每例樣本均同時準(zhǔn)備兩支流式絕對計數(shù)管兩支上樣管，分別標(biāo)記為A、B；運(yùn)用移液器取20 μL BD Multitest CD3/CD8/CD8/CD4置入A管，同樣運(yùn)用移液器取20 μL BD MultitestCD3/CD16+CD56/CD48/CD19置入B管；分別抽取50μL混合液以及未凝結(jié)的全血樣本置入到A、B兩管中；充分混合后置于避光處，放置15 min，向其中滴加經(jīng)過稀釋的1 X溶血素工作也450 μL，充分混合再次放置在避光處，靜置15 min，放入流式細(xì)胞儀內(nèi)檢測。

1.3 治療方法 重癥再生障礙性貧血患者給予抗胸腺淋巴細(xì)胞球蛋白（ATG）、環(huán)胞素（CSA）聯(lián)合康力龍治療；普通再生障礙性貧血患者給予康力龍聯(lián)合環(huán)胞菌素或者丙酸睪丸酮治療。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 本研究各組資料均運(yùn)用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS15.0分析處理，計數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)和例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果比較 再障組CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結(jié)果與健康對照組比較較低（P＜0.05）；CD3+CD8+測定結(jié)果與健康對照組比較較高（P＜0.05），見表1。

表1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果比較（x±s）

2.2 治療前后再障組患者T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果比較治療后，再生障礙性貧血患者CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結(jié)果與治療前比較，有顯著升高（P＜0.05），CD3+CD8+測定結(jié)果與治療前比較，有顯著下降（P＜0.05），見表2。

表2 治療前后再障組患者T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果比較（x±s）

3 討論

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，實(shí)驗(yàn)血液學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科也呈現(xiàn)為快速發(fā)展，加之各個學(xué)科之間相互滲透、促進(jìn)，使得醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展突飛猛進(jìn)。再生障礙性貧血

是一種較為多見的血液系統(tǒng)疾病，目前，關(guān)于該病的發(fā)病機(jī)制尚無統(tǒng)一定論，通常認(rèn)為與造血微循環(huán)出現(xiàn)異常、造血干/祖細(xì)胞缺陷與免疫異常等相關(guān)[3]。近幾年來，關(guān)于再生障礙性貧血免疫異常的研究報道越來越多，尤其是關(guān)于T細(xì)胞免疫的報道和實(shí)驗(yàn)更是成為了重點(diǎn)研究對象，不少學(xué)者認(rèn)為再生障礙性貧血介導(dǎo)的骨髓造血功能衰竭，是一種自身免疫性疾病，其發(fā)病與T淋巴細(xì)胞亞群比例、數(shù)量失調(diào)有著非常直接的關(guān)聯(lián)[4]。

T淋巴細(xì)胞作為細(xì)胞免疫反應(yīng)中最主要的效應(yīng)細(xì)胞，同時還具備極不均一的異質(zhì)性群體，不同的亞群所表現(xiàn)的功能和標(biāo)志也有顯著差異。在正常人體中，T淋巴細(xì)胞總數(shù)、CD4+、CD8+細(xì)胞亞群兩者的比值和數(shù)量均控制在相應(yīng)范圍內(nèi)，并呈現(xiàn)為一個動態(tài)平衡的狀態(tài)下，可以說是機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的中心環(huán)節(jié)[5]。當(dāng)T淋巴細(xì)胞數(shù)量出現(xiàn)異常變化時，CD4+、CD8+均會表現(xiàn)出不同程度的變化，或者呈現(xiàn)為上調(diào)，或者呈現(xiàn)為下調(diào)，這使得兩者比值也會發(fā)生相應(yīng)的變化，這時即表明體內(nèi)免疫功能異常，這與部分疾病的發(fā)生、進(jìn)展均有直接聯(lián)系[6]。保證亞群分布平衡，可以說是維持免疫功能正常的重要基礎(chǔ)，再生障礙性貧血多表現(xiàn)為CD4+、CD8+兩種亞群失衡，并引起CD8+、Th1與Tc隨之發(fā)生相應(yīng)改變。已有大量臨床報道證實(shí)[7]，再生障礙性貧血患者CD8+會有明顯增多，而CD4+呈現(xiàn)為顯著減少，兩者比值有明顯下降，這表明在再生障礙性貧血發(fā)病和進(jìn)展中，CD8+參與免疫發(fā)病機(jī)制。國外有研究者[8]通過對再生障礙性貧血患者行骨髓活檢發(fā)現(xiàn)，患者骨髓中CD3+含量較高，認(rèn)為T淋巴細(xì)胞具備增生或者直接浸潤骨髓時，CD4+會呈現(xiàn)為顯著升高，故在再生障礙性貧血造血功能抑制中，CD3+是非常重要的因素。上述資料均表示，再生障礙性貧血發(fā)病與發(fā)展中，T淋巴細(xì)胞均參與其中，而CD8+更是免疫分型中導(dǎo)致再障造血免疫受損的主要效應(yīng)細(xì)胞。

本研究通過對比再生障礙性貧血患者與健康人群T淋巴細(xì)胞亞群變化，結(jié)果顯示，再生障礙性貧血患者CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結(jié)果顯著低于對照組（P＜0.05）；CD3+CD8+測定結(jié)果高于健康對照組（P＜0.05）。這表明再生障礙性貧血患者CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts呈現(xiàn)為低表達(dá)，CD3+CD8+呈現(xiàn)為高表達(dá)，對再生障礙性貧血臨床診斷一定價值。另對比再生障礙性貧血患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群變化，結(jié)果顯示，再生障礙性貧血CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結(jié)果所顯著升高，CD3+CD8+有顯著下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。該結(jié)果表明，通過測定再生障礙性貧血患者T淋巴細(xì)胞亞群可用于治療效果判定。

綜上所述，T淋巴細(xì)胞亞群在再生障礙性貧血診斷、治療中均具有一定價值，值得推廣。

[1] 陸春偉,佟海俠,陸美言.再生障礙性貧血患者外周血淋巴細(xì)胞亞群和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的檢測及臨床意義[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2010,59（10）:865-867.

[2] 章俏雷,方炳木,曲志剛,等.“益腎生血方”聯(lián)合西藥治療慢性再生障礙性貧血患者血清IFN-γ、IL-4和T細(xì)胞亞群的變化[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2015,33(1):40-42.

[3] 石秀珍,王會平,潘瑩,等.CD+4～+CD+25～Treg細(xì)胞和T細(xì)胞亞群評估再生障礙性貧血患者免疫狀態(tài)的對比研究[J].臨床薈萃,2015,29(6):628-632.

[4] 高鐵銘,付建珠,趙亞玲,等.再生障礙性貧血患者銅/鋅比對淋巴細(xì)胞亞群的影響[J].南昌大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2015,51（3）:44-47.

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[6] 陸翔,王小超,李金洨,等.再生障礙性貧血患者IL-17、IFN-γ及T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)的研究[J].廣西醫(yī)學(xué),2013,41(5):534-537.

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[8] 王良妥,張湘蘭,譚日標(biāo).T細(xì)胞亞群在再生障礙性貧血外周血的表達(dá)及臨床意義[J].海南醫(yī)學(xué),2011,38(14):93-95.

10.3969/j.issn.1009-4393.2018.01.077