張琰 戴彰 朱建輝

[摘要] 目的 分析乙肝病毒血清學(xué)檢測(cè)采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫方法檢驗(yàn)效果。方法 方便選取2017年2月—2018年5月該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對(duì)象，對(duì)患者采血之后血清標(biāo)本采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測(cè)，觀察兩種檢測(cè)方式的檢驗(yàn)效果。 結(jié)果 化學(xué)發(fā)光法檢出乙肝病毒陽(yáng)性的患者有320例，占比64.0%，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢出乙肝病毒陽(yáng)性患者有200例，占比40.0%，酶聯(lián)免疫吸附法檢出乙肝病毒陽(yáng)性率要明顯低于化學(xué)發(fā)光檢查方法，兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)意義（χ2=57.69，P<0.05）。兩種檢查方式的重復(fù)性結(jié)果比較，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法重復(fù)性高60例（12.0%）、中70例（14.0%）、低100例（20.0%），顯著優(yōu)于酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)法，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=24.39、22.50、18.71，P<0.05）。 結(jié)論 化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢驗(yàn)方式相比，化學(xué)發(fā)光法對(duì)乙肝病毒陽(yáng)性檢出率要明顯高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，對(duì)其進(jìn)行定性定量檢測(cè)，能夠提高檢測(cè)準(zhǔn)確度。

[關(guān)鍵詞] 乙肝病毒；血清學(xué)檢測(cè)；化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法；臨床價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R512.6；R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）09（b）-0193-03

[Abstract] Objective To analyze the serological detection of hepatitis B virus by chemiluminescence method and enzyme-linked immunosorbent assay. Methods A total of 500 suspected hepatitis B patients admitted to the hospital from February 2017 to May 2018 were selected as subjects. The blood samples were convenient collected by chemiluminescence and enzyme-linked immunosorbent assay after blood collection. Results There were 320 cases of hepatitis B virus positive by chemiluminescence method， accounting for 64.0%. 200 cases of hepatitis B virus positive patients were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， accounting for 40.0%， and HBV was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The positive rate was significantly lower than that of chemiluminescence. The difference between the two groups was statistically significant （χ2=57.69， P<0.05）. The reproducibility results of the two examination methods were 60 case（12.0%）， 70 case（14.0%）， and 100 case（20.0%）， which were significantly better than the enzyme-linked adsorption method. The difference was statistically significant （χ2=24.39， 22.50， 18.71， P<0.05）. Conclusion Compared with the enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， the positive detection rate of hepatitis B virus by chemiluminescence method is significantly higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） qualitative and quantitative detection can improve the detection accuracy.

[Key words] Hepatitis B virus； Serological detection； Chemiluminescence method； Enzyme-linked immunosorbent assay； Clinical value

乙型肝炎病毒在我國(guó)的發(fā)病率相對(duì)較高，目前沒(méi)有針對(duì)乙型肝炎疾病特效治療方式，針對(duì)乙型肝炎病毒實(shí)施早期診斷治療至關(guān)重要。對(duì)乙型肝炎病毒檢測(cè)的手段主要是化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法兩種檢測(cè)方式，這兩種檢測(cè)方式在臨床上均具有重要應(yīng)用價(jià)值[1]?，F(xiàn)就2017年2月—2018年5月該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對(duì)象，分析乙肝病毒血清學(xué)檢測(cè)采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫方法檢驗(yàn)效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對(duì)象，500例患者中男性患者有260例，女性患者有240例，年齡均在20～60歲之間，平均年齡為（42.8±5.8）歲。500例患者診斷標(biāo)準(zhǔn)均根據(jù)《乙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行檢查診斷，且所選病例均通過(guò)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，患者及家屬均知情同意。

