楊圓圓，楊移斌，曹海鵬，方 偉，林漢群，楊先樂(lè)，艾曉輝

(1.廣東省水生動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣東 廣州 510222； 2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所，湖北 武漢 430223； 3.上海海洋大學(xué)，上海 201306)

雜交鱘源惡臭假單胞菌的分離鑒定及藥敏特性研究

楊圓圓1，楊移斌2，*，曹海鵬3，方 偉1，林漢群1，楊先樂(lè)3，艾曉輝2

(1.廣東省水生動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣東 廣州 510222； 2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所，湖北 武漢 430223； 3.上海海洋大學(xué)，上海 201306)

對(duì)患腸炎病雜交鱘進(jìn)行病原分離、鑒定及藥敏試驗(yàn)，為雜交鱘腸炎病的防控提供參考。從患病雜交鱘肝、腎、脾及腸道中分離純化病原菌，經(jīng)理化特性測(cè)定及16S rRNA 序列分析對(duì)其進(jìn)行鑒定，開展人工感染試驗(yàn)，并利用K-B法進(jìn)行藥敏特性分析。結(jié)果顯示，分離到的XY4菌株是本次引發(fā)雜交鱘病害的致病菌，其對(duì)雜交鱘的LD50為1.30×106cfu·g-1。XY4菌株理化特性與惡臭假單胞菌一致，16S rRNA序列與惡臭假單胞菌同源性為100%，綜合判定XY4菌株為惡臭假單胞菌。XY4菌株對(duì)頭孢拉定、氟苯尼考及多西環(huán)素等9種抗生素高度敏感。養(yǎng)殖時(shí)可選用對(duì)惡臭假單胞菌敏感藥物進(jìn)行防控。

惡臭假單胞菌；雜交鱘(Husodauricus♀×Acipenserschrenckii♂)；分離鑒定；藥敏特性

1992年我國(guó)第一個(gè)鱘規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)在大連瓦房店成立，標(biāo)志著我國(guó)鱘商業(yè)化養(yǎng)殖的開端，經(jīng)過(guò)20多年的發(fā)展，鱘產(chǎn)業(yè)逐步形成了集種業(yè)、繁育、養(yǎng)殖及加工于一體的完整產(chǎn)業(yè)鏈，我國(guó)也成為世界第一大鱘養(yǎng)殖國(guó)。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，人民生活水平不斷提高，具備肉厚骨軟、營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美及品質(zhì)高等優(yōu)點(diǎn)的鱘產(chǎn)品受到消費(fèi)者歡迎，市場(chǎng)需求不斷增大，為此，我國(guó)不斷擴(kuò)大鱘養(yǎng)殖規(guī)模以滿足市場(chǎng)需求。目前規(guī)?；B(yǎng)殖鱘種類主要有施氏鱘(Acipenserschrenckii)、西伯利亞鱘(Acipenserbaerii)、雜交鱘(Husodauricus♀×Acipenserschrenckii♂) 、匙吻鱘(Polyodonspathula)及俄羅斯鱘(Acipensergueldenstaedti)等[1]， 其中，雜交鱘因具有生長(zhǎng)速度快、抗病能力強(qiáng)、懷卵量大等優(yōu)勢(shì)，是僅次于西伯利亞鱘及施氏鱘的第三大鱘養(yǎng)殖品種[2]。但近年來(lái)隨著鱘養(yǎng)殖產(chǎn)量不斷增大，養(yǎng)殖集約化及密度不斷提高，鱘養(yǎng)殖環(huán)境越加惡劣，導(dǎo)致各種病害頻發(fā)，嚴(yán)重影響了鱘養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展[3]。目前已經(jīng)報(bào)道的鱘致病菌主要有嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila)[4]、維氏氣單胞菌(Aeromonasveronii)[5]、豚鼠氣單胞菌(Aeromonascaviae)[6]、類志賀鄰單胞菌(Plesimonasshigelloides)[7]、停乳鏈球菌(Streptococcusdysgalactiae)[8]、海豚鏈球菌(Streptococcusiniae)[9]、產(chǎn)堿假單胞菌(Pseudomonasalcaligenes)[10]、溫和氣單胞菌(Aeromonassobria)[11]、魯氏耶爾森氏菌(Yersiniaruckeri)[12]、弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacterfreundii)[13]、瓊氏不動(dòng)桿菌(Acinetobacterjunii)[14]、分枝桿菌(Mycobacterium)[15]等。

