石雷磊 徐建中

·藥學研究·

杭白芍產地初加工方法研究

石雷磊1，2徐建中3

白芍；產地加工；芍藥苷；指紋圖譜

白芍為毛茛科植物芍藥（paeonia lactiflora pal1）的干燥根[1]，是“浙八味”中的重要一味，是浙江重要的地道藥材。目前白芍在浙江以東陽和磐安兩地栽培面積最大，藥材俗稱“杭白芍”，在其它省份以安徽亳州等地栽培面積最大，俗稱“亳白芍”。據(jù)《東陽縣志》記載，杭白芍自宋代開始就已有種植，至今已有近千年種植史?！吨兴幋筠o典》記載“浙江產稱杭白芍，質量最佳”。目前杭白芍的產地初加工方法主要采用先去皮水煮至透心后曬干[2]，而亳白芍主要采用先水煮后去皮的加工方式[3-4]，兩者加工方式的不同可能導致藥材質量的差異。本文主要通過開展去皮或不去皮蒸制（煮制）、先去皮后水煮（水蒸）或先水煮（水蒸）后去皮的加工方法試驗，以藥材成品得率、水浸提物含量、有效成分芍藥苷含量以及指紋圖譜等為指標，考察不同加工方法白芍藥材質量的差異性。

1 材料與方法

1.1 材料高效液相色譜儀（Agilent公司，1100系列），超聲波清洗儀（昆山超聲儀器有限公司，KQ-100DB型數(shù)控超聲清洗器，功率100W，頻率40kHz）等。乙醇和甲醇均為分析純（浙江三鷹化學試劑有限公司）；磷酸溶液為分析純（浙江新安化工集團股份有限公司）；乙腈為色譜純（美國TEDIA公司）；芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號110736-201337）；水為重蒸餾去離子水；微孔濾膜（0.45μm，上海迪清過濾技術有限公司）；Hypersil ODS2 C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）（伊利特公司）。杭白芍藥材經浙江省中藥研究所有限公司俞旭平高級工程師鑒定為毛茛科芍藥屬白芍（paeonia lactiflora pal1）的根。

1.2 加工方法2013年在磐安杭白芍產地進行了杭白芍初加工方法試驗，每個處理鮮杭白芍用量均為2000g，加工方法試驗所選用的杭白芍大小中等、粗細均勻（d＝1～2cm）。經過不同方法加工后均在太陽下曬干，曬干后的藥材含水量約8.0%，曬干后稱量藥材干重，并計算藥材成品得率（折干率），同時分析測定樣品中芍藥苷含量和水浸提物含量，每個處理重復3次。

試驗處理：去皮后曬干、不去皮曬干、先蒸5.0min后去皮曬干、先煮5min后去皮曬干、以及去皮后分別蒸5、10、15min，去皮后分別煮3、5、10、15min等。加工時均在農家中進行，水蒸或煮均為沸水，保持火旺。

1.3 藥材質量分析芍藥苷含量測定。流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液；流速：1.0mL/min；檢測波長：230nm，柱溫：25℃；進樣量：10μL。采用梯度洗脫，分時流動相比例表流動相乙腈（A）-0.1%磷酸溶液，梯度洗脫，0～10min，10%～15%A；10～25min，15%～25%A；25～52min，25%～90%A；52～55min，90%～10%A；55～60min，10%A，分析總時間60min，理論塔板數(shù)按芍藥苷計算不低于3000。水浸提物測定：2010版中國藥典一部附錄水熱浸提物含量測定方法。

