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        miRNA-758在宮頸癌腫瘤組織、血液和宮頸脫落細(xì)胞中的表達情況及其對宮頸癌浸潤和侵襲的調(diào)控機制

        2017-12-27 08:09:18張麗娟
        實用癌癥雜志 2017年12期
        關(guān)鍵詞:宮頸癌宮頸調(diào)控

        張麗娟

        miRNA-758在宮頸癌腫瘤組織、血液和宮頸脫落細(xì)胞中的表達情況及其對宮頸癌浸潤和侵襲的調(diào)控機制

        張麗娟

        目的探討宮頸癌患者腫瘤組織、血液和宮頸脫落細(xì)胞中miRNA-758表達情況及其對宮頸癌浸潤和侵襲的調(diào)控機制。方法選取宮頸癌患者40例作為宮頸癌組,另選取非宮頸癌患者40例作為非宮頸癌組。采用QRT-PCR對各標(biāo)本中MEPE mRNA表達進行檢測,采用Western Blot對腫瘤組織中MEPE蛋白表達進行檢測,運用ELISA法對血液中MEPE蛋白表達進行檢測,采用QRT-PCR對各標(biāo)本中miRNA-758的mRNA表達進行檢測,然后對2組患者各標(biāo)本中MEPE mRNA、蛋白、miRNA-758表達水平進行統(tǒng)計分析。結(jié)果宮頸癌組患者腫瘤組織、血液、宮頸脫落細(xì)胞中MEPE mRNA、蛋白表達水平均顯著高于非宮頸癌組(P<0.05),miRNA-758表達水平均顯著低于非宮頸癌組(P>0.05)。結(jié)論miRNA-758在宮頸癌患者腫瘤組織、血液和宮頸脫落細(xì)胞中表達水平降低,可能通過MEPE對宮頸癌浸潤和侵襲進行調(diào)控,值得臨床充分重視。

        宮頸癌;腫瘤組織;血液;宮頸脫落細(xì)胞;miRNA-758表達;宮頸癌浸潤和侵襲;調(diào)控機制

        宮頸癌屬于1種婦科惡性腫瘤,在臨床極為常見,僅次于乳腺癌[1]。本研究主要探討宮頸癌患者腫瘤組織、血液和宮頸脫落細(xì)胞中miRNA-758的表達情況及對宮頸癌浸潤和侵襲的調(diào)控機制,現(xiàn)報告如下。

        1 材料與方法

        1.1 一般資料

        選取我院2014年5月至2016年5月收治的宮頸癌患者40例,所有患者均接受手術(shù)治療,均經(jīng)術(shù)后病理證實為宮頸癌,均為首次發(fā)病,均知情同意;將術(shù)前應(yīng)用過激素、接受過放化療治療的患者排除在外?;颊吣挲g27~69歲,平均(48.5±10.2)歲。腫瘤直徑<4 cm 36例,≥4 cm 4例。在宮頸鱗癌病理分級方面,30例患者為高中分化,10例患者為低分化;在浸潤深度方面,22例患者為淺肌層,18例患者為深肌層;在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面,12例患者有,28例患者無。將這些患者作為宮頸癌組,另選取我院同期收治的非宮頸癌患者40例作為非宮頸癌組,患者年齡25~66歲,平均(45.4±10.2)歲。2組患者的年齡差異不顯著(t=1.886,P>0.05),具有可比性。