2016年8—9月，廣東河源某規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的雜交鱘陸續(xù)出現(xiàn)死亡，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)1個(gè)多月，發(fā)病死亡魚體長(zhǎng)在30～40 cm，發(fā)病水溫在26～29 ℃，累計(jì)死亡約35%。本研究對(duì)發(fā)病鱘開展臨床診斷、病原分離鑒定及人工感染等實(shí)驗(yàn)，從而確定病因，同時(shí)開展了病原敏感藥物篩選，旨在為鱘細(xì)菌性病害防控提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)魚

10尾瀕死雜交鱘采自廣東河源某鱘規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)，體長(zhǎng)在30～40 cm。感染用雜交鱘購(gòu)于湖北清江某鱘規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)自繁苗，規(guī)格(30±1.5) g，體格健壯，無(wú)傷病，于實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)7 d無(wú)異常后用于試驗(yàn)。

1.1.2 試驗(yàn)試劑

腦心浸液培養(yǎng)基(BHI)、腦心浸出液瓊脂(BHIA)、水解酪蛋白瓊脂(MH)、藥敏紙片及細(xì)菌生化微量鑒定管均購(gòu)自杭州微生物試劑有限公司；PCR反應(yīng)體系、細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒均購(gòu)自天根生化科技(北京)有限公司；測(cè)序服務(wù)及引物合成均由武漢擎科創(chuàng)新生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 臨床診斷

對(duì)雜交鱘養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境進(jìn)行調(diào)查，統(tǒng)計(jì)雜交鱘發(fā)病死亡率，確定病害主要危害對(duì)象規(guī)格；對(duì)發(fā)病瀕死雜交鱘進(jìn)行臨床診斷，確定典型病癥，并通過(guò)光學(xué)顯微鏡鏡檢確定有無(wú)寄生蟲感染等，取具典型癥狀瀕死雜交鱘回實(shí)驗(yàn)室作進(jìn)一步分析。

1.2.2 病原菌分離

在無(wú)菌條件下，取患病瀕死并具備典型癥狀的雜交鱘的肝、腎、脾及腸道劃線于BHIA平板上，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)24 h后，挑取形態(tài)、大小及顏色基本一致的菌落進(jìn)行細(xì)菌再純化，獲得的細(xì)菌純培養(yǎng)物加入25%的甘油混勻后置于-80 ℃保存。分離菌株暫命名為XY4。

1.2.3 人工感染及LD50測(cè)定

人工感染： 將XY4菌株劃線于BHI平板上，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)24 h，經(jīng)無(wú)菌生理鹽水洗下菌苔，并參照麥?zhǔn)媳葷岱ㄕ{(diào)整菌懸液濃度為8.4×109cfu·mL-1。

將感染用雜交鱘分成試驗(yàn)組及對(duì)照組，每組均設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10尾雜交鱘。感染試驗(yàn)采取腹腔注射法，試驗(yàn)組每尾雜交鱘注射XY4菌株菌液0.1 mL，對(duì)照組相同部位注射等量無(wú)菌生理鹽水。試驗(yàn)期間連續(xù)充氧，水溫控制在(28±1)℃，每隔6 h觀察雜交鱘游泳狀態(tài)，及時(shí)記錄發(fā)病死亡雜交鱘數(shù)量，同時(shí)對(duì)瀕死雜交鱘進(jìn)行解剖觀察，并進(jìn)行細(xì)菌再分離。

細(xì)菌半致死劑量(LD50)測(cè)定： 將XY4菌株菌液稀釋成濃度為8.4×109、8.4×108、8.4×107、8.4×106、8.4×105cfu·mL-1的菌懸液，分別注射到不同組雜交鱘體內(nèi)，每尾0.1 mL，即各組每尾注射劑量分別為8.4×108、8.4×107、8.4×106、8.4×105、8.4×104cfu，對(duì)照組注射等量無(wú)菌生理鹽水，每組雜交鱘各30尾。持續(xù)觀察雜交鱘的游泳狀態(tài)，及時(shí)記錄發(fā)病死亡數(shù)量，并用概率單位圖解法[16]計(jì)算LD50。

