周菲菲 黃 榮 蔣 軍 曾曉紅 何 瀚 鄒育超 陳 默 閔燕飛

COX-2及Her2/neu在結(jié)直腸癌旁組織中表達意義

周菲菲 黃 榮 蔣 軍 曾曉紅 何 瀚 鄒育超 陳 默 閔燕飛

目的檢測結(jié)直腸癌和旁癌組織中的COX-2及Her2/neu的表達情況，探究COX-2及Her2/neu表達與結(jié)直腸癌臨床各指標(biāo)的關(guān)系，并探討其臨床意義。方法選取結(jié)直腸癌患者200例，收集各研究對象的結(jié)直腸癌病理標(biāo)本和癌旁正常組織各一份，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法(S-P法)，檢測結(jié)直腸癌組織和癌旁正常組織中COX-2及Her2/neu蛋白質(zhì)表達。結(jié)果結(jié)直腸癌中Her2/neu表達情況：蛋白質(zhì)表達陽性占86.0%，明顯高于對照組Her/neu陽性表達(24.0%)(P<0.05)。結(jié)直腸癌中Her2/neu表達與Dukes分期和肝轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。結(jié)直腸癌中COX-2表達陽性率為89.0%，而癌旁正常組織中其陽性表達率為32.0%，兩者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，過表達與腫瘤肝轉(zhuǎn)移和Dukes分期有關(guān)(P<0.05)，與Her2/neu表達有正相關(guān)性(P<0.05)。結(jié)論采用免疫組織化學(xué)法探究蛋白質(zhì)的表達，結(jié)腸癌COX-2及Her2/neu蛋白質(zhì)的表達率高于癌旁正常組織；COX-2及Her2/neu蛋白質(zhì)的表達與肝轉(zhuǎn)移和Dukes有關(guān)，而且它們之間的表達具有正相關(guān)性(P<0.05)。

免疫組織化學(xué)；結(jié)直腸癌；Her2/neu；COX-2

結(jié)直腸癌是常見的惡性腫瘤，在我國，發(fā)病率呈現(xiàn)上升的趨勢，已經(jīng)嚴重威脅到人類的健康[1-2]。在美國的研究調(diào)查顯示：在惡性腫瘤中，結(jié)直腸癌的發(fā)病率占據(jù)第三位，死亡率很高，隨著生活習(xí)慣的變化，發(fā)病的年齡呈現(xiàn)年輕化的趨勢[3]。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的報道，到了2005年，由于直腸癌的死亡人數(shù)已經(jīng)到達了800萬人，而且逐年還在增加，預(yù)計到2035年，全球的病人將到達1600萬人。我國目前的現(xiàn)狀：死亡率接近發(fā)達國家，但其中有些城市超過了發(fā)達的國家，形勢不容樂觀。在臨床研究上，一般根據(jù)腫瘤的大小、病理學(xué)分期來判斷病程[4]。結(jié)直腸癌一般是由多種因素、分步驟一步一步發(fā)展導(dǎo)致的，由于人們的對此的認知不夠，對自身結(jié)腸癌的發(fā)現(xiàn)通常較晚，就診時大多數(shù)人都已經(jīng)進入了癌癥的中晚期，而主要的治療手段是盡可能的手術(shù)切除，這樣嚴重影響了手術(shù)的效果和切除率，生存率較低。所以尋求早期的診斷方法和治療的方法已經(jīng)成為了熱點。

1 材料與方法

1.1 基本資料

選取佛山市第一人民醫(yī)院2013年6月至2015年7月行手術(shù)切除的結(jié)直腸癌患者100例，男性患者65例，女性患者35例，平均年齡(45.3±6.8)歲，年齡39～78歲。由本院同一組醫(yī)師分別收集各研究對象的結(jié)直腸癌病理標(biāo)本和癌旁正常組織各一份，經(jīng)病理組織學(xué)確診符合要求后進行后續(xù)研究。

入選標(biāo)準(zhǔn)：行過手術(shù)切除的患者；之前未經(jīng)過腫瘤治療；手術(shù)后都確診病理；沒有他的惡性腫瘤。

排除標(biāo)準(zhǔn)：患有其他惡性腫瘤的疾病；年齡<18周歲；患有家族性腺瘤性息肉病。

1.2 研究方法

將采集并行常規(guī)處理后的結(jié)直腸癌和旁癌組織石蠟病理標(biāo)本不間斷切片為3 μm左右的厚度，觀察并選擇出輪廓較清楚的切片，隨后采用鏈菌素抗生物素蛋白-過氧化物酶免疫組化法(streptavidin-perosidase conjugated method，S-P法)檢測直腸癌和旁癌組織中的COX-2及Her2/neu的表達情況[5]，并進行陰性和陽性對照。根據(jù)免疫組化染色后，在顯微鏡下的觀察結(jié)果，根據(jù)顯色程度判斷陽性強度。0分代表細胞染色不顯著或沒有染色；1分代表弱陽性，即細胞著色比較淺；2分代表中等陽性，即細胞中度著色為棕黃色等；3分為強陽性，即細胞著色為深棕色。在200×倍數(shù)的顯微鏡下隨機觀察5個視野并每個計一百個細胞，當(dāng)視野中觀察的陽性細胞數(shù)占比總計數(shù)細胞百分比為0、0～25%、25%～50%、50%～75%和75%～100%時，則陽性細胞表達分別記為0分、1分、2分、3分和4分。之后計算以上兩種評分的乘積，0～2、3～5、6～8和9～12分別以-、+、++和+++代表，其中-和+為低表達，++和+++為過表達。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

