張江麗 ，楊爍爍 ，王寶增 ，王淑敏 ，秘樹青

（1.廊坊師范學(xué)院，河北廊坊 065000；2.河北省高校食藥用菌資源開發(fā)應(yīng)用技術(shù)研發(fā)中心，河北廊坊 065000；3.廊坊市食用菌技術(shù)重點實驗室，河北廊坊 065000）

蛋白胨和透氣性對大球蓋菇菌絲生長的影響

張江麗1，2，3，楊爍爍1，2，3，王寶增1，2，3，王淑敏1，2，3，秘樹青1，2，3

（1.廊坊師范學(xué)院，河北廊坊 065000；2.河北省高校食藥用菌資源開發(fā)應(yīng)用技術(shù)研發(fā)中心，河北廊坊 065000；3.廊坊市食用菌技術(shù)重點實驗室，河北廊坊 065000）

試驗采用控制變量法，研究了6種不同濃度的蛋白胨和4種不同的封口材料對大球蓋菇菌絲生長的影響。結(jié)果表明：蛋白胨對大球蓋菇菌絲生長的影響作用顯著，濃度為0.1%的蛋白胨對大球蓋菇菌絲生長的促進(jìn)作用最明確，0.2%的蛋白胨次之；大球蓋菇菌絲生長需要較好的透氣性，在溫度及濕度等條件相同的情況下，采用透氣性較好的封口材料可以顯著提高菌絲的生長速度，在27℃條件下恒溫培養(yǎng)，用棉花、橡膠塞和雙層報紙封口的大球蓋菇菌絲的生長速度分別是采用雙層帕拉膠膜封口的生長速度的1.99倍、1.92倍和1.91倍，可見棉花是最適合用作培養(yǎng)大球蓋菇菌絲的封口材料。

大球蓋菇；菌絲；蛋白胨；透氣性

0 引言

大球蓋菇（Stropharia rugosoannulata Farl.ex Murrill），亦稱酒紅色球蓋菇、斐氏球蓋菇、皺環(huán)球蓋菇、皺球蓋菇等，隸屬于真菌界擔(dān)子菌綱傘菌目球蓋菇屬[1]。大球蓋菇是國際菇類交易市場的十大菇類之一，呈酒紅色、肉質(zhì)鮮嫩、營養(yǎng)豐富、口感好，具有防治動脈硬化、預(yù)防冠心病、助消化和緩解精神疲勞等作用[2]，是發(fā)達(dá)國家栽培的重要食用菌之一，也是聯(lián)合國糧農(nóng)組織向發(fā)展中國家推薦栽培的食用菌中的一種[3]。

本試驗考察了蛋白胨濃度和透氣性對大球蓋菇菌絲生長的影響，嘗試突破制約大球蓋菇市場化進(jìn)程中的菌絲細(xì)弱、長速慢等瓶頸。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種

大球蓋菇，由吉林慧東菌業(yè)惠贈。

1.1.2 培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15g，蒸餾水1000mL。

蛋白胨培養(yǎng)基：在PDA培養(yǎng)基中加入蛋白胨配制成濃度為 0%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%（m/v）的蛋白胨培養(yǎng)基，記做 A0、A1、A2、A3、A4、A5。

1.1.3 封口材料

雙層報紙、雙層帕拉膠膜、棉花、橡膠塞共4種，分別記做 B1、B2、B3、B4。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基配制

配制蛋白胨培養(yǎng)基[4]。透氣性試驗直接采用PDA培養(yǎng)基作為大球蓋菇菌絲培養(yǎng)基，每支試管分裝15mL，封口包扎、高壓蒸汽滅菌20min，擺斜面冷卻備用。

1.2.2 接種培養(yǎng)

菌種活化后，轉(zhuǎn)接于平板中，待菌絲長滿后備用。用直徑為6mm的打孔器，在菌絲生長旺處取菌碟接種于培養(yǎng)基中央，使含有培養(yǎng)基的一面接觸培養(yǎng)基，每組重復(fù)3次，以PDA培養(yǎng)基為對照；在透氣性試驗中，將菌碟接種于PDA培養(yǎng)基中央后用不同材料封口，每組重復(fù)3次。27℃恒溫培養(yǎng)，每隔3天觀察、測定并記錄大球蓋菇菌絲生長長度、菌絲的生長勢及密度。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析

全部數(shù)據(jù)經(jīng)spss軟件采用Duncan法（SSR法）進(jìn)行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 蛋白胨濃度對大球蓋菇菌絲生長的影響

表1顯示，蛋白胨能夠影響大球蓋菇菌絲生長。當(dāng)?shù)鞍纂藵舛葹?.1%時，大球蓋菇菌絲生長速度達(dá)到最大值4.91±0.31 mm/d，大球蓋菇菌絲生長最快；隨著蛋白胨濃度的增加，菌絲生長速度卻隨之減緩，統(tǒng)計檢驗結(jié)果顯示A1、A2、A3組大球蓋菇菌絲生長速度與對照組（A0）相比差異不顯著；當(dāng)?shù)鞍纂藵舛却笥?.4%時，A4、A5與對照組（A0）出現(xiàn)顯著差異。