1.2.4 形態(tài)學(xué)及生理生化特性測(cè)定

將XY4菌株接種于BHI平板上，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)24 h后，觀察菌落大小、形態(tài)特征及其顏色，并進(jìn)行革蘭氏染色；采用細(xì)菌微量生化鑒定管參照《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》[17]測(cè)定分離菌株XY4的生理生化特性。

1.2.5 16S rRNA基因序列測(cè)定及系統(tǒng)發(fā)育分析

將菌株XY4接種于BHI培養(yǎng)基中，置于28 ℃振蕩培養(yǎng)24 h，經(jīng)高速離心后收集菌體，提取DNA作為PCR擴(kuò)增反應(yīng)模板。細(xì)菌16S rRNA序列擴(kuò)增引物為：27F，5′-AGAGTTTGATC(C/A)TGGCTCAG-3′；1492R，5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′。參照閆茂倉(cāng)等[18]方法進(jìn)行PCR反應(yīng)擴(kuò)增目的基因。擴(kuò)增產(chǎn)物確定為目的片段后送武漢擎科生物公司純化及序列測(cè)定。

將測(cè)序獲得的16S rRNA基因序列在GenBank中進(jìn)行Blast分析，根據(jù)比對(duì)結(jié)果下載同源性較高的16S rRNA序列，采用Clustal X軟件進(jìn)行多序列匹配分析，通過(guò)MEGA 5.1軟件Neighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，1 000次Bootstrap檢驗(yàn)置信度。

1.2.6 藥敏特性分析

參照NCCLS抗微生物藥物敏感性實(shí)驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行[19]。將XY4菌株接種于腦心浸出液培養(yǎng)基中，經(jīng)28 ℃搖床振蕩培養(yǎng)24 h，用無(wú)菌生理鹽水稀釋成濃度為106cfu·mL-1的菌懸液，取150 μL菌液均勻涂于水解酪蛋白瓊脂上，貼上不同種類的藥敏紙片，置于恒溫培養(yǎng)箱中28 ℃培養(yǎng)24 h后測(cè)量各藥敏紙片的抑菌圈直徑。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床診斷

發(fā)病鱘養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖面積達(dá)26.67 hm2，發(fā)病死亡率達(dá)35%，發(fā)病持續(xù)了約1個(gè)月，發(fā)病鱘體長(zhǎng)在30～40 cm，經(jīng)濟(jì)損失較大。養(yǎng)殖水體氨氮在0.05～0.10 mg·L-1，亞硝酸鹽在0.01～0.03 mg·L-1，pH 7.5，溶氧7.0～8.9 mg·L-1，水溫26～29 ℃。經(jīng)光學(xué)顯微鏡鏡檢，未發(fā)現(xiàn)雜交鱘體內(nèi)有寄生蟲寄生，此次雜交鱘發(fā)病典型癥狀主要為雜交鱘游泳緩慢，不進(jìn)食。體表無(wú)明顯癥狀，解剖發(fā)現(xiàn)腹腔些許血水，肝臟灰白色，脾臟嚴(yán)重充血，腸道腫脹，腸壁較薄，炎癥明顯，腸道內(nèi)有黃色黏液，腸道內(nèi)無(wú)食物，見圖1。

2.2 細(xì)菌分離

圖1 病魚的臨床特征Fig.1 Clinical signs of moribund fish

從患病雜交鱘的肝、腎、脾及腸道中分離純化到同一株優(yōu)勢(shì)菌XY4。經(jīng)人工感染試驗(yàn)，試驗(yàn)組雜交鱘全部死亡，而對(duì)照組未出現(xiàn)異常。感染發(fā)病死亡的雜交鱘出現(xiàn)嚴(yán)重出血，脾臟充血發(fā)黑、腸道發(fā)炎等癥狀，與自然發(fā)病病癥基本一致，并分離到與XY4相同的菌株，表明XY4株是雜交鱘腸炎的病原菌。根據(jù)表1建立試驗(yàn)魚死亡率(%)與細(xì)菌劑量對(duì)數(shù)[lg(cfu)]的關(guān)系曲線：y=0.24x-1.3208(圖2)，XY4菌株對(duì)雜交鱘的半致死劑量LD50=1.30×106cfu·g-1。