所有實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行分析處理，計量資料的比較采用均數(shù)表示，均數(shù)比較用t進行檢驗，計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗，三者的相關(guān)性采用非條件Logistic回歸分析。P<0.05視為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)直腸癌和正常組織中Her2/neu表達情況

癌組織標(biāo)本和對照組中,Her2/neu蛋白質(zhì)陽性表達率和過表達率高于癌旁組織，兩者間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 結(jié)直腸癌和癌旁組織中Her2/neu的表達情況

2.2 結(jié)直腸癌和癌旁組織中COX-2表達情況

結(jié)直腸癌和癌旁組織中，COX-2表達情況具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 結(jié)直腸癌和癌旁組織中COX-2的表達情況

2.3 結(jié)直腸癌臨床病理特征與Her2/neu的關(guān)系

結(jié)直腸癌中Her2/neu表達與其是否有腸梗阻、年齡、性別均無關(guān)(P>0.05)，與Dukes分期、臨床是否有肝臟轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，見表3。

2.4 COX-2表達與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系

COX-2表達與結(jié)直腸癌是否有腸梗阻、年齡、性別均無關(guān)(P>0.05)，與Dukes分期是否有肝臟轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，見表4。

表3 Her2/neu表達與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

表4 COX-2表達與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

3 討論

在結(jié)直腸癌早期的階段，并沒有什么明顯的癥狀，很容易被人們所忽視，若是出現(xiàn)了腹痛，排便習(xí)慣改變、腸梗阻癥狀已經(jīng)遍布全身的情況，那已經(jīng)是中晚期的直腸癌[6-7]。由于人們的認識不夠，沒有及時發(fā)現(xiàn)直腸癌，并進行早期的診斷，延誤了最佳的治療的時間，治療的效果和生存率降低[8-10]。通過對結(jié)直腸癌的基因的研究，對直腸癌癥狀的認識的深化，在診斷上做到早診斷，進行綜合的治療，提高治療的效率[11-13]。近十年的大量文獻報道，在手術(shù)后的生存率始終在58%左右，手術(shù)后的生存率沒有得到較好的提高，主要的原因還是就診時間較晚，化療效果不明顯，復(fù)發(fā)率很高。而提高直腸癌患者手術(shù)后的生存率已經(jīng)成為當(dāng)前臨床工作者的難題，目前對于直腸癌進行研究，大家一致認為做到早診斷、早治療以及綜合性的治療能從根本上提高患者手術(shù)后的治愈率和生存率[14-15]。

本次研究通過對HER2/meu和COX-2蛋白質(zhì)表達情況的探究，設(shè)置住院患者和健康人群兩組進行對照實驗，使用免疫組織化學(xué)法(S-P法)，檢測直腸癌組的癌組織和相應(yīng)的正常組織中的COX-2及Her/neu蛋白質(zhì)的表達情況，發(fā)現(xiàn)Her/neu在癌組織標(biāo)本中， Her/neu蛋白質(zhì)的陽性表達率和過表達率高于癌旁的正常組織，兩者之間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在結(jié)直腸癌的標(biāo)本和癌旁正常組織中，COX-2蛋白質(zhì)的陽性表達率和過表達率高于癌旁的正常組織，其兩者之間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。COX-2及Her/neu蛋白和結(jié)直腸癌的Dukes分期和肝臟轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)正相關(guān)。為藥物的治療提供了客觀的依據(jù)。

綜上所述，發(fā)現(xiàn)COX-2及Her/neu在直腸癌中的表達高于在正常值組織中的表達，而它們的表達同臨床指標(biāo)有關(guān)系。在直腸癌中COX-2及Her/neu的表達有正相關(guān)性，為靶向藥物的治療提供了客觀的依據(jù)。

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TheExpressionandSignificanceofCOX-2andHer2/neuinColorectalCancerAdjacentTissues

ZHOUFeifei,HUANGRong,JIANGJun,etal.

TheFirstPeople'sHospitalofFoshan,Foshan,528000

ObjectiveTo investigate the expression of COX-2 and Her2/neu in colorectal cancer and adjacent tissues,and to explore the relationship between the expression of COX-2 and Her2/neu and the clinical indexes of colorectal cancer,and its clinical significance.Methods200 cases of colorectal cancer patients were selected to collect the colorectal cancer specimens and adjacent normal tissues.The immunohistochemical method (SP method) was used to detect the expression of COX-2 and Her2/neu protein expression.ResultsThe expression of Her2/neu in colorectal cancer was 86.0%,which was significantly higher than that of the control group (24.0%) (P<0.05).Her2/neu expression in colorectal cancer was associated with Dukes stage and liver metastasis (P<0.05).The positive rate of COX-2 expression in colorectal cancer was 89.0%,while the positive expression rate of COX-2 in colorectal cancer was 32.0%,the difference was statistically significant (P<0.05),overexpression of COX-2 was related with tumor liver metastasis and Dukes staging (P<0.05),and was positively correlated with Her2/neu expression (P<0.05).ConclusionThe expression of COX-2 and Her2/neu protein in colorectal cancer is higher than that in adjacent normal tissues.The expression of COX-2 and Her2/neu protein is related to liver metastasis and Dukes,and they are positively correlated by immunohistochemistry(P<0.05).

Immunohistochemistry;Colorectal cancer;Her2/neu;COX-2

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1745～1747)

佛山市衛(wèi)生和計生局醫(yī)學(xué)科研項目(編號：2015248)

528000 佛山市第一人民醫(yī)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.002

R735.3+7

A

1001-5930(2017)11-1745-03

2016-10-07

2017-07-10)

(編輯：吳小紅)