[摘 要] 動物樣品采樣是實驗室檢驗程序中最為關(guān)鍵的一步，但因距離、運輸、采樣方法、保存等多種因素的影響導(dǎo)致樣品采樣存在一些問題，對實驗室檢驗結(jié)果產(chǎn)生一定的消極影響。因此，本文對動物樣品采樣方法及常見問題進行詳細的探討。

[關(guān)鍵詞] 動物樣品；采樣方法；常見問題

[中圖分類號] S851.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-7909（2017）04-65-2

動物樣品采樣方法包括采集前的準備工作、采樣實踐以及送驗、記錄等各個環(huán)節(jié)，以下先對日常需求下的準備工作進行說明，然后選取最為常見的血液與組織采樣作為實例加以討論，然后按照流程對送樣、記錄等做出全面介紹。

1 采樣方法

1.1 準備階段

動物樣品采樣前應(yīng)對各種器具進行消毒處理，如刀、剪、鑷子、針管等，需要在開水中煮沸，以0.5 h為宜。然后在采樣前實施酒精燈火焰消毒或涂抹酒精消毒；對于相關(guān)的裝載樣品器皿，應(yīng)進行高壓處理，可以選擇高壓103 kPa處理0.5 h；若條件不足可以進行干烤處理，以160 ℃為準，持續(xù)干烤2 h即可[1]。同時，應(yīng)將所有的容器、器械全套擺放于安全盒內(nèi)。然后根據(jù)實驗室檢驗需要，制定針對不同種類動物的樣品采集流程，包括部位選擇、采樣量、對應(yīng)的放置器具等。

1.2 血液、組織采樣方法

1.2.1 血液采樣方法。其中包括部位的選取、采樣操作、保存。比如，通常按照要求對豬、兔進行耳靜脈采血，牛、羊、兔多實施頸靜脈采血，禽以翅靜脈為主。具體操作中，需要先對確定好的采血部位實施剔毛處理，并在清洗干凈之后，實施酒精消毒（75%）后進行血液采樣。一般對于動物血液的采樣多應(yīng)用一次性注射器實施采集，要求先用三棱針進行穿刺，應(yīng)用針管或塑料試管進行吸入，通常以直徑3～4 mm的試管吸入5 cm即可，要求存放時做好封口處理，并按照要求實施豎立插入樣品盒并進行保存。保存時考慮到時間、距離等而增加抗凝劑，以確保采樣血液的可用性。要求加入后進行搖勻處理（通常針對全血樣品）。至于血清樣品則以靜置為準，其中要求實施離心機離心后的血清析出，令血清與血凝塊分開放置。通常采樣車中會設(shè)置對應(yīng)的保存箱可以保障溫度控制，在不出現(xiàn)反復(fù)凍融的情況下均可以滿足保存要求。

1.2.2 組織采樣。其中包括內(nèi)臟、尿液、呼吸道、皮膚和腸內(nèi)容物等各個方面的組織或組織液采集。比如死亡后的動物內(nèi)臟采樣就需要及時采集，以保證病料的新鮮、預(yù)防污染。夏冬兩季的采集時間盡可能控制在2 h以內(nèi)、6 h以內(nèi)。若溫度過高，應(yīng)確保在死亡后立即實施采樣處理，以確保相關(guān)的組織檢驗有效性。從采樣經(jīng)驗可知，在內(nèi)臟組織塊的采樣方面，通常選用1～2 cm2的切塊即可。按照采樣流程需要做好消毒、組織切塊、消毒容器放置、保存。由于組織采樣會應(yīng)用到各種檢驗項目中，需進行多樣塊切塊處理，尤其應(yīng)針對病理學實施病灶臨近組織采樣，并根據(jù)要求保存時置于福爾馬林溶液（10%），保存溫度控制在冷藏容器密閉下的常用溫度即可，但要求送檢速度要快，確保其由組織采樣到實驗室檢驗的時間最小化。對于尿液的采樣以一次性塑料杯接取即可，要求以動物排尿時的新鮮尿液為準；然后進行用量選擇，以試管吸取或直接將接尿杯置于保存盒內(nèi)。至于呼吸道的樣品采集，則需要通過棉拭子對鼻腔、咽喉等可分泌部位進行蘸式取樣，完成采樣后立即置于5 mL滅菌肉湯、磷酸相加緩沖液內(nèi)保存。至于皮膚以病變位為準進行采樣，腸內(nèi)容物可以通過吸管穿孔吸取，要求將內(nèi)容物置于甘油鹽水緩沖液（30%）中保存；也可以選擇剪取腸管扎緊后的內(nèi)容物直接采樣。

2 常見問題

歸納總結(jié)動物樣品采樣的工作經(jīng)驗以及對于日常易出現(xiàn)問題的發(fā)現(xiàn)，比較常見的采樣問題體現(xiàn)在采血后血清不見析出，可以通過斜面靜置2 h左右再離心處理即可析出，要求視溫度條件而定。另一個就是血清溶血現(xiàn)象、變質(zhì)問題，可以通過嚴格操作確保此類問題的預(yù)防。比如送樣過程以24 h內(nèi)為準，其中要求保持冷藏狀態(tài)，并避免破碎、傾倒、泄露、震蕩等，尤其要求按照采樣后的標簽標示做好記錄、備份，其中包括地址、號牌、樣品的飼養(yǎng)地、聯(lián)系方式、實驗情況、免疫情況、送檢時間、數(shù)量、臨床癥狀和用藥等各項資料[2]。

3 結(jié)語

在動物樣品采樣過程中需要做好采集前的準備工作，并根據(jù)不同動物樣品，不同實驗室檢驗需求實施針對動物類型的對應(yīng)性采樣。由于現(xiàn)代化實驗室檢驗中要求檢驗動物的體液、組織、各種分泌物、腸內(nèi)容物等。因此，應(yīng)在采集中注重相應(yīng)的采樣體系建設(shè)，并在不同類型下實施統(tǒng)籌化的程序化采樣，提高采樣品質(zhì)，為進一步的檢驗工作做好準備。

參考文獻

[1]萬蓉，湯建國.常見動物疫病監(jiān)測的采樣原則、方法及應(yīng)注意的問題[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2015（10）：91-92.

[2]呂趙芳，鄧文平，曹振芳，等.動物疫病監(jiān)測采樣工作的幾點體會[J].農(nóng)業(yè)技術(shù)與裝備，2013（15）：53-54.