表1分離株對(duì)雜交鱘LD50試驗(yàn)結(jié)果

Table1Results of LD50of isolation strain in hybrid sturgeon

組別Group注射劑量Injecteddose/(cfu·unittail-1)實(shí)驗(yàn)魚數(shù)量Testingfishnumber/unittail死亡數(shù)量Amountofdeath/unittail死亡率Mortality/%A84×1081010100B84×10710990C84×10610660D84×10510330E84×10410110F065%生理鹽水Physiologicalsaline1000

2.3 細(xì)菌鑒定

經(jīng)鑒定管反應(yīng)測(cè)定了XY4菌株生化特性，結(jié)果見表2，理化指標(biāo)初步確定菌株XY4為惡臭假單胞菌。將XY4菌株的16S rRNA基因序列與GenBank中已有序列進(jìn)行Blast比對(duì)，結(jié)果顯示XY4菌株與假單胞菌屬種類同源性高(100%)。選取同源性高的假單胞菌屬的16S RNA基因序列，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(圖3)，結(jié)果顯示XY4菌株與惡臭假單胞桿菌Pseudomonasputida顯著聚為一枝。因此，結(jié)合理化特性，綜合判定XY4菌株為惡臭假單胞桿菌P.putida。

2.4 藥敏特性

圖2 雜交鱘死亡率(%)與細(xì)菌劑量對(duì)數(shù) [lg(cfu)]的關(guān)系曲線Fig.2 The relation curve of hybrid sturgeon mortality with logarithm of bacteria dose

表2菌株XY4的生理生化試驗(yàn)結(jié)果

Table2Biochemical characteristics of strain XY4

試驗(yàn)項(xiàng)TestitemXY4Pseudomonasputida[17]運(yùn)動(dòng)性Motility++精氨酸雙水解酶Argininedihydrolase++脲酶Urease--檸檬酸鹽Citrate++葡萄糖產(chǎn)氣Glucosegas--葡萄糖產(chǎn)酸Glucoseacidproduction--H2S產(chǎn)生H2Sproduction--明膠Gelatin--氧化酶Oxidase++硝酸鹽還原Nitratereduction++鳥氨酸脫羧酶Ornithinedecarboxyla--賴氨酸脫羧酶Lysindecarboxylase--V?P試驗(yàn)V?Ptest--乳糖Lactose--甲基紅Methylred--果糖Fructose++木糖Xylose--阿拉伯糖Arabinose--麥芽糖Maltose--吲哚反應(yīng)Indoletest--肌醇Inositol--接觸酶Catalase++

+，陽(yáng)性positive；-，陰性negative。

藥敏試驗(yàn)結(jié)果(表3)顯示：XY4菌株對(duì)頭孢拉定、氟苯尼考及多西環(huán)素等9種抗生素高度敏感；對(duì)諾氟沙星、紅霉素及新霉素等4種抗生素中度敏感；對(duì)苯唑西林、青霉素及阿莫西林等6種抗生素耐藥。

圖3 XY4菌株16S rRNA 基因序列與相關(guān)菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 Phylogenetic tree of XY4 16S rRNA gene sequence and its relative strains