        1.2 方法

        將2組患者的標(biāo)本收集起來,分為以下三個部分:①將宮頸癌組患者的腫瘤組織及癌旁組織切除,將其保存在液氮低溫環(huán)境中待測;②將2組患者的清晨空腹外周血采集下來,EDTA抗凝并在-20 ℃的溫度下保存;③用取樣專用軟毛刷將宮頸脫落細(xì)胞收集起來,在細(xì)胞保存液中放置保存。采用QRT-PCR對各標(biāo)本中MEPE mRNA表達進行檢測;運用Trizol法將標(biāo)本中的總RNA提取出來,然后分別進行逆轉(zhuǎn)錄將cDNA獲取過來。運用2-△△Ct法將結(jié)果計算出來,并將MEPE/GAPDH比值計算出來。采用Western Blot對腫瘤組織中MEPE蛋白表達進行檢測,采用image lab3.0軟件將蛋白質(zhì)信號條帶圖像獲取過來并分析其信號,目的蛋白的相對含量=目的蛋白條帶/內(nèi)參β-actin條帶的灰度值。運用ELISA法對血液中MEPE蛋白表達進行檢測,采用QRT-PCR對各標(biāo)本中miRNA-758的mRNA表達進行檢測。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

        2 結(jié)果

        宮頸癌組患者腫瘤組織、血液、宮頸脫落細(xì)胞中MEPE mRNA、蛋白表達水平均顯著高于非宮頸癌組(P<0.05),miRNA-758表達水平均顯著低于非宮頸癌組(P<0.05),見表1。

        表1 2組患者各標(biāo)本中MEPE mRNA、蛋白、miRNA-758表達水平比較

        注:*為與非宮頸癌組比較,P<0.05。

        3 討論

        2000年,相關(guān)醫(yī)學(xué)學(xué)者最初從腫瘤相關(guān)性低血磷性骨軟化癥(osteomalacia due to low blood sugar,OHO)患者腫瘤組織的cDNA文庫中將細(xì)胞外基質(zhì)磷酸化糖蛋白(MEPE)篩選尋找并克隆了出來[2]。RT-PCR結(jié)果表明[3],正常組織中MEPE表達于大腦及骨髓中,極少表達于人胎盤、腎、肺中。OHO患者腫瘤組織中具有較高的MEPE表達,因此臨床普遍認(rèn)為[4],在低血磷性骨軟化癥的誘發(fā)因素中,其屬于調(diào)磷因子。相關(guān)醫(yī)學(xué)研究表明[5],在DNA修復(fù)及對DNA損傷性的耐藥性進行對抗的過程中,其均發(fā)揮著極為重要的作用。此外,還有相關(guān)醫(yī)學(xué)研究表明[6],腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移性受到MEPE/OF45表達水平的直接而深刻的影響,在腫瘤耐藥性及遷移性中均占有極為重要的地位。但是,現(xiàn)階段,還很少有相關(guān)醫(yī)學(xué)研究報道宮頸癌組織中MEPE的表達情況及其調(diào)控基因[7]。

        現(xiàn)階段,在宮頸癌的篩查中,臨床通常單獨應(yīng)用宮頸細(xì)胞學(xué)檢查或?qū)⑵浜虷PV檢測有機結(jié)合起來。相關(guān)醫(yī)學(xué)研究表明[8],在分層篩查HPV陽性婦女的過程中,宮頸細(xì)胞學(xué)檢查的時效性較好。宮頸細(xì)胞學(xué)檢查具有較高的特異性,已經(jīng)在分層篩查HPV初篩陽性婦女的過程中得到了廣泛應(yīng)用。檢測宮頸脫落細(xì)胞樣本中一些分子水平能夠?qū)⒂行б罁?jù)提供給臨床診斷和治療宮頸癌的工作[9]。本研究結(jié)果表明,宮頸癌組患者腫瘤組織、血液、宮頸脫落細(xì)胞中MEPE mRNA、蛋白表達水平均顯著高于非宮頸癌組(P<0.05),miRNA-758表達水平均顯著低于非宮頸癌組(P>0.05),說明MEPE在一定程度上調(diào)控宮頸癌的途徑可能是將其轉(zhuǎn)錄及蛋白功能表達水平上調(diào)。MEPE mRNA及蛋白表達水平在宮頸癌患者血液和宮頸脫落細(xì)胞中具有一致的上調(diào)趨勢。由于腫瘤轉(zhuǎn)移的常見渠道為血液,因此宮頸癌的轉(zhuǎn)移可能受到血液中MEPE蛋白表達上調(diào)的影響,宮頸脫落細(xì)胞中具有異常的MEPE蛋白表達可能能夠作為宮頸癌的潛在標(biāo)志物。在宮頸癌病理中,miRNA-758可能將調(diào)控作用發(fā)揮了出來,同時對MEPE蛋白表達方式造成影響的途徑還極有可能為調(diào)控靶基因MEPE的轉(zhuǎn)錄水平。