1.4 HPLC色譜指紋圖譜分析條件與上述芍藥苷含量測定相同，方法學考察（略）。

2 結果與分析

2.1 去皮方式對杭白芍藥材質量的影響從表1中可見，杭白芍產地加工時藥材成品得率以不去皮直接曬干的加工方式最高，達46.5%，而以去皮后曬干的成品得率最低，僅為40.0%；先蒸后去皮與先煮后去皮兩種加工方式的成品得率接近，為44.7～45.0%；先去皮后煮5.0min曬干處理成品得率為42.8%，較先蒸或煮后去皮加工方式低。從水浸提物含量來看，以去皮后曬干含量最高，為37.06%，其次為先去皮煮5.0min后曬干處理為29.78%，其余3個處理較接近，去皮后曬干水浸提物含量較不去皮曬干增加47.53%。從芍藥苷含量來看，不去皮直接曬干處理芍藥苷含量3.14%，較去皮后曬干處理的2.96%增加5.80%，說明根皮中可能含有較高含量的芍藥苷。而從去皮的不同加工方法結果中可以看出，芍藥苷含量以先去皮煮5min后曬干處理加工方式最高，為3.48%；其次為先蒸5min后去皮曬干處理為3.07%；最低的是先煮5min后去皮曬干的含量最低，為2.55%。綜合各因素考慮，雖然不去皮直接曬干處理成品得率高，芍藥苷含量也較高，但由于藥材未加工過，粉性足，不利于后續(xù)飲片加工時切片；而先蒸或煮后再去皮處理雖然成品得率較先去皮后蒸或煮的高，但芍藥苷含量較其分別降低13.20%和36.40%，而目前產地采用的加工方式普遍是先去皮后煮，可能也有其合理性。

表1 2013年磐安杭白芍去皮和不去皮加工方法試驗（%）

2.2 先去皮后水蒸不同時間處理對藥材質量的影響

從表2中可以看出，去皮后水蒸不同時間處理，成品得率隨著水蒸時間的延長而提高，以去皮后蒸15min處理最高，以蒸5min處理最低；水浸提物含量也隨著水蒸時間的延長而提高，以蒸15min處理最高，較蒸5min處理增加13.43%，較蒸10min處理公增加1.0%；從芍藥苷含量可以看出，隨著蒸時間從5min增加到10min，芍藥苷含量從2.85%增加到3.14%，隨后又出現(xiàn)下降現(xiàn)象，說明水蒸時間不宜過長，以10min為最適宜。

表2 2013年杭白芍產地加工蒸不同時間處理結果（%）

2.3 去皮后不同水煮時間對杭白芍藥材質量的影響

從表3可以看出，不同水煮時間的成品得率隨著水煮時間延長而提高，以5min最高，后隨著時間延長而出現(xiàn)降低，以15min處理最低，為39.9%；水浸提物含量變化規(guī)律也與成品得率變化規(guī)律類似，也以煮5min處理最高；芍藥苷變化規(guī)律也以煮5min處理最高，其次是煮10min，為3.47%，最低的是15min處理，為2.99%。

表3 2013年杭白芍不同水煮時間處理結果（%）

2.4 產地直接切片加工對杭白芍飲片質量影響從表4可以看出，產地直接切片加工方式中，以去皮煮5min后切片生曬為適宜，而去皮直接切片生曬由于曬干需要一段時間，如遇陰雨天氣不容易曬干，片形顏色和外觀受影響，而且水浸提物含量過低。

表4 產地直接切片加工對白芍飲片質量影響（%）

2.5 杭白芍不同初加工方法的HPLC指紋圖譜

2.5.1 共有指紋峰的標定針對上述初加工樣品，選出下列7個不同加工方法的杭白芍樣品。S1：去皮鮮切片生曬；S2：去皮煮5min后切片生曬；S3：不去皮直接切片生曬；S4：先蒸5min后去皮曬干；S5：煮5min后去皮曬干；S6：去皮蒸10min后曬干；S7：去皮煮5min后曬干。在7批初加工樣品測定基礎上，將杭白芍的指紋圖譜峰鎖定在2～50min共有指紋區(qū)進行統(tǒng)計，從7批樣品圖譜的共有指紋區(qū)標定了10個共有峰，所選擇的共有峰面積之和占總峰面積的90%以上，可以較為全面的反映樣品的內在質量。結果見圖1（其中，峰4為芍藥苷）。

圖1 杭白芍產地初加工共有指紋峰

2.5.2 相似度分析采用國家藥典委員會“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（2004A）”進行數(shù)據(jù)分析處理，采用多點校正將色譜峰自動匹配，生成對照圖譜。將其他樣品的色譜峰與對照圖譜進行自動匹配，計算S1～S7樣品與對照圖譜的相似度，結果表明杭白芍各初加工方法所得的白芍藥材相似度較高，都在0.97以上。結果見表5和圖2。