表3XY4菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果

Table3Antibiotic sensitivity test of strain XY4

藥物Drug抑菌圈直徑判斷標(biāo)準(zhǔn)Judgmentstandardofinhibitionzonediameter/mm耐藥Resistant中度敏感Mediumsensitivity高度敏感Highlysensitive藥物含量Dose/(μg·disc-1)抑菌圈直徑Inhibitionzonediameter/mm敏感性Sensitivity環(huán)丙沙星Ciflox≤1516～20≥21522S苯唑西林Oxacillin≤1011～12≥1310R青霉素Penicillin≤1920～27≥2810?14R頭孢拉定Cefadroxil≤1415～17≥183020S阿莫西林Amoxicillin≤1314～17≥182013R呋喃唑酮Furazolidone≤1415～16≥173000R氯霉素Chloramphenicol≤1213～17≥1830022S氟苯尼考Florfenicol≤1213～17≥187522S克林霉素Clindamycin≤1415～20≥2120R諾氟沙星Norfloxacin≤1213～16≥171016I頭孢噻肟Cefotaxime≤1415～22≥233014R紅霉素Erythrocin≤1314～22≥231516I新霉素Neomycin≤1213～16≥173016I卡那霉素Kanamycin≤1314～17≥183017I多西環(huán)素Doxycycline≤1213～15≥163016S左氧氟沙星Levofloxacin≤1314～16≥17522S妥布霉素Tobramycin≤1213～14≥151020S慶大霉素Gentamicin≤1213～14≥151021S阿米卡星Amikacin≤1415～16≥173020S

S，高度敏感； I，中度敏感；R，耐藥。*，青霉素含量的單位是U·片-1。

S， Highly sensitive; I， Medium sensitivity; R， Resistant. *， The dose of penicillin is U·disc-1.

3 討論

3.1 惡臭假單胞菌的鑒定

惡臭假單胞菌分類地位為假單胞菌科、假單胞菌屬，是革蘭氏陰性桿菌。本試驗(yàn)通過(guò)革蘭氏染色、形態(tài)學(xué)觀察及微量生化鑒定管等研究了XY4菌株主要形態(tài)學(xué)及理化特征，結(jié)果表明XY4菌株為革蘭氏陰性桿菌，形態(tài)學(xué)及理化特征亦與惡臭假單胞菌一致。此外，通過(guò)對(duì)XY4菌株的16S rRNA基因序列進(jìn)行測(cè)序，經(jīng)在GenBank中進(jìn)行比對(duì)并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹分析表明，分離菌株XY4與惡臭假單胞菌聚為一枝。因此，結(jié)合分離株XY4的形態(tài)學(xué)、理化特征及系統(tǒng)發(fā)育分析，綜合判定菌株XY4是惡臭假單胞菌，而在人工感染發(fā)病死亡鱘體內(nèi)相同部位亦分離到經(jīng)鑒定與XY4即惡臭假單胞菌一致的菌株，故確定XY4株即惡臭假單胞菌為本次雜交鱘發(fā)病的病原菌。

3.2 惡臭假單胞菌的危害

惡臭假單胞菌在土壤及自然水體中分布廣泛，在自然界中屬正常菌群。惡臭假單胞菌具備較強(qiáng)分解能力，故可以將多種有機(jī)物作為能量來(lái)源，因此常被篩選為各種降解功能菌，嘗試使用其作為環(huán)境改良劑用于廢水處理等[20]。但隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)惡臭假單胞菌也是一類條件致病菌，其致病性取決于魚體生理狀態(tài)及水環(huán)境的變化。惡臭假單胞菌在世界范圍可以使得淡水魚發(fā)病[21]。近年來(lái)，關(guān)于假單胞菌引起水生動(dòng)物發(fā)病病例報(bào)道日趨增多，已報(bào)道惡臭假單胞菌可引起歐洲鰻鱺爛鰓病[22]、中華絨螯蟹爪無(wú)力[23]、條石鯛爛尾白濁病[18]、三疣梭子蟹牛奶病[24]、大鯢肝壞死病[25]、羅氏沼蝦黃鰓和黑鰓病[26]、黑鯛腸炎[27]及大黃魚內(nèi)臟白點(diǎn)病[21，28]等。同時(shí)惡臭假單胞菌還是一種人-禽-魚共患病原菌，據(jù)報(bào)道可以引起鴨[29]等禽類發(fā)病及造成人食物中毒[30]等。本研究從患腸炎病雜交鱘體內(nèi)分離到惡臭假單胞菌病原，其癥狀與黑鯛腸炎病類似[27]，經(jīng)感染試驗(yàn)，確定惡臭假單胞菌為雜交鱘致病菌。關(guān)于惡臭假單胞菌作為雜交鱘病原在國(guó)內(nèi)尚屬首次報(bào)道，表明惡臭假單胞菌感染養(yǎng)殖種類范圍正在擴(kuò)大，其危害性進(jìn)一步增強(qiáng)。同時(shí)，鑒于惡臭假單胞菌還會(huì)對(duì)食品安全和人體健康構(gòu)成一定威脅，加強(qiáng)其食源溯源傳播的可能性研究十分必要。