1.2 方法

對(duì)所有患者分別實(shí)施化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法。500例患者均在檢驗(yàn)當(dāng)天清晨采集患者空腹靜脈肘靜脈血10 mL，將采集的血液標(biāo)本進(jìn)行離心，離心的速度設(shè)置為3 000 r/min，離心的時(shí)間設(shè)置為10 min，將分離的血清標(biāo)本進(jìn)行保存待檢。每次根據(jù)定值參比血清作為質(zhì)量控制，操作方式均嚴(yán)格根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)實(shí)施?；瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)：采用化學(xué)發(fā)光儀器：全自動(dòng)免疫分析儀ZH6000，使用雙抗體夾心方法、實(shí)施檢驗(yàn)，把配套反應(yīng)白色不透明條板微孔（固相有鏈霉親和素SA）、吸頭與洗液放置在預(yù)定的位置。把鼠抗HbsAg單克隆抗體-生物素和待測(cè)樣品共同進(jìn)行培育。通過(guò)洗滌，洗掉游離成分，然后加入鼠抗HbsAg單克隆-堿性磷酸酶，再次洗滌，洗掉游離成分，最后加入發(fā)光底物液，通過(guò)測(cè)定各孔的發(fā)光值RLU，換算出相應(yīng)濃度。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)，采用廈門(mén)新創(chuàng)酶聯(lián)方法，TECAN酶標(biāo)儀。使用雙抗原夾心法（只檢測(cè)表面抗原用雙抗體夾心法）實(shí)施測(cè)定，采用去離子水稀釋，將50 mL濃縮洗滌液到1 000 mL放置在專門(mén)洗液瓶當(dāng)中，把酶標(biāo)試劑放置在試劑預(yù)定位置讀取吸光度值，通過(guò)陰性對(duì)照根據(jù)平均吸光度作為臨界值。若OD值大于1則為陽(yáng)性，反之則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察500例患者乙肝病毒采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)的結(jié)果，對(duì)兩組檢查結(jié)果進(jìn)行比較。對(duì)兩種檢測(cè)方式重復(fù)性結(jié)果比較，重復(fù)性可分為高、中、低3個(gè)指標(biāo)層次[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

化學(xué)發(fā)光法檢出乙肝病毒陽(yáng)性的患者有320例，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢出乙肝病毒陽(yáng)性患者有200例，酶聯(lián)免疫吸附法檢出乙肝病毒陽(yáng)性率要明顯低于化學(xué)發(fā)光檢查方法，兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

觀察兩種檢查方式的重復(fù)性結(jié)果，化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法重復(fù)性對(duì)比，除了高濃度乙肝病毒含量之外，其余的指標(biāo)結(jié)果相比，均顯示出化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法重復(fù)性要顯著優(yōu)于酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)法，且兩組之間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

乙型肝炎病毒屬于全球性傳染性疾病，在我國(guó)，乙型肝炎病毒表面抗原攜帶者高達(dá)百分之十[3]。乙肝病毒表面抗體屬于人體感染乙肝病毒之后針對(duì)乙肝病毒所產(chǎn)生特異性抗體，因?yàn)槟壳皩?duì)于乙型肝炎病毒沒(méi)有特效的治療方法，因此，早期對(duì)乙肝病毒進(jìn)行診斷至關(guān)重要[4]。

張英霞[5]的研究顯示，針對(duì)乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)分別采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)與美聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)，研究結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法檢測(cè)乙肝病毒陽(yáng)性率為54.8%，要顯著高于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法。該文研究結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光法檢出乙肝病毒陽(yáng)性的患者有320例，占比64.0%，明顯優(yōu)于酶聯(lián)免疫吸附法檢出乙肝病毒陽(yáng)性率，兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)意義，與張英霞的研究結(jié)果相近。原因在于兩種不同檢驗(yàn)方式具體方法差異，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法屬于臨床診斷乙肝疾病較為傳統(tǒng)檢測(cè)方法，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法操作簡(jiǎn)便、快捷、費(fèi)用較低特征，逐漸廣泛被應(yīng)用于乙肝病毒抗體檢測(cè)當(dāng)中，但是這種靜靜能夠?qū)嵤┒ㄐ苑治?，不能夠?qū)嵤┒糠治鯷6-7]。化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)屬于生物素-親和素技術(shù)，在電極的表面能夠通過(guò)電化學(xué)引發(fā)特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，屬于目前較為先進(jìn)化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定系統(tǒng)。

