譚晨聲，楊燚，張進(jìn)平

(蘇州大學(xué) 生物醫(yī)學(xué)研究院，江蘇 蘇州 215123)

譚晨聲，楊燚，張進(jìn)平

(蘇州大學(xué) 生物醫(yī)學(xué)研究院，江蘇 蘇州 215123)

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.2 染色試劑 Giemsa染色液購(gòu)自珠海貝索生物技術(shù)有限公司；天狼星紅染色液(Direct Red)購(gòu)自Fluke公司；HE染色液購(gòu)自廣州市秀威貿(mào)易有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.2 制片和染色 取35 d左右小鼠的肺臟，按常規(guī)方法固定、脫水、石蠟包埋、制備切片，分別進(jìn)行HE染色和天狼星紅染色。肺灌洗液用甩片機(jī)甩片，然后用Giemsa染色液染色。用Nikon Eclipse 90i全自動(dòng)顯微鏡觀察并拍照。

1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè) 取35 d左右小鼠肺灌洗液、脾臟細(xì)胞、骨髓、外周血等，用相應(yīng)熒光抗體染色20 min，部分細(xì)胞用CD16/32抗體封閉后再染相應(yīng)流式抗體。然后用PBS洗完后，用FACS CantoII分析各亞群細(xì)胞的變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。兩組間比較采用t檢驗(yàn)分析。P<0．05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

A.小鼠35 d死亡時(shí)，dKO小鼠明顯體積變??；B.小鼠生存率統(tǒng)計(jì)；C.小鼠35 d時(shí)體重

A.Mice died about the 35th day, dKO mice showed significantly smaller size; B.The statistics of Mice survival rate; C.Mice weight at 35 days

圖4Lysozyme2在不同免疫細(xì)胞中的表達(dá)

Fig4Lysozyme2expressionindifferentimmunecells

3 討 論

圖5FACS檢測(cè)cDC在不同組織中的比例檢測(cè)(aP<0.01)

Fig5TheproportionofcDCindifferenttissuesbyFACS(aP<0.01)

圖6CD11b+Gr1+細(xì)胞在骨髓和脾臟中比例檢測(cè)(aP<0.05，bP<0.01)

Fig6TheproportionofCD11b+Gr1+cellsinbonemarrowandspleen(aP<0.05，bP<0.01)

圖7脾臟和肺灌洗液中Mφ細(xì)胞檢測(cè)(aP<0.05，bP<0.01，cP<0.0001)

Fig7TheproportionofMφinspleenandLunglavagefluidbyFACSanalysis(aP<0.05，bP<0.01，cP<0.0001)

[4] DACCORD C,MAHER T M.Recent advances in understanding idiopathic pulmonary fibrosis [J].F1000Research,2016,5.

(InstitutesofBiologyandMedicalSciences,SoochowUniversity,Suzhou,215123，China)

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31270939，81471526，81771667)；組織器官區(qū)域免疫特性與疾病重大研究計(jì)劃培育項(xiàng)目(91442110)；江蘇省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(BK2012617)；江蘇省高校自然科學(xué)研究重大項(xiàng)目(13KJA310004)；江蘇省自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(BK20170349)

譚晨聲(1992-)，女,山東濟(jì)寧人，在讀免疫學(xué)專業(yè)碩士研究生，研究方向：淋巴細(xì)胞發(fā)育和分化。Email:739290738@qq.com

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孫茂民)