3.3 雜交鱘腸炎病的藥物防治

本研究測(cè)定了雜交鱘腸炎病致病菌XY4對(duì)19種抗生素的敏感性，研究結(jié)果表明，XY4株對(duì)頭孢拉定、氟苯尼考及多西環(huán)素等9種抗生素高度敏感；對(duì)諾氟沙星、紅霉素及新霉素等4種抗生素中度敏感；對(duì)苯唑西林、青霉素及阿莫西林等6種抗生素耐藥。本研究分離菌株XY4對(duì)慶大霉素及多西環(huán)素高度敏感與任燕等[28]研究結(jié)果相同，而對(duì)氟苯尼考的高度敏感卻與許斌福等[21]報(bào)道的不同，可能是因?yàn)榫陙?lái)源、地理環(huán)境及用藥情況等不同造成的。經(jīng)挑選高度敏感藥物多西環(huán)素，參考水產(chǎn)用商品藥說(shuō)明書使用，配合復(fù)合維生素伴餌投喂5 d后病鱘停止死亡，7 d后大部分雜交鱘恢復(fù)正常攝食，經(jīng)后續(xù)伴餌投喂大蒜素10 d鞏固療效，未出現(xiàn)新的死亡，取得了較好的治療效果。

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Isolation，identificationandantibioticsensitivityofPseudomonasputidafromhybridsturgeon(Husodauricus♀×Acipenserschrenckii♂)

YANG Yuanyuan1， YANG Yibin2，*， CAO Haipeng3， FANG Wei1， LIN Hanqun1， YANG Xianle3， AI Xiaohui2

(1.GuangdongProvincialCenterforAquaticAnimalDiseasePreventionandControl，Guangzhou510222，China; 2.YangtzeRiverFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences，Wuhan430223，China; 3.ShanghaiOceanUniversity，Shanghai201306，China)

The isolation， identification and antibiotic sensitivity of pathogen from the morbid hybrid sturgeon were conducted to provide a reference for control and prevention disease for hybrid sturgeon. The pathogenic bacteria were isolated and purified from liver， kidney， spleen and intestinal tract of hybrid sturgeon. The biochemical identification and 16S rRNA gene sequence determination and the artificial infection test were used to identify whether the strain XY4 was the pathogen， and the antimicrobial susceptibility test was conducted by K-B method. The results showed that strain XY4 was the pathogens of hybrid sturgeon， the LD50of the isolate was counted to 1.30×106cfu·g-1. According to morphological and biochemical characteristics as well as the result of 16S rRNA gene sequence analysis， the isolated strain XY4 wasPseudomonasputida. Strain XY4 was susceptible to cefadroxil， florfenicol， doxycycline and other 6 kinds of antibiotics. The disease caused byPseudomonasputidacan be prevented by above sensitive drugs in fishery farming.

Pseudomonasputida; hybrid sturgeon(Husodauricus♀×Acipenserschrenckii♂); isolation and identification; antimicrobial susceptibility

浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)ActaAgriculturaeZhejiangensis， 2017，29(12): 1978-1985

http://www.zjnyxb.cn

楊圓圓，楊移斌，曹海鵬，等. 雜交鱘源惡臭假單胞菌的分離鑒定及藥敏特性研究[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017，29(12): 1978-1985.

10.3969/j.issn.1004-1524.2017.12.04

2017-04-11

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201503108-CC-1，201203085)

楊圓圓(1984—)，女，湖南婁底人，助理工程師，主要從事水生動(dòng)物病害診斷及其防控技術(shù)研究。E-mail：ykyyy9@126.com

*通信作者，楊移斌，E-mail: yangyb1988@126.com

S941.42

A

1004-1524(2017)12-1978-08

(責(zé)任編輯盧福莊)