考察大球蓋菇菌絲生長勢發(fā)現(xiàn)：A1、A2組優(yōu)于對照組，其中A1組菌絲平均長度為8.8cm，生長勢最好，其次為 A2組，而 A3、A4、A5組與對照組相當(dāng)。

考察菌絲密度發(fā)現(xiàn)：A3組與對照組相當(dāng)，其他各組則優(yōu)于對照組。

綜上所述，PDA培養(yǎng)基加入0.1%蛋白胨時（A1），大球蓋菇菌絲的生長速度最快，生長勢和密度最優(yōu)，生長情況最好；0.2%的蛋白胨次之。

2.2 透氣性對大球蓋菇菌絲生長的影響

27℃恒溫培養(yǎng)大球蓋菇原種，結(jié)果見表2，數(shù)據(jù)顯示封口材料不同的試管中大球蓋菇菌絲的生長情況明顯不同。統(tǒng)計檢驗結(jié)果表明，采用棉花、橡膠塞以及雙層報紙封口對于大球蓋菇菌絲生長速度的影響差異不顯著，而雙層帕拉膠膜封口的菌絲生長速度與棉花、橡膠塞以及雙層報紙封口的菌絲生長速度的差異達(dá)到極顯著水平，并且菌絲生長速度極顯著低于其余3組，雙層帕拉膠膜封口（B1）的菌絲生長速度為2.22mm/d，而用棉花（B2）和橡膠塞（B3）、雙層報紙（B4）封口的大球蓋菇菌絲的生長速度分別為4.41mm/d、4.26mm/d和4.24mm/d，分別是采用雙層帕拉膠膜封口的生長速度的1.99倍、1.92倍和1.91倍。因此，就大球蓋菇菌絲生長速度而言，采用棉花封口效果最好，橡膠塞次之，然后是雙層報紙，雙層帕拉膠膜最差；就大球蓋菇菌絲生長勢而言，采用棉花和橡膠塞封口效果最好，雙層報紙次之，最后是雙層帕拉膠膜；就大球蓋菇菌絲密度而言，采用雙層帕拉膠膜封口（B1）的菌絲密度最大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于采用棉花（B2）、橡膠塞（B3）、雙層報紙（B4）封口的大球蓋菇菌絲密度。綜上所述，棉花最適合做為大球蓋菇菌絲生長的封口材料，其次為橡膠塞。

表1 不同濃度蛋白膝對大球蓋菇菌絲生長的影響

表2 不同封口材料對大球蓋菇菌絲生長的影響

3 討論

本試驗在研究蛋白胨對于大球蓋菇菌絲生長的影響時，以不含蛋白胨的PDA培養(yǎng)基為對照，設(shè)計了5個蛋白胨濃度的培養(yǎng)基為試驗組。試驗結(jié)果表明隨著蛋白胨濃度的增加，大球蓋菇菌絲的生長速度呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢，蛋白胨濃度為0.1%、0.2%時會促進(jìn)大球蓋菇菌絲的生長，尤其是當(dāng)?shù)鞍纂藵舛葹?.1%時，大球蓋菇菌絲的生長速度達(dá)到最大值，大球蓋菇菌絲的生長勢和菌絲密度也相對較好?？傊鞍纂撕繛?.1%（A1）的大球蓋菇菌絲的生長情況最好，即0.1%的蛋白胨濃度在試驗范圍內(nèi)為促進(jìn)大球蓋菇菌絲生長的最適濃度，其次為0.2%，這與閆培生、李桂舫、蔣家惠等[5]所闡述的蛋白胨不適宜做氮源的結(jié)果不符。原因可能是不同濃度的蛋白胨對于大球蓋菇菌絲的生長的影響不同，而閆培生等[5]研究中所采用的蛋白胨濃度范圍正好處于抑制大球蓋菇菌絲生長的階段。本試驗結(jié)果與黃春燕、萬魯長、張柏松等[6]所得到的結(jié)論一致，即適當(dāng)濃度的蛋白胨有益于大球蓋菇菌絲生長，當(dāng)?shù)鞍纂藵舛葹?.1%時大球蓋菇菌絲的生長狀況最好。本試驗測得的大球蓋菇菌絲的生長速度普遍高于黃春燕等[6]的報道，可能是由于大球蓋菇菌種不同所致，本研究所用菌種由吉林慧東菌業(yè)惠贈。