表5 杭白芍產地初加工指紋圖譜相似度

圖2 白芍產地初加工指紋圖譜

3 討論

雖然產地杭白芍不去皮直接曬干加工方式藥材成品得率高，但芍藥苷含量卻比去皮后水煮處理低，水煮后能使芍藥苷含量增加，這與楊杰等[5]研究的一致。由于藥材未加工過，粉性足，不利于后續(xù)加工時切片；同時由于不易于短期內曬干，如遇陰雨天氣容易發(fā)霉，導致藥材變質。

先蒸或煮后去皮處理雖然成品得率較先去皮后煮的高，但芍藥苷含量較其分別降低13.20%和36.40%，水浸提物含量分別降低17.16%和14.37%，說明先去皮后煮加工方式整體優(yōu)于先煮或蒸后去皮加工[2]，這可能與我們加工時的水溫和火候等條件有關。即在水煮前要保持水沸騰，水溫在100℃、火勢旺，水量以淹過白芍段為準，煮5min即可達到透心，由于與水接觸時間較短致使芍藥苷流失較少，而隨著煮的時間延長，芍藥苷含量即出現(xiàn)下降趨勢，這與徐再興等[6]研究的結果一致。而亳白芍加工時采用的先煮后去皮加工時在水溫為85～90℃時煮10～20min，芍藥苷含量大于先去皮后水煮加工方式[6-8]，可能與其煮時間過長或投入芍藥段后溫度降低過多，使芍藥中能降解芍藥苷的酶活性增強有關。因此，目前在浙江磐安和東陽等杭白芍產地采用的普遍加工方式是先去皮后煮，也有其科學性。

從去皮后水蒸不同時間看，以水蒸10min最佳，不僅芍藥苷含量高，成品得率和水浸提物含量均較高，時間過短或過長均導致芍藥苷含量降低；從去皮后水煮不同時間來看，煮制時間以沸水中煮5min為妥，時間過長會造成水浸提物含量降低、芍藥苷等成分流失，藥材成品得率降低。

從HPLC指紋圖譜相似度評價結果看，不同加工方法的杭白芍藥材相似度較高，都在0.97以上，說明各加工方法是可行的。中藥指紋圖譜作為一種建立在系統(tǒng)研究化學成分基礎上的可量化的分析鑒定手段，目前廣泛應用于中藥材及中藥制劑半成品的質量評價，以考察其真實性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。中藥指紋圖譜能較為全面地反映加工白芍中所含化學成分的種類與數(shù)量，因而對其進行整體描述和評價是可行的。如果能夠結合譜效學開展進一步研究，可使藥材產地加工方法與中藥材及飲片的質量與其藥效真正結合起來，從而有助于清晰闡明中藥作用機理，這是下一步研究方向。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2015年版（一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：105.

［2］周丹英，余琪，錢冬偉，等.白芍藥材產地加工方法研究［J］.中國現(xiàn)代應用藥學雜志，2009，26（9）：727-729.

［3］王甫成，時維靜，汪翠妮.不同加工方法對亳白芍中芍藥苷及水溶性浸出物含量的影響［J］.中國實驗方劑學雜志，2011，17（18）：75.

［4］俞年軍，金傳山，吳德林，等.亳白芍產地加工質量的研究［J］.現(xiàn)代中藥研究與實踐，2005，19（2）：47-49.

［5］楊杰，田亞男，萬穎,等.不同加工炮制方法對白芍質量的影響［J］.西北藥學雜志，2010，25（5）：341-342.

［6］徐再興，薛玉梅.不同加工方法對白芍質量的比較［J］.基層中藥雜志，1995，9（2）：21.

［7］李軍，孟祥松，施志順，等白芍的傳統(tǒng)加工工藝各環(huán)節(jié)對其芍藥苷含量的影響［J］.齊魯藥事，2012，31（7）：395-397.

［8］童富淡，胡家恕，宋勤.不同方法加工杭白芍的芍藥苷含量和FTIR光譜特征［J］.中國藥學雜志，2006，41（16）：1262-1264.

1浙江中醫(yī)藥大學藥學院（杭州310053）；2浙江省新昌縣人民醫(yī)院門診藥房（紹興312500）；3浙江省中藥研究所藥材資源室（杭州310023）

徐建中，Tel：13867450239；E-mail：332113059@qq.com

（收稿：2017-03-20修回：2017-05-05）