        宮頸癌的發(fā)生發(fā)展是一個極其復(fù)雜的過程,涉及多階段、多因素、多基因變異積累及相互作用,在分子水平上涉及眾多抑癌基因、原癌基因、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因及蛋白質(zhì)改變[10]。血液、宮頸脫落細(xì)胞這些生物標(biāo)本的獲取過程中具有無創(chuàng)性、較為簡便的操作、較高的敏感性及特異性,因此具有較為廣闊的臨床診斷應(yīng)用前景,現(xiàn)階段,在臨床檢查中可以作為良好的輔助[11]。但是,臨床仍然需要進一步研究宮頸癌細(xì)胞水平上miRNA-758的生物功能,將miRNA-758基因?qū)EPE和該腫瘤關(guān)系進行調(diào)控的直接證據(jù)進一步尋找出來,從而對腫瘤發(fā)展過程中miRNA-758的作用進行更深入的了解,將有效的理論依據(jù)提供給臨床預(yù)防、診斷及治療[12]。

        總之,miRNA-758在宮頸癌患者腫瘤組織、血液和宮頸脫落細(xì)胞中表達水平降低,可能通過MEPE對宮頸癌浸潤和侵襲進行調(diào)控,值得臨床充分重視。

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        ExpressionsofmiRNA-758inTumorTissue,BloodandCervicalExfoliatedCellsofPatientswithCervicalCancerandItsRegulationMechanismonInfiltrationandInvasionofCervicalCarcinoma

        ZHANGLijuan.

        TheSecondPeople'sHospitalofFuxin,F(xiàn)uxin,123000

        ObjectiveTo investigate the expressions of miRNA-758 in tumor tissue,blood and cervical exfoliated cells of patients with cervical cancer and its regulation mechanism on infiltration and invasion of cervical carcinoma.Methods40 cases of patients with cervical cancer were selected as cervical cancer group,40 cases of non-cervical cancer were selected as non-cervical cancer group,the expressions of MEPE mRNA in all samples were detected by QRT-PCR,the expressions of MEPE protein in tumor tissue were detected by western blot.The expressions of MEPE protein in the blood were detected by ELISA method,the expressions of miRNA-758 mRNA in the specimens were detected by QRT-PCR,and MEPE mRNA,protein,miRNA-758 expression levels in each specimen of the 2 groups were statistically analyzed.ResultsThe MEPE mRNA,protein,miRNA-758 expression levels in cervical tumor tissue,blood,cervical exfoliated cells of the cervical cancer group were significantly higher (P<0.05),the miRNA-758 expression levels in cervical cancer group were significantly lower than the non cervical cancer group (P>0.05).ConclusionThe expression levels of miRNA-758 in tumor tissue,blood and cervical exfoliated cells of cervical cancer patients reduced,which may regulate infiltration and invasion of cervical carcinoma by MEPE,and it is worthy of clinical attention.

        Cervical cancer;Tumor tissue;Blood;Cervical exfoliated cells;miRNA-758 expression;Infiltration and invasion of cervical cancer;Regulatory mechanism

        (ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1934~1936)

        123000 遼寧省阜新市第二人民醫(yī)院(阜新市婦產(chǎn)醫(yī)院)

        10.3969/j.issn.1001-5930.2017.12.006

        R737.33

        A

        1001-5930(2017)12-1934-03

        2016-12-28

        2017-08-29)

        (編輯:甘艷)

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