化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)采用載體朱啊喲是受到電磁鐵控制影響，全面實(shí)現(xiàn)檢測(cè)自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化，減少因?yàn)槿斯げ僮魉鶐?lái)的誤差，并且能夠精準(zhǔn)實(shí)施定性與定量分析，能夠大幅度減少誤差?；瘜W(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法重復(fù)性對(duì)比，除了高濃度乙肝病毒含量之外，其余的指標(biāo)結(jié)果相比，均顯示出化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法重復(fù)性要顯著優(yōu)于酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)法?；瘜W(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)高、中、低重復(fù)率分別為12.0%、14.0%、20.0%，低濃度重復(fù)率相對(duì)較高。且化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)重復(fù)率要低于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法。說(shuō)明化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)在乙肝病毒檢測(cè)當(dāng)中占有重要價(jià)值。

以上結(jié)果表明，隨著臨床檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展與進(jìn)步，對(duì)乙型肝炎病毒的檢測(cè)，除了采用傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法，化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)逐漸應(yīng)用于臨床，并且獲得較好的檢測(cè)效果?；瘜W(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)經(jīng)生物素-親和素技術(shù)在電極表面引發(fā)特異性發(fā)光反應(yīng)，屬于臨床較為先進(jìn)化學(xué)發(fā)光測(cè)定性系統(tǒng)。化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)屬于新一代免疫標(biāo)記測(cè)定技術(shù)，能夠有效提高檢測(cè)方法靈敏度，精準(zhǔn)實(shí)施定量檢測(cè)，能夠精準(zhǔn)檢出低濃度乙肝病毒在病程觀察當(dāng)中絕大程度縮短窗口期?；瘜W(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法比較，化學(xué)發(fā)光免疫吸附法試劑消耗量相對(duì)較小、試劑容易得到保存、試劑穩(wěn)定性能先谷底較高，適用于健康人群。并且化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)特異度較高，重復(fù)性相對(duì)較好，試劑相對(duì)穩(wěn)定，沒(méi)有污染，且有效期較長(zhǎng)。操作程序相對(duì)簡(jiǎn)單，且容易自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化等。因而，針對(duì)乙肝病毒檢測(cè)，在檢測(cè)方式方面比較，化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)技術(shù)應(yīng)當(dāng)作為臨床首選檢測(cè)方式。以達(dá)到早期發(fā)現(xiàn)乙肝疾病，早期預(yù)防疾病，控制病情的繼續(xù)發(fā)展，也能夠?yàn)楹笃谠\斷治療乙肝疾病提供參考依據(jù)，有助于患者治療效果的提高，降低誤診與漏診的現(xiàn)象，提高臨床診斷治療效率。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢驗(yàn)方式相比，化學(xué)發(fā)光法對(duì)乙肝病毒陽(yáng)性檢出率要明顯高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，對(duì)其進(jìn)行定性定量檢測(cè)，能夠提高檢測(cè)準(zhǔn)確度。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)便快捷、成本較低，靈敏度相對(duì)較低，只能進(jìn)行定性檢測(cè)?；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)方式具備較高靈敏度，能夠?qū)嵤┒ㄐ耘c定量檢測(cè)，有助于對(duì)乙肝疾病患者的診斷，可以為臨床醫(yī)生判斷與治療疾病提供重要臨床應(yīng)用價(jià)值，值得臨床推廣與應(yīng)用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 趙曉芬.乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的效果對(duì)比[J].臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志，2016，3（4）：605-605，607.

[2] 李蘭英.乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)采用化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法的效果對(duì)比分析[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)，2016，26（9）：349.

[3] 雷秀麗.化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法應(yīng)用于乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中的效果[J].臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐，2018，3（6）：100-101.

[4] 張英霞.乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的效果對(duì)比[J].中外醫(yī)療，2017，36（20）：35-37.

[5] 傅學(xué)文.乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的效果對(duì)比[J].心理醫(yī)生，2017，23（27）：69.

[6] 宋劍.化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法檢驗(yàn)乙肝病毒血清的效果對(duì)比[J].世界臨床醫(yī)學(xué)，2016，10（20）：234-235.

[7] 于鋒.化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法對(duì)乙肝病毒血清學(xué)的檢驗(yàn)效果[J].世界臨床醫(yī)學(xué)，2017，11（18）：213.

[8] 吳淑霞，范軍，張儉，等.兩種方法檢測(cè)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物結(jié)果分析[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，37（3）：344-346.

（收稿日期：2018-06-15）