另外，本試驗在研究透氣性對于大球蓋菇菌絲生長的影響時采用了雙層帕拉膠膜、棉花、橡膠塞和雙層報紙4種不同的材料封口，結(jié)果表明大球蓋菇菌絲的生長需要良好的透氣條件。在同一培養(yǎng)基和同一濕度條件下，27℃條件下恒溫培養(yǎng)，在這4種材料中棉花是促進(jìn)大球蓋菇菌絲生長的最適宜的封口材料。采用棉花、橡膠塞和雙層報紙封口的菌絲生長速度分別是采用雙層帕拉膠膜封口的生長速度的1.99倍、1.92倍和1.91倍，并且采用棉花封口的大球蓋菇菌絲生長勢也是很強(qiáng)的，菌絲密度一般，總體來說棉花是最有利于大球蓋菇菌絲生長的封口材料，即大球蓋菇菌絲生長需要良好的透氣性，實驗結(jié)果與付江習(xí)和房振田、卜凡國[7-8]所闡述的大球蓋菇菌絲生長對氧氣要求不高的觀點不符。本試驗的研究結(jié)果充分說明，大球蓋菇菌絲的生長需要良好的透氣性，換言之，大球蓋菇菌絲生長階段對氧氣的要求較為嚴(yán)格，采用不同的封口材料對大球蓋菇菌絲生長速度影響較為顯著，與劉本洪、甘炳成、彭衛(wèi)紅等[9]的結(jié)論一致，即大球蓋菇菌絲生長需要良好的透氣性。

4 結(jié)論

試驗范圍內(nèi)，0.1%的蛋白胨為促進(jìn)大球蓋菇菌絲生長的最適濃度，0.2%的蛋白胨次之。

在試驗所用的4種封口材料中，棉花最適合用作培養(yǎng)大球蓋菇菌絲，其次為橡膠塞，雙層帕拉膠膜最差。

［1］黃年來.大球蓋菇的分類地位和特征特性［J］.食用菌，1995，17（6）:11.

［2］暴增海，秋傳慶，王增池，等.大球蓋菇部分生物學(xué)特性研究［J］.北方園藝，2009，（1）:217-219.

［3］張勝友.新法栽培大球蓋菇［M］.武漢:華中科技大學(xué)出版社，2010:32-36.

［4］何華奇，曹暉，潘迎捷.溫度和pH值對大球蓋菇菌絲生長的影響［J］.安徽技術(shù)師范學(xué)院學(xué)報，2004，18（1）:43-45.

［5］閆培生，李桂舫，蔣家慧，等.大球蓋菇菌絲生長的營養(yǎng)需求及環(huán)境條件［J］.食用菌學(xué)報，2001，8（1）:5-9.

［6］黃春燕，萬魯長，張柏松，等.大球蓋菇菌絲生長適宜氮源研究［J］.中國食用菌，2012，31（6）:18-19.

［7］付江習(xí).大球蓋菇高產(chǎn)栽培技術(shù) ［J］.中國食用菌，2000，19（4）:22-23.

［8］房振田，卜凡國.大球蓋菇高產(chǎn)栽培技術(shù) ［J］.中國食用菌，2000，19（5）:29-30.

［9］劉本洪，甘炳成，彭衛(wèi)紅，等.透氣性及低溫處理對大球蓋菇菌絲生長的影響 ［J］.應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報，2004，10（2）:246-248.

Effects of Peptone and Air Permeability on the Mycelia Growth of Stropharia rugosoannulata Farl.ex Murrill

ZHANG Jiang-li1，2，3，YANG Shuo-shuo1，2，3，WANG Bao-zeng1，2，3，WANG Shu-min1，2，3，BEI Shu-qing1，2，3
（1.Langfang Teachers University，Langfang 065000，China；2.Edible and Medicinal Fungi Research Center of Hebei Universities，Langfang 065000，China；3.Langfang Key Laboratory of Edible Fungi Technology，Langfang 065000，China）

By controlling some variables in the experiment，six different concentrations of peptone and four different types of sealing materials were used to verify the effect on mycelia growth of Stropharia rugosoannulata Farl.ex Murrill.The result showed that the peptone had a positive effect on the mycelia growth of which 0.1% peptone was the most effective，followed by 0.2%.On the other hand，air permeability was needed in the growth of Stropharia rugosoannulata Farl.ex Murrill.Sealing materials with favorable air permeability could significantly accelerate the growth rate of mycelia under the same conditions of temperature and humidity.The mycelia growth rate of Stropharia rugosoannulata Farl.ex Murrill.sealed by cotton，rubber plug and double layer newspapers was 1.99，1.92 and 1.91 times that of double layer parafilm under 27℃.It could be concluded that cotton was the optimal sealing material for mycelia growth of Stropharia rugosoannulata Farl.ex Murrill.

Stropharia rugosoannulata Farl.ex Murrill；mycelia；peptone；air permeability

TS209

A

1674-3229（2017）04-0062-03

2017-10-09

河北省高校食藥用菌資源開發(fā)應(yīng)用技術(shù)研發(fā)中心項目；河北省生物科學(xué)專業(yè)綜合改革試點項目；2015年河北省質(zhì)量工程項目教師職業(yè)能力訓(xùn)練中心項目；廊坊師范學(xué)院自然科學(xué)研究項目（LSLY201503）；廊坊師范學(xué)院精品課（J2015-08）；廊坊師范學(xué)院教學(xué)改革項目（k2015-14）；廊坊師范學(xué)院微生物學(xué)重點學(xué)科項目（2015001）；廊坊市科普基地項目

張江麗（1972-），女，碩士，廊坊師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院副教授，研究方向：植物學(xué)。