[摘 要] 為了解成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)的影響因素，以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，玉米成熟胚為外植體，NAA和2，4-D為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行試驗(yàn)研究。結(jié)果表明，對(duì)于玉米成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)，NAA為1.0、2.0mg/L和2，4-D為5.0 mg/L最為有利；與NAA相比，2，4-D的誘導(dǎo)效果略好。

[關(guān)鍵詞] 玉米；成熟胚；愈傷組織；誘導(dǎo)

[中圖分類號(hào)] S513 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-7909（2017）31-74-1

玉米組織培養(yǎng)有利于克服育種中存在的問(wèn)題，建立高效的體細(xì)胞再生體系，為玉米外源基因的轉(zhuǎn)化創(chuàng)造有利條件，是遺傳轉(zhuǎn)化中的重要環(huán)節(jié)[1]。不同外植體形成愈傷組織及分化能力有很大差異，幼胚是最易誘導(dǎo)且使用最多的外植體[2]，目前已建立了比較完善的組織培養(yǎng)體系。但從取材時(shí)間、保存難易、取用是否方便來(lái)看，成熟胚更加適合。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料、儀器

試驗(yàn)材料為先玉335成熟種子。試驗(yàn)儀器有超凈工作臺(tái)、高壓滅菌設(shè)備、培養(yǎng)皿、不銹鋼鑷子、解剖刀、解剖針、酒精燈和三角瓶等。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 培養(yǎng)基設(shè)計(jì)。以蔗糖濃度為30 g/L，瓊脂為7 g/L，pH值為5.8的MS培養(yǎng)基，共設(shè)計(jì)10種成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基組合，濃度均分別為1.0、2.0、3.0、5.0 mg/L和8.0 mg/L的NAA和2，4-D為生長(zhǎng)素。

1.2.2 誘導(dǎo)玉米成熟胚的愈傷組織。在溫度為24～25 ℃的黑暗和12 h光照強(qiáng)度為1 500～2 000 lx的光照條件下，將每個(gè)接了3塊分離出的成熟胚的滅菌培養(yǎng)基培養(yǎng)30 d。

2 結(jié)果與分析

在MS基本培養(yǎng)基上，當(dāng)NAA和2，4-D的濃度為2.0、3.0 mg/L時(shí)，2種生長(zhǎng)劑的誘導(dǎo)情況基本沒(méi)有差別，其他濃度時(shí)兩者差別明顯。但用平均數(shù)作比較，MS基本培養(yǎng)基上NAA和2，4-D對(duì)玉米成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)率分別為64.00%和65.35%，二者差別很小，生長(zhǎng)素NAA與2，4-D都起到了誘導(dǎo)作用，起到的作用差別不大，但2，4-D的誘導(dǎo)效果比NAA稍微好一些。

由圖1可以看出，在MS培養(yǎng)基上NAA在濃度為1.0 mg/L和2.0 mg/L時(shí)的誘導(dǎo)率最高且相同，均為76.67%，明顯高于在其他濃度時(shí)對(duì)玉米成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)率；2，4-D濃度為2.0、3.0、5.0 mg/L時(shí)的誘導(dǎo)率分別為80.00%、70.00%、86.67%，高于在其他濃度時(shí)對(duì)玉米成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)率，其中濃度為2.0 mg/L和5.0 mg/L時(shí)的誘導(dǎo)率略高于NAA濃度為1.0 mg/L和2.0 mg/L時(shí)的誘導(dǎo)率。

3 結(jié)論

以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，NAA和2，4-D為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，進(jìn)行玉米成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)，NAA為1.0、2.0 mg/L時(shí)和2，4-D為5.0 mg/L時(shí)最為有利；雖然二者在平均值來(lái)看，差別不明顯，但2，4-D的誘導(dǎo)效果略好些。

通過(guò)開展MS培養(yǎng)基上不同種類、不同濃度生長(zhǎng)素處理下玉米成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)試驗(yàn)，以篩選出比較適合成熟胚誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基，從而建立完善的玉米成熟胚培養(yǎng)體系，為玉米的品質(zhì)改良奠定基礎(chǔ)。在后續(xù)試驗(yàn)中，還需繼續(xù)對(duì)玉米成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)中的各種影響因素進(jìn)行更深一步的研究，以便提高玉米成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)率，從而建立完善的玉米成熟胚培養(yǎng)體系。

參考文獻(xiàn)

[1]祁新，趙穎君，胡文河，等.玉米幼胚培養(yǎng)的研究[J].河北師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2003（2）：189-206.

[2]陳英，曹毅，周先禮.玉米幼胚的組織培養(yǎng)及其植株再生的研究[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），1999（6）：1125-1129.